卡托普利對D-半乳糖聯(lián)合Aβ1～42致老年癡呆大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響

張淑萍　楊利敏　朱曉峰　秦麗紅　宣兆博　許曉燕　吳成吉　劉文娟　于鳳偉　阿巴斯

(佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院神經(jīng)科，黑龍江　佳木斯　154002)

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卡托普利對D-半乳糖聯(lián)合Aβ1～42致老年癡呆大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響

張淑萍楊利敏朱曉峰秦麗紅宣兆博許曉燕吳成吉劉文娟于鳳偉阿巴斯

(佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院神經(jīng)科，黑龍江佳木斯154002)

摘要〔〕目的觀察人血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑(ACEI)對D-半乳糖聯(lián)合β淀粉樣蛋白(Aβ)1～42致阿爾茨海默病(AD)大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響。方法3個月齡健康SD大鼠75只，隨機(jī)分為青年(A)組、假手術(shù)(B)組、模型(C)組、模型+卡托普利(1.5 mg/kg/d)劑量(D)組、模型+卡托普利(2.5 mg/kg/d)劑量(E)組，每組15只。采用L-NNA腹腔注射制作高血壓模型，D-半乳糖聯(lián)合海馬區(qū)注射Aβ1～42制作AD模型。利用Morris水迷宮，觀察ACEI對高血壓合并AD大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響。結(jié)果平均逃避潛伏期：與C組比，D組、E組明顯縮短(P<0.05)，D組、E組差異不顯著(P>0.05)。穿越平臺次數(shù)：與C組相比，D組、E組穿越平臺次數(shù)明顯增多(P<0.05)，且E組優(yōu)于D組(P<0.05)。藥物干預(yù)后D、E組較造模后穿越原平臺次數(shù)明顯增多(P<0.01)。結(jié)論ACEI可以改善高血壓合并AD大鼠學(xué)習(xí)記憶能力，阻止AD的認(rèn)知功能減退。

關(guān)鍵詞〔〕血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑；阿爾茨海默病；卡托普利；淀粉樣蛋白(Aβ)1～42

第一作者：張淑萍(1969-)，女，副教授，醫(yī)學(xué)碩士，碩士生導(dǎo)師，主要從事神經(jīng)病學(xué)研究。

阿爾茨海默病(AD)的發(fā)病機(jī)制及病因尚不十分確切，亦無有效的抗AD藥物。Gao等〔1，2〕的研究結(jié)果顯示，中樞性血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑(ACEI)作為一類可透過血腦屏障的高血壓藥物，與減緩認(rèn)知下降相關(guān)。本實(shí)驗(yàn)觀察卡托普利對AD大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響，探究ACEI對老年癡呆的影響。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1實(shí)驗(yàn)動物分組3個月齡健康清潔級SD大鼠75只，體重(190.2±21.4)g(哈爾濱醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供)。常規(guī)飼養(yǎng)1 w后，隨機(jī)分為青年組(A組)、假手術(shù)組(B組)、模型組(C組)、模型+卡托普利(1.5 mg·kg-1·d-1)組(D組)和模型+卡托普利(2.5 mg·kg-1·d-1)組(E組)，每組15只。

1.1.2主要藥物和試劑D-半乳糖溶液(上海試劑二廠)、Aβ1～42(上海江萊生物科技有限公司)；左旋硝基精氨酸(L-NNA)(Sigma)；卡托普利片(哈藥集團(tuán)三精制藥諾捷有限責(zé)任公司)。

1.2方法

1.2.1造模與用藥L-NNA 15 mg·kg-1·d-1分兩次腹腔注射，連續(xù)4 w，建立高血壓大鼠模型〔3〕。同時大鼠頸背部皮下注射D-半乳糖0.125 g·kg-1·d-1，連續(xù)注射5 w后，在海馬區(qū)注入凝聚態(tài)Aβ1～42溶液(10 μg/μl)〔4〕。術(shù)后連續(xù)3 d腹腔注射青霉素10萬U/d，制作AD模型。造模成功后，D組給予卡托普利1.5 mg·kg-1·d-1灌胃，E組給予卡托普利 2.5 mg·kg-1·d-1灌胃，A、B和C組以等量生理鹽水灌胃，灌胃體積為20 ml·kg-1·d-1，連續(xù)30 d。

1.2.2行為學(xué)測試參照文獻(xiàn)〔5～7〕，利用Morris水迷宮進(jìn)行定位航行和空間探索試驗(yàn)，檢測大鼠對空間方向感和位置感的學(xué)習(xí)及記憶能力。采用直徑120 cm，高50 cm的圓形水池，預(yù)先在水池中注入含奶粉(濃度以看不見平臺為準(zhǔn))的清水，高出平臺2 cm(水深約30 cm)。溫度(21±1.5)℃，每只動物尋找的平臺位置不變，觀察記錄大鼠自入水到找到平臺的游泳路徑及時間(逃避潛伏期)。設(shè)2 min為最長游泳時間，若大鼠在2 min內(nèi)找到平臺，讓其在平臺停留30 s。若找不到平臺，則將大鼠引導(dǎo)至平臺并停留30 s。每天訓(xùn)練5次，持續(xù)6 d。第7天撤掉平臺，記錄1 min內(nèi)大鼠跨越原平臺相應(yīng)位置的次數(shù)。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法使用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析，秩和檢驗(yàn)。

2結(jié)果

2.1平均逃避潛伏期造模后，各組平均逃避潛伏期，C、D、E組與A、B組相比時間延長(P<0.05，P<0.01)，說明AD后，大鼠的學(xué)習(xí)、記憶能力下降；藥物干預(yù)后第1、2天，各組間平均逃避潛伏期差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，第3天，與A組、B組相比，C組明顯增加(P<0.01)；與C組相比，D組、E組明顯縮短(P<0.05)，D組、E組差異不顯著(P>0.05)。第4天，與A組、B組相比，C組明顯增加(P<0.01)；與C組相比，D組、E組明顯縮短(P<0.05，P<0.01)，D組、E組之間相比，差異不顯著(P>0.05)。第5天，D、E組較C組時間縮短(P<0.05，P<0.01)，但沒有達(dá)到A及B組的水平，見表1 。

2.2120 s穿越平臺次數(shù)造模后，與A組(7.90±1.47)、B組(7.75±1.54)比較，C組(3.85±1.40)、D組(3.80±1.33)、E組(3.85±1.29)穿越平臺次數(shù)明顯減少(P<0.01)，C、D、E組差異不顯著(P>0.05)；藥物干預(yù)后，D組(5.70±1.47)、E組(6.55±1.53)與C組(3.80±1.82)相比，穿越平臺次數(shù)明顯增多(P<0.05)，且E組優(yōu)于D組(P<0.05)，但是尚未達(dá)到A組(7.90±1.56)、B組(7.85±1.45)水平。藥物干預(yù)后D、E組分別較造模后明顯增多(P<0.01)。

組別造模后第1天第2天第3天第4天第5天藥物干預(yù)后第1天第2天第3天第4天第5天A組54.74±8.3746.67±8.0329.58±7.6923.30±7.3818.85±7.4253.47±8.5445.88±8.4828.67±9.6923.50±7.4318.53±7.87B組55.25±9.1645.25±8.4829.47±8.1123.57±7.3619.47±8.6054.16±10.1345.50±9.0428.42±8.8723.40±7.1619.10±8.30C組66.15±11.3260.28±11.291)52.38±10.261)47.75±10.652)42.35±11.242)65.75±11.0459.90±11.6653.85±10.692)47.14±11.312)33.27±10.502)D組65.47±12.0460.55±11.221)52.05±10.351)48.45±10.852)43.10±9.462)63.27±11.5056.45±10.5138.21±9.773)33.47±8.603)29.88±8.433)E組66.82±11.3659.77±10.481)51.80±11.221)47.70±11.802)42.25±10.252)61.70±10.6753.26±10.2236.66±9.832)31.34±8.334)26.46±8.364)

與A組或B組比較:1)P<0.05，2)P<0.01;與C組比較:3)P<0.05，4)P<0.01

3討論

AD是一種以認(rèn)知和記憶損害為主要臨床表現(xiàn)的慢性、進(jìn)行性、神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病。其發(fā)病機(jī)制為細(xì)胞外Aβ沉積所導(dǎo)致的老年斑(SP)的形成，Tau蛋白過度磷酸化導(dǎo)致神經(jīng)元纖維纏結(jié)(NFTs)及神經(jīng)元的凋亡缺失〔8〕等。學(xué)習(xí)記憶的主要部位在海馬區(qū)及皮層經(jīng)元。在高血壓的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用的是腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)(RAS)，其中血管緊張素Ⅱ是主要的效應(yīng)肽。ACEI抑制血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)換為血管緊張素Ⅱ，產(chǎn)生降壓效應(yīng)。卡托普利是ACEI典型代表藥物之一〔9〕。卡托普利可以改善AD大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力，可用于AD的治療，其信號傳導(dǎo)途徑及適當(dāng)?shù)膭┝坑写钊胙芯俊?/p>

參考文獻(xiàn)4

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〔2014-09-11修回〕

(編輯苑云杰)

基金項(xiàng)目：黑龍江省自然科學(xué)基金(No.C201242)

中圖分類號〔〕R742〔

文獻(xiàn)標(biāo)識碼〕A〔

文章編號〕1005-9202(2015)23-6694-02；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2015.23.021