促甲狀腺激素受體在甲狀腺癌中的表達(dá)及其臨床作用探討

郭紅麗，雷川云曲靖市第一人民醫(yī)院內(nèi)分泌代謝科,云南曲靖　655000

促甲狀腺激素受體在甲狀腺癌中的表達(dá)及其臨床作用探討

郭紅麗，雷川云
曲靖市第一人民醫(yī)院內(nèi)分泌代謝科,云南曲靖655000

[摘要]目的分析和探討甲狀腺癌患者體內(nèi)促甲狀腺激素受體表達(dá)情況。方法對(duì)整群選取的2011年4月—2015年3月該院腫瘤科收治的65例甲狀腺癌患者臨床資料進(jìn)行回顧性分析，選取30例甲狀腺功能正常的健康人作為對(duì)照組，對(duì)采集的甲狀腺組織進(jìn)行HE染色觀察并進(jìn)行免疫組織化學(xué)檢測(cè)促甲狀腺激素受體在其中的表達(dá)情況。結(jié)果檢測(cè)結(jié)果表明促甲狀腺激素受體在正常甲狀腺組織和甲狀腺癌患者甲狀腺組織中均有表達(dá)，但后者著色明顯要淺，表達(dá)部位均位于細(xì)胞膜的基地側(cè)。在正常甲狀腺組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為100.00%（30/30），顯著高于甲狀腺腫瘤患者的84.84%（28/33）和甲狀腺癌患者的68.75%（22/32）。并且甲狀腺腫瘤患者的陽(yáng)性率顯著高于甲狀腺癌患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論該研究結(jié)果表明，在正常的甲狀腺組織中促甲狀腺激素受體具有較高表達(dá)，隨著甲狀腺組織分化程度的降低其表達(dá)率明顯下降，這一結(jié)論為臨床上分化型甲狀腺癌患者的TSH抑制療法提供了重要的數(shù)據(jù)參考。

[關(guān)鍵詞]甲狀腺癌；促甲狀腺激素受體；表達(dá)率；臨床作用；回顧性分析

該研究對(duì)該院腫瘤科2011年4月—2015年3月間收治的65例甲狀腺癌患者臨床資料進(jìn)行回顧性分析，分析和探討甲狀腺癌患者體內(nèi)促甲狀腺激素受體表達(dá)情況，分析其臨床意義為該患者的TSH抑制療法提供參考依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

該研究整群選取的65例為該院腫瘤科收治的甲狀腺癌患者，根據(jù)腫瘤組織分化程度不同將其分成甲狀腺腫瘤組和甲狀腺癌組，甲狀腺腫瘤組患者33例，年齡在32~69歲之間，平均年齡為（42.6±2.8）歲，其中男性患者8例，女性患者25例；甲狀腺癌組患者32例，年齡在30至70歲之間，平均年齡為（43.1±2.7）歲，其中男性患者7例，女性患者25例；選取30例甲狀腺功能正常的健康人作為對(duì)照組，年齡在31至69歲之間，平均年齡為（42.8±2.3）歲，其中男性6例，女性24例。

1.2檢測(cè)方法

1.2.1 HE染色所有患者均進(jìn)行石蠟連續(xù)切片，HE染色操作步驟如下[1]：①脫蠟。將烤干的切片放入二甲苯（Ⅰ），后再放入二甲苯（Ⅱ）中，各為5 min，以溶去切片上的石蠟。②復(fù)水。是將脫蠟后的切片經(jīng)各級(jí)濃度酒精逐漸下降到水的過(guò)程，即將二甲苯（Ⅱ）中取出的切片移入無(wú)水酒精→95%酒精→80%酒精→70%酒精→蒸餾水，各級(jí)中停留1~5 min。③染色。將蒸餾水洗滌后的切片移入Harris蘇木精液中5~10 min，使細(xì)胞核著色。用自來(lái)水洗去切片上殘余的染液，用1%鹽酸酒精分色數(shù)分鐘。入1%氨水或自來(lái)水浸洗，使之返藍(lán)，在蒸餾水中浸片刻。0.5%伊紅酒精溶液中染色2~5 min，使細(xì)胞質(zhì)著色。④脫水。切片依次入95%酒精（Ⅰ）→95%酒精（Ⅱ）→無(wú)水酒精（Ⅰ）→無(wú)水酒精（Ⅱ），各級(jí)中停留1~5 min。⑤透明。切片入無(wú)水酒精與二甲苯→二甲苯（Ⅰ）→二甲苯（Ⅱ），各級(jí)停留1~5 min。⑥封藏。將切片從二甲苯（Ⅱ）中取出，用紙或布擦去材料周圍的二甲苯。在材料中央滴一小滴樹膠，然后，用鑷子加蓋蓋玻片。待干燥后即可用于觀察。⑦染色結(jié)果。細(xì)胞核呈現(xiàn)鮮艷的藍(lán)色，細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞間質(zhì)呈粉紅至紅色。

1.2.2免疫組織化學(xué)①脫蠟與水化:將切片置于60℃孵箱中干烤約40 min，再將其置于二甲苯中浸泡20 min之后將其置于無(wú)水酒精→95%酒精→80%酒精→70%酒精→蒸餾水，各級(jí)中停留1~5 min；②抗原修復(fù):采用含有EDTA的濃度為0.25%的胰蛋白酶進(jìn)行消化，約10 min;③SP染色:將切片置于3%的雙氧水中，室溫浸泡10 min，從而達(dá)到將內(nèi)源性過(guò)氧化物酶活性阻斷的效果，采用山羊血清進(jìn)行封閉，15 min后加入TSH受體的單克隆抗體，4℃孵育過(guò)夜，之后加入含有生物素標(biāo)記的二抗，最后進(jìn)行顯色觀察[2]。

1.3統(tǒng)計(jì)方法

該研究中所有數(shù)據(jù)均通過(guò)SPSS 20.0軟件進(jìn)行處理，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。

2　結(jié)果

2.1正常人群與甲狀腺腫瘤患者相比

檢測(cè)結(jié)果表明促甲狀腺激素受體在正常甲狀腺組織和甲狀腺癌患者甲狀腺組織中均有表達(dá)，但后者著色明顯要淺，表達(dá)部位均位于細(xì)胞膜的基地側(cè)。在正常甲狀腺組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為100.00%（30/30），顯著高于甲狀腺腫瘤患者的84.84%（28/33）和甲狀腺癌患者的68.75%（22/32），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=4.39，P=0.03＜0.05；χ2=5.37，P=0.02＜0.05），見表1。

2.2甲狀腺腫瘤患者于甲狀腺癌患者相比

甲狀腺腫瘤患者的陽(yáng)性率顯著高于甲狀腺癌患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=4.14，P=0.03＜0.05），見表1。

表1　 3組之間甲狀腺激素受體表達(dá)情況比較[n(%)]

圖1　正常甲狀腺組織以及甲狀腺腫瘤患者甲狀腺切片HE染色結(jié)果

3　討論

甲狀腺癌（Thyroid carcinoma）是一種發(fā)生于頭頸部位的內(nèi)分泌性的常見惡性腫瘤，其中以分化型的甲狀腺癌較為常見，約占90%，中青年女性是該病的高發(fā)人群[3]。與機(jī)體其它部位的惡性腫瘤患者相比而言，甲狀腺癌患者特殊的組織學(xué)特性以及生物學(xué)行為將對(duì)其臨床治療的效果產(chǎn)生較大的影響。根據(jù)美國(guó)國(guó)立綜合癌癥網(wǎng)（National Cancer Network，NCCN）2010年頒發(fā)的甲狀腺腫瘤治療指南中指出[4]，該疾病患者臨床治療的首選方式仍然為外科手術(shù)，此外，左旋甲狀腺素的抑制性治療目前對(duì)于分化型甲狀腺癌還是十分必要的，該方法的基本理論基礎(chǔ)在于機(jī)體的下丘腦-垂體-甲狀腺軸負(fù)反饋系統(tǒng)的工作網(wǎng)絡(luò)。臨床上對(duì)于甲狀腺癌患者給予左旋甲狀腺素進(jìn)行治療，能夠有效地抑制機(jī)體促甲狀腺素的分泌和釋放，有效降低血清中TSH含量，進(jìn)而降低異常刺激對(duì)于殘余甲狀腺組織上的TSH受體的刺激作用，最終達(dá)到抑制甲狀腺癌患者的病灶增長(zhǎng)以及去分化的發(fā)生、發(fā)展[5]。臨床上主要對(duì)分化較好的甲狀腺癌患者采用抑制治療，而對(duì)于分化程度較低或者未分化的甲狀腺癌患者，由于其機(jī)體對(duì)下丘腦-垂體-甲狀腺軸的依賴性相對(duì)較差，因此不能實(shí)施TSH抑制療法[6-7]。

甲狀腺激素受體是G蛋白偶聯(lián)受體的超家族成員之一。其基本生理功能是調(diào)節(jié)機(jī)體甲狀腺的合成以及釋放[8]。其結(jié)構(gòu)上是由α、β兩條多肽鏈部分組成。在生理情況下，當(dāng)有甲狀腺激素與甲狀腺激素受體結(jié)合后，細(xì)胞膜發(fā)生G蛋白的α亞基偶聯(lián)，通過(guò)G蛋白的介導(dǎo)，快速激活腺苷酸環(huán)化酶的活性，導(dǎo)致機(jī)體內(nèi)cAMP的含量持續(xù)升高，此外，該途徑還可以通過(guò)二磷酸肌醇循環(huán)，激活機(jī)體其它的生物學(xué)反應(yīng)途徑[9]。

該研究結(jié)果表明在正常甲狀腺組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為100.00%，顯著高于甲狀腺腫瘤患者的84.84%和甲狀腺癌患者的68.75%。并且甲狀腺腫瘤患者的陽(yáng)性率顯著高于甲狀腺癌患者，這一數(shù)據(jù)與黃靜等報(bào)道結(jié)果接近[7]。臨床在正常的甲狀腺組織中促甲狀腺激素受體具有較高表達(dá)，隨著甲狀腺組織分化程度的降低其表達(dá)率明顯下降，這一結(jié)論為臨床上分化型甲狀腺癌患者的TSH抑制療法提供了重要的數(shù)據(jù)參考，同時(shí)通過(guò)對(duì)促甲狀腺激素受體檢測(cè)能夠?qū)颊呒谞钕倌[瘤惡性程度進(jìn)行預(yù)測(cè)。

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Discussion of the Expression of Thyroid Stimulating Hormone Receptor in Thyroid Cancer and Its Clinical Effect

GUO Hong-li, LEI Chuan-yun
Department of Endocrinology and Metabolism, the First People’s Hospital of Qujing City, Qujing Yunnan Province, 655000 China

[Abstract]Objective To analyze and investigate the expression of thyroid stimulating hormone receptor in thyroid cancer patients. Methods A retrospective analysis was conducted on the clinical data of thyroid cancer patients admitted in the Oncology Department of our hospital from April 2011 to March 2015. And other 30 healthy people with normal thyroid function were selected as the control group. The thyroid tissues of the thyroid cancer patients and control group were stained by HE staining and measured by immunohistochemistry for detecting the expression of thyroid stimulating hormone receptor. Results The results showed that thyroid stimulating hormone receptor in normal thyroid tissue and the thyroid tissue of thyroid cancer patients expressed, but the latter coloring was shallow, the expression site was located in the base side of the cell membrane. The positive expression rate of thyroid stimulating hormone receptor in the normal thyroid tissues was 100% (30/30), significantly higher than 84.84% (28/33) in thyroid tumor patients and 68.75% (22/32) in thyroid cancer patients. And the positive rate of thyroid stimulating hormone receptor in thyroid tumor patients was significantly higher than that in thyroid cancer patients with statistically significant difference (P<0.05). Conclusion The results suggested that the expression of thyroid stimulating hormone receptor in the normal thyroid tissue is higher, but with the degree of differentiation of the thyroid tissue decreases, the expression decreases significantly, which provides an important reference for the TSH suppression therapy in differentiated thyroid cancer patients.

[Key words]Thyroid cancer; Thyroid stimulating hormone receptor; Expression rate; Clinical effect; Retrospective analysis

收稿日期：（2015-06-25）

[作者簡(jiǎn)介]郭紅麗（1979-），女，云南曲靖人，本科，主治醫(yī)師，主要從事甲狀腺疾病、糖尿病、骨代謝疾病方面的研究工作。

[文章編號(hào)]1674-0742（2015）09（c）－0040-03

[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A

[中圖分類號(hào)]R736.1