淺析可影響抗凝血酶Ⅲ活性檢測結果的因素

胡 艷 李曉紅

（成都市第三人民醫院檢驗科 四川 成都 610031）

抗凝血酶Ⅲ是人體內重要的天然抗凝蛋白，其作為血液中最重要的活性凝血因子阻礙因子，具有凝固血液和溶解纖維蛋白的作用[1]。臨床研究證實，人體血液中抗凝血酶Ⅲ的活性可因其罹患不同的疾病而發生變化[2]。因此，檢測患者抗凝血酶Ⅲ的活性對于評估其身體的出、凝血狀態、檢測其病情、判斷其預后等具有重要的意義。最新的臨床實踐表明，血漿樣本的存放溫度和存放時間可影響其抗凝血酶Ⅲ的活性。為了進一步探討可影響抗凝血酶Ⅲ活性檢測結果的因素，我院對近年來在我院進行健康體檢的38例健康人血漿樣本的抗凝血酶Ⅲ活性檢測結果進行回顧性研究?，F將研究結果報告如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 本次研究的對象為2015年3月～2016年3月期間在我院進行健康體檢的38例健康人血漿樣本的抗凝血酶Ⅲ活性檢測結果。

1.2 研究方法 本次研究所使用的儀器和試劑主要包括：由張家港市銳騰機械制造有限公司提供的離心機，由上海涵飛醫療器械有限公司提供的全自動凝血分析儀及其配套的實驗試劑、質控血漿、抗凝血酶Ⅲ（批號：1612054）和PC（protein.C，蛋白C，批號：124596）。本次研究所使用的質控品是由上海涵飛醫療器械有限公司生產的正常質控品和病理質控品（質控品批號：150485）。質控品每天隨血漿樣本一起進行檢測。質控品的檢測結果需在質控標準內方可進行試驗，以確保試驗結果的準確性。我院使用含有109 mmon/L枸櫞酸鈉抗凝劑的定量真空采血管采集患者的肘部靜脈血3 ml，患者的肘靜脈血量與抗凝劑的比例為9：1。將患者的肘靜脈血與抗凝劑充分混合后，置于離心機中，用3000 r/min的轉速進行離心，操作10 min后分離出血漿。采用全自動凝血分析儀對血漿樣本中抗凝血酶Ⅲ的活性進行即時檢測。然后，將每例血漿樣本分為3份，分別在常溫（20℃～25℃）、4℃和-20℃的條件下密封保存，并在放置4h、12h、24h、7d和14d時分別對其進行抗凝血酶Ⅲ的活性檢測。

1.3 統計學處理 我們采用SPSS18.0統計軟件對本研究中的數據進行處理，計量資料采用均數±標準差（±s）表示，采用t檢驗，計數資料用百分比（%）表示，采用χ2檢驗。當P＜0.05時視為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 在常溫條件下血漿樣本的放置時間對其中抗凝血酶Ⅲ活性的影響 在常溫條件下，血漿樣本在放置4h、12h和24h時對其進行抗凝血酶Ⅲ活性檢測的結果均弱于即時檢測時，但差異無統計學意義(P＞0.05)；血漿樣本在放置7d和14d時對其進行抗凝血酶Ⅲ活性檢測的結果均明顯弱于即時檢測時，差異有統計學意義(P＜0.05)。詳情見表1。

表1 在常溫條件下血漿樣本的放置時間對其中抗凝血酶Ⅲ活性的影響（±s）

表1 在常溫條件下血漿樣本的放置時間對其中抗凝血酶Ⅲ活性的影響（±s）

注：與即時檢測相比，#P＞0.05、*P＜0.05。

時間 n 抗凝血酶Ⅲ的活性（mg/L）即時檢測 38 110.8±11.7 4h 38 107.3±10.5#12h 38 104.2±11.3#24h 38 102.2±12.7#7d 38 92.8±9.85*14d 38 83.5±10.2*

2.2 在4℃條件下血漿樣本的放置時間對其中抗凝血酶Ⅲ活性的影響 在4℃的條件下，血漿樣本在放置4h、12h、24h和7d時對其進行抗凝血酶Ⅲ活性檢測的結果均弱于即時檢測時，但差異無統計學意義(P＞0.05)；血漿樣本在放置14d時對其進行抗凝血酶Ⅲ活性檢測的結果明顯弱于即時檢測時，差異有統計學意義(P＜0.05)。詳情見表2。

表2 在4℃條件下血漿樣本的放置時間對抗凝血酶Ⅲ活性檢測結果的影響（±s）

表2 在4℃條件下血漿樣本的放置時間對抗凝血酶Ⅲ活性檢測結果的影響（±s）

注：與即時檢測相比，#P＞0.05、*P＜0.05。

時間 n 抗凝血酶Ⅲ的活性（mg/L）即時檢測 38 110.8±11.7 4h 38 108.9±12.4#12h 38 107.2±11.9#24h 38 106.9±10.5#7d 38 107.2±10.8#14d 38 91.7±9.76*

2.3 在-20℃條件下血漿樣本的放置時間對其中抗凝血酶Ⅲ活性的影響 在-20℃的條件下，血漿樣本在放置4h、12h、24h、7d和14d時對其進行抗凝血酶Ⅲ活性檢測的結果均弱于即時檢測時，但差異無統計學意義(P＞0.05)。詳情見表3。

表3 在-20℃條件下血漿樣本的放置時間對其中抗凝血酶Ⅲ活性的影響（±s）

表3 在-20℃條件下血漿樣本的放置時間對其中抗凝血酶Ⅲ活性的影響（±s）

注：與即時檢測相比，*P＞0.05。

時間 n 抗凝血酶Ⅲ的活性（mg/L）即時檢測 38 110.8±11.7 4h 38 109.8±11.2*12h 38 110.2±12.4*24h 38 109.5±11.8*7d 38 111.2±9.74*14d 38 110.5±10.6*

2.4 在血漿樣本存放時間相同的條件下，存放的溫度越低其中抗凝血酶Ⅲ的活性越強，差異有統計學意義（P＜0.05）。詳情見表1、表2、表3。

3 討論

抗凝血酶Ⅲ是人體內重要的天然抗凝蛋白?？鼓涪笞鳛檠褐凶钪匾幕钚阅蜃幼璧K因子，具有凝固血液和溶解纖維蛋白的作用。人體血液中抗凝血酶Ⅲ的活性可因其罹患不同的疾病而發生變化。臨床研究證實，抗凝血酶Ⅲ活性的增高主要見于血友病、白血病、再生障礙性貧血等疾病的急性出血期。抗凝血酶Ⅲ活性的下降主要見于血栓栓塞性疾病[3-5]。因此，檢測患者抗凝血酶Ⅲ的活性對于評估其身體的出、凝血狀態、檢測其病情、判定其預后等具有重要的意義[6]。我院開展抗凝血酶Ⅲ活性檢測的臨床科室較多，包括血管外科、血液科、神經內科、神經外科等。由于各臨床科室血漿樣本采集的時間缺乏統一性，因此存在著血漿樣本數量多、送檢不及時、存放不合理等情況。這些情況均可影響進行抗凝血酶Ⅲ活性檢測的結果。為了探討可影響抗凝血酶Ⅲ活性檢測結果的因素，我院對近年來在我院進行健康體檢的38例健康人的血漿樣本進行抗凝血酶Ⅲ的活性檢測。本次研究的結果顯示，在常溫條件下，血漿樣本在放置4h、12h和24h時對其進行抗凝血酶Ⅲ活性檢測的結果均弱于即時檢測時，但差異無統計學意義(P＞0.05)；血漿樣本在放置7d和14d時對其進行抗凝血酶Ⅲ活性檢測的結果均明顯弱于即時檢測時，差異有統計學意義(P＜0.05)。在4℃的條件下，血漿樣本在放置4h、12h、24h和7d時對其進行抗凝血酶Ⅲ活性檢測的結果均弱于即時檢測時，但差異無統計學意義(P＞0.05)；血漿樣本在放置14d時對其進行抗凝血酶Ⅲ活性檢測的結果明顯弱于即時檢測時，差異有統計學意義(P＜0.05)。在-20℃的條件下，血漿樣本在放置4h、12h、24h、7d和14d時對其進行抗凝血酶Ⅲ活性檢測的結果均弱于即時檢測時，但差異無統計學意義(P＞0.05)。在血漿樣本存放時間相同的條件下，存放的溫度越低其中抗凝血酶Ⅲ的活性越強，差異有統計學意義（P＜0.05）。這說明，在常溫條件下抗凝血酶Ⅲ的活性可隨血漿樣本放置時間的延長而減弱，但在24h內無明顯變化，在放置7d后其活性會顯著降低。在4℃的條件下，血漿樣本放置14d時其中抗凝血酶Ⅲ的活性可顯著降低。在-20℃的條件下，血漿樣本在放置14d內其中抗凝血酶Ⅲ的活性無明顯變化。因此，在采集患者的血漿樣本后，若不能即時對其進行檢測，在室溫條件下放置的時間不宜超過24h。在4℃的條件下，血漿樣本可放置的時間最長為7d，而在-20℃的條件下，血漿樣本可放置14d。

綜上所述，血漿樣本的存放溫度和存放時間是影響其抗凝血酶Ⅲ活性檢測結果的重要因素。因此，對血漿樣本進行即時檢測或低溫保存有利于保證其抗凝血酶Ⅲ活性檢測結果的準確性。

[1] 曹海軍,李長清,王宗奎，等.不同吸附體系及因素水平對PCC中4類抗凝蛋白的影響研究[J].中國輸血雜志,2012,25(12):1283-1287.

[2] 馮厚梅,李強,許偉珊,陳東妙,鄭磊. 改良Bethesda方法、改良Nijmegen方法和空白法檢測凝血因子Ⅷ抑制物及其影響因素[J]. 南方醫科大學學報,2016,15(04):592-595.

[3] 曹海軍,李志雄,葉生亮，等.洗脫條件及其因素對凝血酶原復合物有效成分的影響[J].中國輸血雜志,2013,26(4):349-353.

[4] 李蕾,王培昌.標本存放溫度和時間對血漿中抗凝蛋白活性的影響[J].檢驗醫學與臨床,2015,09(17):2533-2534.

[5] 田倩,曹海軍,曹雅，等.人凝血酶原復合物中凝血因子活性測定的影響因素研究[J].中國生化藥物雜志,2014,14(2):17-19.

[6] 劉曉薇,謝一舟,盧奎林,陳品全,黃潔,朱玥,席德慧. 人抗凝血酶Ⅲ效價檢測方法驗證及應用[J]. 生物技術世界,2016,06(02):169-170.