醒腦靜注射液對(duì)腦出血患者血漿MMP—9及TIMP—1的影響

蔣令修　梁宇　陳文武　薛孟周

[摘要] 目的 探討醒腦靜注射液對(duì)腦出血患者血漿中MMP-9及TIMP-1水平的影響。 方法 選擇2014年2月～2015年5月急性腦出血患者60例為研究對(duì)象，隨機(jī)分為研究組和對(duì)照組各30例。研究組在常規(guī)治療基礎(chǔ)上給予醒腦靜注射液治療，對(duì)照組給予常規(guī)治療。比較兩組患者血漿MMP-9及TIMP-1水平，分析患者M(jìn)MP-9與TIMP-1水平的相關(guān)性及其與腦水腫情況的相關(guān)性。 結(jié)果 兩組患者在發(fā)病5 d時(shí)，MMP-9及TIMP-1水平均顯著升高，14 d時(shí)下降。研究組在發(fā)病5 d及14 d時(shí)，MMP-9水平顯著低于對(duì)照組，而TIMP-1水平顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。24 h內(nèi)，兩組腦水腫體積與MMP-9呈正相關(guān)（r=0.682，P=0.761），與TIMP-1水平呈顯著負(fù)相關(guān)（r=-0.489，P=-0.619）；14 d時(shí)，腦水腫體積與MMP-9呈正相關(guān)（r=0.516，P=0.835）。 結(jié)論 醒腦靜能夠顯著降低腦出血患者M(jìn)MP-1升高的程度，提高TIMP-1升高程度，改善患者腦水腫情況。

[關(guān)鍵詞] 醒腦靜；腦出血；基質(zhì)金屬蛋白酶-9；基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制劑

[中圖分類號(hào)] R743.3 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-9701（2015）35-0005-03

[Abstract] Objective To explore the effects of Xingnaojing injection on plasma MMP-9 and TIMP-1 levels for patients with cerebral hemorrhage. Methods A total of 60 patients with acute cerebral hemorrhage from February 2014 to May 2015 were selected as research subjects and randomly divided into the research group and the control group， with 30 patients in each group. The research group was given Xingnaojing injection on the basis of regular treatment， and the control group was given regular treatment. The plasma MMP-9 and TIMP-1 levels of the two groups of patients were compared， and the correlation between MMP-9 and TIMP-1 levels in the patients and their correlation with cerebral edema were analyzed. Results On the fifth day of onset of the disease in the two groups of patients， MMP-9 and TIMP-1 levels were significantly increased， and the levels were reduced on the 14th day. On the fifth day and 14th day of onset of the disease in the research group， MMP-9 level was significantly lower than that in the control group， and TIMP-1 level was significantly higher than that in the control group. The differences were statistically significant（P<0.01）. In 24 h， the volume of cerebral edema in the two groups was positively correlated to MMP-9 （r=0.682， P=0.761）， and was significantly negatively correlated to TIMP-1（r=-0.489， P=-0.619）； on the 14th day， the volume of cerebral edema was positively correlated to MMP-9 （r=0.516， P=0.835）. Conclusion Xingnaojing is able to significantly reduce the increasing degree of MMP-1 in the patients with cerebral hemorrhage， enhance the increasing degree of TIMP-1， and improve patients' cerebral edema.

[Key words] Xingnaojing； Cerebral hemorrhage； Matrix metalloproteinase （MMP-9）； Tissue inhibitor of metalloproteinase （TIMP）

腦出血后，患者發(fā)生復(fù)雜的病理生理改變，導(dǎo)致繼發(fā)性神經(jīng)功能損害，不僅與血腫占位壓迫有關(guān)，還與血腫占位后，周圍腦組織水腫有關(guān)。MMP-9能夠降解基底膜，導(dǎo)致血管源性水腫[1，2]。TIMP-1是MMP-9的特異性抑制劑[3]。動(dòng)物研究顯示，MMP-9與TIMP-1失衡在腦出血后腦組織水腫的發(fā)病中發(fā)揮重要的作用[4]。醒腦靜是中成藥，具有涼血活血、清熱解毒的效果，臨床上可用于急性腦出血急性期的治療[5]。本研究分析醒腦靜對(duì)急性腦出血患者血漿MMP-9與TIMP-1水平的影響，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2014年2月～2015年5月在我院治療的急性腦出血患者60例為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：發(fā)病至入院時(shí)間內(nèi)≤24 h，經(jīng)CT、MRI證實(shí)，符合腦出血診斷標(biāo)準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：繼發(fā)性腦出血，多個(gè)病灶，伴有意識(shí)障礙，合并中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染，腦梗死，合并嚴(yán)重其他系統(tǒng)疾病者。剔除標(biāo)準(zhǔn)：住院期間死亡或者住院時(shí)間不足14 d，中途轉(zhuǎn)外科手術(shù)治療或者轉(zhuǎn)院治療者。將60例患者隨機(jī)分為研究組和對(duì)照組各30例，研究組男19例，女11例，平均年齡（59.4±11.7）歲；對(duì)照組男17例，女13例，平均年齡（60.1±12.1）歲。兩組患者一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。本研究經(jīng)過(guò)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理會(huì)同意。

1.2 方法

對(duì)照組保持安靜，頭抬高20°～30°，減少不必要的搬動(dòng)，對(duì)煩躁、抽搐、頭痛等患者給予鎮(zhèn)靜等治療。給予脫水降顱壓（甘露醇，125 mL/次，每天2～4次，江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H32025228），控制血壓（血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑類，貝那普利，（20～40） mg/d，每天1次，北京諾華制藥有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H20030514）對(duì)癥支持治療等常規(guī)治療。研究組在此基礎(chǔ)上給予醒腦靜治療。醒腦靜注射液（河南天地藥業(yè)，國(guó)藥準(zhǔn)字Z41020664）2 mL+0.9%生理鹽水250 mL，每天2次，靜脈點(diǎn)滴，于入院當(dāng)天就給藥，連續(xù)14 d。

1.3檢測(cè)指標(biāo)

分別于發(fā)病24 h內(nèi)、發(fā)病5 d、發(fā)病14 d檢測(cè)血漿MMP-9及TIMP-1水平。在相應(yīng)的檢測(cè)點(diǎn)，采集晨起空腹靜脈血4 mL，3000 r/min離心10 min，取上清用于檢測(cè)。MMP-9及TIMP-1均采用ELISA方法檢測(cè)，嚴(yán)格按照操作說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.4 水腫量測(cè)量及計(jì)算方法

于發(fā)病24 h內(nèi)、14 d行頭顱CT檢查。血腫體積：長(zhǎng)×寬×層數(shù)×層厚×π/6。長(zhǎng)為血腫面積最大的最長(zhǎng)徑，寬為同一層面與長(zhǎng)徑相垂直的徑長(zhǎng)，層面數(shù)是所有含血腫層面數(shù)，層厚1 cm。腦水腫體積與血腫體積計(jì)算方法相似。選擇含有血腫的最大水腫面積層面，測(cè)量長(zhǎng)、寬，計(jì)算總病灶體積。腦水腫體積為總病灶體積與腦血腫體積之差。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS15.0統(tǒng)計(jì)學(xué)方法進(jìn)行分析。計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用方差分析及t檢驗(yàn)。相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1兩組不同時(shí)間點(diǎn)MMP-9及TIMP水平比較

研究組在發(fā)病5 d時(shí)，MMP-9水平顯著低于對(duì)照組，而TIMP-1水平顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；發(fā)病14 d時(shí)，研究組MMP-9水平顯著低于對(duì)照組，而TIMP-1水平顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。

2.2 腦出血患者不同時(shí)間點(diǎn)MMP-9與TIMP-1的相關(guān)性

24 h內(nèi)，研究組患者M(jìn)MP-9與TIMP-1水平呈顯著負(fù)相關(guān)（r=-0.393）；在5 d時(shí)，MMP-9與TIMP-1呈顯著正相關(guān)（r=0.594）；在14 d時(shí)，兩者之間無(wú)相關(guān)性。對(duì)照組24 h內(nèi)，患者M(jìn)MP-9與TIMP-1水平呈顯著負(fù)相關(guān)（r=-0.693）；在5 d時(shí)，MMP-9與TIMP-1呈顯著正相關(guān)（r=0.894）；在14 d時(shí)，兩者之間無(wú)相關(guān)性。

2.3兩組腦出血患者不同時(shí)間點(diǎn)腦水腫情況

2.4腦出血患者不同時(shí)間點(diǎn)腦水腫與MMP-9與TIMP-1水平的相關(guān)性

研究組，24 h內(nèi)，腦水腫體積與MMP-9呈正相關(guān)（r=0.682），與TIMP-1水平呈顯著負(fù)相關(guān)的關(guān)系（r=-0.489）；14 d時(shí)，腦水腫體積與MMP-9呈正相關(guān)（r=0.516），與TIMP-1水平無(wú)相關(guān)性。對(duì)照組，24 h內(nèi)，腦水腫體積與MMP-9呈正相關(guān)（r=0.761），與TIMP-1水平呈負(fù)相關(guān)（r=-0.619）；14 d時(shí)，腦水腫體積與MMP-9呈正相關(guān)（r=0.835），與TIMP-1水平無(wú)相關(guān)性。

3討論

MMP-9以酶原的形式從胞內(nèi)分泌到胞外，MMP-9在體內(nèi)經(jīng)一系列蛋白酶級(jí)聯(lián)反應(yīng)而激活。金屬蛋白酶組織抑制因子（TIMPs）是MMPs家族的組織抑制劑，廣泛分布于組織和體液中，共價(jià)結(jié)合MMPs而發(fā)揮抑制作用[6-8]。TIMP-1作為MMP-9的抑制劑，與MMP-9的酶原或活化后酶催化區(qū)的羧基末端特異性結(jié)合形成復(fù)合物，特異性抑制MMP-9的活性[9，10]。腦出血后，血腫對(duì)周圍組織造成壓迫，腦細(xì)胞代謝的毒性產(chǎn)物導(dǎo)致一系列炎癥反應(yīng)以及腦水腫，是導(dǎo)致患者病情加重的重要原因。動(dòng)物試驗(yàn)結(jié)果顯示，在急性腦出血大鼠模型中，血腫周圍的炎性細(xì)胞主要為中性粒細(xì)胞，可見(jiàn)大量細(xì)胞因子釋放，細(xì)胞因子與MMP-9具有相互作用[11，12]。炎性因子能夠上調(diào)MMP-9的表達(dá)，MMP-9破壞血管基底膜，降解細(xì)胞外基質(zhì)，增加血管通透性，纖維蛋白等進(jìn)入腦組織，加重腦水腫及炎性細(xì)胞浸潤(rùn)[13]。本研究中也顯示，腦出血患者腦組織血腫情況與MMP-9呈顯著正相關(guān)。

TIMP-1是MMP-9特異性抑制酶。腦出血患者M(jìn)MPs與TIMPs之間的平衡被打破，導(dǎo)致細(xì)胞基質(zhì)被降解，血管通透性增加，血腦屏障被破壞，導(dǎo)致腦組織水腫[14，15]。在本研究中，發(fā)病后5 d，患者TIMP-1水平均有顯著升高，而MMP-9水平也有升高，但使用醒腦靜患者，TIMP-1升高更明顯，而MMP-9升高不如對(duì)照組明顯。提示醒腦靜對(duì)MMP-9的升高具有抑制作用，而對(duì)TIMP-1的升高具有促進(jìn)作用，從而更大幅度地抑制MMP-9的作用，減少腦組織水腫情況。結(jié)果也證實(shí)，在出血后14 d，研究組患者腦組織水腫體積較對(duì)照組小。相關(guān)性分析結(jié)果顯示，MMP-9水平與患者腦組織水腫情況具有顯著正相關(guān)的關(guān)系。提示MMP-9參與了腦出血后繼發(fā)腦組織水腫。兩組患者在24 h內(nèi)，MMP-9與TIMP-1呈顯著負(fù)相關(guān)的關(guān)系，而隨著時(shí)間延長(zhǎng)，在發(fā)病后5 d時(shí)，兩者呈正相關(guān)的關(guān)系，發(fā)病后14 d時(shí)，兩者沒(méi)有顯著相關(guān)性。腦出血患者在發(fā)病后24 h內(nèi)，MMP-9就顯著升高，在發(fā)病后5 d達(dá)到高峰，隨后14 d時(shí)有所下降，而研究組則下降更明顯，低于24 h內(nèi)水平。TIMP-1在24 h內(nèi)也顯著上升，但是與MMP-9呈負(fù)相關(guān)的關(guān)系，可能與MMP-9破壞血腦屏障，導(dǎo)致腦組織水腫有關(guān)。有學(xué)者認(rèn)為在腦出血后24 h內(nèi)，TIMP-1水平與MMP-9水平呈負(fù)相關(guān)，可能與MMP-9水平升高對(duì)其有抑制作用有關(guān)，另外，其他炎性因子增加、Hb裂解及凝血酶等也會(huì)抑制IMP-1釋放。在發(fā)病后5 d，兩者呈正相關(guān)，TIMP-1更多地釋放以發(fā)揮對(duì)抗MMP-9的作用。而醒腦靜組TIMP-1升高的水平更顯著，說(shuō)明對(duì)患者腦水腫具有保護(hù)作用。

綜上所述，腦出血患者M(jìn)MP-9及TIMP-1水平升高，與患者腦水腫相關(guān)。而醒腦靜能夠抑制MMP-9水平的升高，促進(jìn)TIMP-1的分泌，減輕腦水腫程度。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 王婧. 血清IL-6、hs-CRP和MMP-9水平在高血壓腦出血患者中的檢測(cè)價(jià)值[J]. 航空航天醫(yī)學(xué)雜志，2015，26（7）：800-801.

[2] 楊承志，蔚志剛. 安腦寧顆粒對(duì)高血壓腦出血患者血清hs-CRP、IL-1β、MMP-9的影響[J].南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2015，31（3）：298-300.

[3] 張彥敏，申翠，邢淑芳，等. 奧拉西坦對(duì)高血壓腦出血患者血漿TIMP-1和MMP-9水平的動(dòng)態(tài)影響研究[J]. 河北醫(yī)藥，2015，37（6）：884-886.

[4] 李中華，張賀，劉冰，等. 不同壓力高壓氧對(duì)實(shí)驗(yàn)性腦出血大鼠模型血腫周圍水腫及MMP-9和TIMP-1表達(dá)的影響[J]. 中國(guó)老年學(xué)雜志，2014，34（19）：5501-5503.

[5] 馬淑媛，欒照家. 醒腦靜治療急性腦出血的療效及對(duì)血清炎癥因子的影響[J]. 國(guó)際醫(yī)藥衛(wèi)生導(dǎo)報(bào)，2015，21（16）：2431-2433.

[6] 李秀臣. 烏司他丁對(duì)高血壓腦出血手術(shù)患者血清NSE、MMP-9及S100B的影響觀察[J]. 中國(guó)醫(yī)藥指南，2012， 10（30）：536-537.

[7] 李紅琴，曹利民，王競(jìng)男，等. 七葉皂苷鈉聯(lián)合鹽酸賴氨酸對(duì)腦出血大鼠腦水腫及MMP-9表達(dá)的影響[J]. 中國(guó)中醫(yī)藥科技，2015，22（3）：277-279.

[8] 向飛，鄧民強(qiáng)，汪逵. 高血壓腦出血患者經(jīng)丹參酮ⅡA治療后血清白細(xì)胞介素-6及基質(zhì)金屬蛋白酶-9的動(dòng)態(tài)變化[J]. 實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2015，31（1）：131-134.

[9] 蘇彥果，袁發(fā)東，李建明，等. 微創(chuàng)聯(lián)合依達(dá)拉奉對(duì)高血壓腦出血患者M(jìn)MP-9的影響及療效觀察[J]. 中國(guó)實(shí)用神經(jīng)疾病雜志，2014，17（11）：48-50.

[10] 涂鄂文，劉秋庭，李軍鳳，等. 阿托伐他汀在大鼠腦出血中的神經(jīng)保護(hù)作用及對(duì)MMP-9/TIMP-1表達(dá)的影響[J]. 現(xiàn)代診斷與治療，2014，25（5）：961-964.

[11] 何明杰，王恩任，張列，等. 早期微創(chuàng)顱內(nèi)血腫清除術(shù)對(duì)腦出血患者IL-17、MMP-9水平的影響[J]. 成都醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2014，9（2）：146-150.

[12] 宛豐，黃梅，呂衍文，等. MMP-9與腦出血后遲發(fā)性腦水腫的關(guān)系研究[J]. 卒中與神經(jīng)疾病，2014，11（2）：110-112.

[13] 聶志紅，王德發(fā)，馬衛(wèi)琴，等. 醒腦靜對(duì)自發(fā)性腦出血患者血清基質(zhì)金屬蛋白酶-9及神經(jīng)功能的影響[J]. 中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2014，11（5）：75-77.

[14] 涂鄂文，劉秋庭，李軍鳳，等. 阿托伐他汀在大鼠腦出血中的神經(jīng)保護(hù)作用及對(duì)MMP-9/TIMP-1表達(dá)的影響[J]. 現(xiàn)代診斷與治療，2014，25（5）：961-964.

[15] 戴宏偉，王興臣，姬琳，等. 腦出血大鼠血腫周圍MMP-9、TIMP-1及Glu的表達(dá)及抵當(dāng)丸的干預(yù)研究[J].山東中醫(yī)雜志，2013，33（9）：660-663.

（收稿日期：2015-09-30）