松針提取物對(duì)高脂血癥大鼠血脂及主動(dòng)脈壁ICAM-1表達(dá)的影響

黃靜，張愛元，周天罡，盧建濤(濰坊市人民醫(yī)院，山東濰坊261041)

松針提取物對(duì)高脂血癥大鼠血脂及主動(dòng)脈壁ICAM-1表達(dá)的影響

黃靜，張愛元，周天罡，盧建濤
(濰坊市人民醫(yī)院，山東濰坊261041)

摘要:目的研究松針提取物對(duì)高脂血癥大鼠血脂及主動(dòng)脈壁細(xì)胞間黏附分子1(ICAM-1)表達(dá)的影響。方法

將40只大鼠隨機(jī)分成正常對(duì)照組10只和高脂模型組30只，正常對(duì)照組給予正常飲食，高脂模型組給予高脂飲食，喂養(yǎng)2周后隨機(jī)分為高脂對(duì)照組、低劑量組、高劑量組各10只，高脂對(duì)照組繼續(xù)給予高脂飲食，低劑量組給予高脂飲食和松針提取物100mg/(kg·d)，高劑量組給予高脂飲食和松針提取物300mg/(kg·d)。于10周末取靜脈血檢測(cè)各組血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平，免疫組化法檢測(cè)各組主動(dòng)脈壁ICAM-1表達(dá)情況。結(jié)果治療后低劑量組LDL-C水平較高脂對(duì)照組降低(P＜0.05)，但TC、TG、HDL-C無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;高劑量組TC、TG、LDL-C水平均較治療前及高脂對(duì)照組明顯降低(P＜0.05或＜0.01)，HDL-C水平升高(P＜0.05);低劑量組用藥前后血脂水平無明顯變化。高脂對(duì)照組ICAM-1表達(dá)較正常對(duì)照組明顯增加(P＜0.01);低劑量組較高脂對(duì)照組有所下降，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;高劑量組較高脂對(duì)照組顯著下降(P＜0.01)，但仍高于正常對(duì)照組(P＜0.05)。結(jié)論高劑量松針提取物對(duì)高脂血癥大鼠有降血脂作用，并能降低主動(dòng)脈壁ICAM-1表達(dá)，抑制炎癥反應(yīng)，保護(hù)血管內(nèi)皮。

關(guān)鍵詞:高脂血癥;松針提取物;細(xì)胞間黏附分子1;大鼠

血脂代謝紊亂所致的動(dòng)脈粥樣硬化是導(dǎo)致冠心病(CHD)發(fā)生、發(fā)展的重要危險(xiǎn)因素。動(dòng)脈粥樣硬化是一種慢性炎癥過程，細(xì)胞間黏附分子(ICAM)的表達(dá)與慢性炎癥過程密切相關(guān)。2013年10月～2014年10月，我們觀察了松針提取物對(duì)高脂血癥大鼠血脂及主動(dòng)脈壁ICAM-1表達(dá)的影響。現(xiàn)報(bào)告如下。

1　材料與方法

1.1動(dòng)物與試劑清潔級(jí)近交系雄性Wistar大鼠40只，體質(zhì)量180～200 g，40日齡，由濟(jì)寧魯抗制藥公司提供。標(biāo)準(zhǔn)飼料含碳水化合物41.47%、脂肪14.42%、蛋白質(zhì)21.06%，總熱量約為1 560 kJ/100 g。在標(biāo)準(zhǔn)飼料中添加10%熟豬油、5%雞蛋黃、2%膽固醇、1%膽酸鹽即為高脂飼料，總熱量約為1 940 kJ/100 g。松針提取物由寧夏宏德生物技術(shù)有限公司提供，含原花青素25.57%。

1.2動(dòng)物分組與模型制備隨機(jī)抽取10只大鼠給予標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng)(正常對(duì)照組)，其余30只給予高脂飲食喂養(yǎng)(高脂模型組)，2周后高脂模型組取血測(cè)定TC、TG、HDL-C、LDL-C水平。以高脂模型組TC、TG、LDL-C水平較正常對(duì)照組明顯升高(P＜0.05)為模型制作成功。將高脂模型組隨機(jī)分為高脂對(duì)照組、低劑量組、高劑量組各

10只，分別給予高脂飲食、高脂飲食+松針提取物100mg/(kg·d)灌胃、高脂飲食+松針提取物300mg/(kg·d)灌胃，繼續(xù)喂養(yǎng)8周。實(shí)驗(yàn)過程中共4只大鼠死亡，其中高脂對(duì)照組2只、低劑量組1只、高劑量組1只。

1.3血脂檢測(cè)分別于實(shí)驗(yàn)2周(高脂模型確立當(dāng)天)、10周時(shí)，內(nèi)眥靜脈采血，采用酶法、全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清TC、TG、HDL-C、LDL-C水平。

1.4 ICAM-1檢測(cè)于實(shí)驗(yàn)10周采血后處死大鼠，取主動(dòng)脈弓處標(biāo)本，置預(yù)冷的2.5%戊二醛固定，石蠟包埋，用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)主動(dòng)脈壁ICAM-1表達(dá)。ICAM-1表達(dá)于主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞胞質(zhì)和胞膜，呈棕黃色顆粒。顯微鏡顯影系統(tǒng)采集圖像，選擇血管壁隨機(jī)取3個(gè)視野(×400)，計(jì)算機(jī)自動(dòng)測(cè)量并計(jì)算陽性信號(hào)積分光密度。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以珋x±s表示，組間比較用方差分析，組內(nèi)用藥前后比較用配對(duì)t檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1各組用藥前后血脂水平比較見表1。

2.2各組主動(dòng)脈壁ICAM-1積分光密度比較見表2。

表1　各組用藥前后血脂水平比較(mmol/L，)

表1　各組用藥前后血脂水平比較(mmol/L，)

注:與正常對(duì)照組比較，*P＜0.01，#P＜0.05;與高脂對(duì)照組比較，△P＜0.05，P＜0.01;與用藥前比較，□P＜0.05。

組別TC　TG　LDL-C　HDL-C正常對(duì)照組用藥前　2.06±0.39　1.34±0.28　0.62±0.15　1.20±0.24用藥后　2.15±0.43　1.35±0.34　0.68±0.26　1.15±0.28高脂對(duì)照組用藥前　3.45±0.21*　1.92±0.37*　0.95±0.23*　1.13±0.15用藥后　3.65±0.31*　1.98±0.27*　1.18±0.28*　1.06±0.17低劑量組用藥前　3.40±0.26*　1.85±0.37*　0.91±0.21*　1.15±0.32用藥后　3.46±0.26#　1.78±0.34#　0.95±0.18#△　1.25±0.19高劑量組用藥前　3.47±0.32*　1.88±0.35*　0.94±0.15*　1.16±0.18用藥后　3.10±0.28＊□1.53±0.22#□0.75±0.15□1.45±0.38△

表2　各組主動(dòng)脈壁ICAM-1積分光密度比較()

表2　各組主動(dòng)脈壁ICAM-1積分光密度比較()

注:與正常對(duì)照組比較，*P＜0.05，＊＊P＜0.01;與高脂對(duì)照組比較，△P＜0.01;與低劑量組比較，#P＜0.01。

組別　n　ICAM-1積分光密度正常對(duì)照組10　8.43±1.23高脂對(duì)照組　8　20.52±2.79＊＊低劑量組　9　19.03±1.86＊＊高劑量組　9　10.34±1.39＊△#

3　討論

本研究發(fā)現(xiàn)，大鼠經(jīng)高脂飼養(yǎng)后TC、TG、LDL-C水平升高，給予松針提取物治療后，血清TC、TG、LDL-C水平顯著降低，HDL-C水平較用藥前升高。表明松針提取物能顯著改善高脂血癥大鼠的血脂代謝。松針提取物含有多種生物活性物質(zhì)，原花青素是其主要成分之一。原花青素是一種強(qiáng)抗氧化劑，能夠降低機(jī)體的氧化應(yīng)激水平、抑制LDL-C的氧化修飾［1］，并能改善血脂代謝紊亂，降低血清TC水平［2，3］。其機(jī)制可能與原花青素抑制TC和TG合成、并促使其降解和加速其排泄有關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)，原花青素對(duì)影響血脂代謝的基因表達(dá)有一定調(diào)節(jié)作用。有研究發(fā)現(xiàn)，原花青素能夠下調(diào)SREBP2表達(dá)，降低糖尿病小鼠血TC水平。Steffensen等［4］發(fā)現(xiàn)，原花青素能夠顯著增加肝臟中LXRa基因的表達(dá)，從而降低血脂水平。另有研究發(fā)現(xiàn)，葡萄籽原花青素能夠通過與膽汁酸相同的通路激活FXR基因，通過上調(diào)SHP基因表達(dá)以及下調(diào)SREBP1的表達(dá)降低TG水平［5］。

ICAM-1屬于免疫球蛋白超家族，其表達(dá)與慢性炎癥過程密切相關(guān)。LDL在血脂增高時(shí)進(jìn)入動(dòng)脈壁增加，被氧化成為OX-LDL，后者可增加血管內(nèi)皮細(xì)胞ICAM-1的表達(dá)［6～8］。研究顯示，原花青素可通過減少血管內(nèi)皮細(xì)胞中ICAM-1的表達(dá)，減弱內(nèi)皮細(xì)胞與白細(xì)胞之間的相互作用，抑制炎癥性損傷，達(dá)到保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞的目的［9，10］。王峰等［11］發(fā)現(xiàn)，原花青素能夠顯著減少大鼠腦組織中ICAM-1表達(dá)。沈凌鴻等［12］發(fā)現(xiàn)，原花青素能夠降低急性壞死性胰腺炎大鼠體內(nèi)炎癥介質(zhì)ICAM-1水平。本研究發(fā)現(xiàn)，高脂血癥組ICAM-1表達(dá)較正常對(duì)照組明顯升高，給予松針提取物干預(yù)治療后ICAM-1表達(dá)明顯下降。表明松針提取物能夠抑制ICAM-1表達(dá)，抑制炎癥反應(yīng)，保護(hù)血管內(nèi)皮。

綜上所述，松針提取物在高脂血癥的治療中具有重要作用，高劑量松針提取物對(duì)高脂血癥大鼠有降血脂作用，并能降低主動(dòng)脈壁ICAM-1表達(dá)。

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·臨床研究·

收稿日期:( 2015-05-20)

文章編號(hào):1002-266X(2015)34-0030-02

文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A

中圖分類號(hào):R589

doi:10.3969/j.issn.1002-266X.2015.34.012