氘代Rigosertib類似物的合成*

陳　錁，龔　瑜，樊　磊，胥珂馨，陳元偉，(.四川大學生物治療國家重點實驗室，四川成都　6004; .成都海創藥業有限公司，四川成都　6004)

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氘代Rigosertib類似物的合成*

陳錁1，龔瑜2，樊磊2，胥珂馨2，陳元偉1，2
(1.四川大學生物治療國家重點實驗室，四川成都610041; 2.成都海創藥業有限公司，四川成都610041)

摘要:以2，4，6-三羥基苯甲醛為原料制得中間體2，4，6-三甲氧基苯甲醛(2a)和2，4，6-三三氘甲氧基苯甲醛(2b);以4-烷氧基-3-硝基芐硫基乙酸為原料，經氧化、縮合-脫羧、還原、取代和水解5步反應合成了氘代Rigosertib類似物，收率80%～86%，其結構經1H NMR和MS表征。

關鍵詞:2，4，6-三羥基苯甲醛;氘代藥物;合成

對先導藥物潛在代謝點進行改造，可減慢其在人體內的代謝，達到增強藥效的目的。該方法投入小，研發周期短，風險較低，是新藥研發的有效思路［1］。碳氘鍵較碳氫鍵更穩定［2－3］，將氫替換為氘后，既能最大限度的保留藥物分子的原有結構，維持其藥理活性，又可能增強藥物穩定性，延長其半衰期，從而提高藥效，減短藥物服用周期［4］。

Rigosertib【2-【(2-甲氧基)-5-{［(E)-2-(2，4，6-三甲氧基苯基)乙烯基磺酰基］甲基}苯基】氨基乙酸(Chart 1)】是PLK1的非ATP競爭性抑制劑［5］，其對骨髓增生異常綜合征患者的治療已進入三期臨床實驗階段。

Chart 1

為進一步提高Rigoserti藥理活性，增強其代謝穩定性，我們通過分析Rigosertib結構，找到其潛在代謝位點并進行了氘代改造，合成了6個氘代Rigosertib類似物(7a～7c和8a～8c，Scheme 1)。該反應路線較文獻［6］方法收率高，條件溫和，操作簡便。

Scheme 1

1　實驗部分

1.1儀器與試劑

Bruker AV 400 MHz型核磁共振儀(CDCl3為溶劑，TMS為內標); LC-MS 12200-6120型質譜儀［Waters X Bridge C18柱(50 mm×4.6 mm×3.5 μm)］; VARIAN Spectr AA 220FS型原子吸收光譜儀。

4-取代-3-硝基芐硫基乙酸(3a和3b)按文獻［6］方法合成;其余所用試劑均為分析純。

1.2合成

(1)2a和2b的合成(以2a為例)

在反應瓶中加入2，4，6-三羥基苯甲醛(1)1.54 g(10 mmol)和碳酸鉀7.0 g的DMF(15 mL)溶液，攪拌下滴加碘甲烷2.5 mL，滴畢，于60℃反應過夜。冷卻至室溫，加水100 mL，用乙酸乙酯萃取，合并有機相，旋干，剩余物經硅膠柱層析［梯度洗脫劑:V(石油醚)∶V(乙酸乙酯)=50∶1～5∶1］純化得1.14 g黃色固體2a，收率58%。

以氘代碘甲烷替代碘甲烷，用類似的方法合成2b，收率48%，m.p.121℃～122℃;1H NMR δ:10.36(s，1H)，6.07(s，2H)。

(2)4a和4b的合成(以4a為例)

在反應瓶中加入3a 5.1 g(19.6 mmol)和甲醇150 mL，攪拌使其溶解;緩慢滴加過氧硫酸鉀26.5 g的水(80 mL)溶液，滴畢，于室溫反應10 h。過濾，濾液倒入500 mL水中，用乙酸乙酯萃取，有機層依次用水(100 mL)和飽和食鹽水(80 mL)洗滌，用無水硫酸鈉干燥，過濾，濾液減壓濃縮得黃綠色固體3-硝基-4-三氘代甲氧基芐基磺酰基乙酸(4a)5.6 g，收率98%，m.p.136℃～138℃;1H NMR δ:7.98(s，1H)，7.70(d，J=8.7 Hz，1H)，7.15(d，J=8.7 Hz，1H)，4.53(s，2H)，3.86(s，2H); MS m/z:310.3{［M +NH3］+}。

以3b替代3a，用類似的方法合成4b。

(3)5a～5c的合成(以5a為例)

在反應瓶中加入4a 2.0 g(6.8 mmol)，2a 1.4 g(7.2 mmol)，冰乙酸15 mL和芐胺100 μL，回流反應7 h。冷卻至室溫，過濾，濾餅用異丙醇洗滌，干燥得粗品，粗品用異丙醇重結晶得黃綠色固體(E)-1，3，5-三甲氧基-2-［2-(4-三氘代甲氧基-3-硝基芐基磺酰基)乙烯基］苯(5a)300 mg，收率11%，m.p.185℃～188℃;1H NMR δ:7.84(d，J=2.0 Hz，1H)，7.80(d，J=15.6 Hz，1H)，7.63(dd，J=8.7 Hz，2.0 Hz，1H)，7.10(d，J=8.7 Hz，1H)，7.02(d，J=15.6 Hz，1H)，6.09(s，2H)，4.22(s，2H)，3.85(s，3H)，3.84(s，6H); MS m/z:427.2{［M +H］+}。

用類似的方法合成5b和5c。

(4)6a～6c的合成(以6a為例)

在反應瓶中加入5a 300 mg(0.7 mmol)和混合溶劑［V(二氯甲烷)∶V(甲醇)=3∶1］40 mL，攪拌使其溶解;加熱至回流，滴加醋酸8 mL，滴畢，緩慢加入鐵粉1.3 g，反應8 h。冷卻至室溫，用硅藻土濾除鐵粉，濾液旋蒸除溶，加水析出固體，過濾，濾餅干燥得(E)-2-三氘代甲氧基-5-［(2，4，6-三甲氧基苯乙烯基磺酰基)甲基］苯胺(6a)180 mg; MS m/z:397.2{［M + H］+}。

用類似的方法合成6b和6c。6a～6c均無需純化，直接投入下一步反應。

(5)7a～7c的合成(以7a為例)

在反應瓶中加入乙酸鉀600 mg(39 mmol)和甲醇20 mL，攪拌使其溶解;加入2-溴乙酸甲酯700 μL和6a 160 mg(0.39 mmol)，回流反應6 h。除去溶劑，殘余物倒入冰水中，用二氯甲烷萃取，合并有機相，用無水硫酸鈉干燥。旋干溶劑，剩余物經硅膠柱層析［梯度洗脫劑:V(石油醚)∶V(乙酸乙酯)=30∶1～4∶1］純化后用乙醇重結晶得白色固體(E)-2-{ 2-三氘甲氧基-5-［(2，4，6-三甲氧基苯乙烯基磺酰基)甲基］苯胺基}乙酸甲酯(7a)101 mg，收率55%，m.p.186℃～188℃;1H NMR δ:7.64(d，J=15.7 Hz，1H)，7.00(d，J=15.7 Hz，1H)，6.82(d，J=8.1 Hz，1H)，6.68(dd，J=8.1 Hz，1.8 Hz，1H)，6.47(d，J=1.8 Hz，1H)，6.24(s，2H)，4.23(s，2H)，3.87(d，J=3.3 Hz，12H)，3.84(s，2H); MS m/z:469.2{［M + H］+}。

用類似的方法合成7b和7c。

(6)8a～8c的合成(以8a為例)

在反應瓶中加入7a 60 mg(0.128 mmol)，甲醇3 mL和二氯甲烷3 mL，攪拌使其溶解;加入10 mol·L－1氫氧化鈉溶液500 μL，反應2 h。旋除二氯甲烷，剩余物用HPLC純化得白色固體8a 50 mg，收率82%，m.p.203℃～205℃;1H NMR δ:7.12(d，J=15.7 Hz，1H)，6.80(d，J=15.7 Hz，1H)，6.64(d，J=8.0 Hz，1H)，6.52(d，J=8.0 Hz，1H)，6.29(s，1H)，5.85(s，2H)，4.13(s，2H)，3.63(s，3H)，3.55(s，6H)，3.26(s，2H); MS m/z:455.2{［M－Na + H］+} ;鈉原子吸收含量(×10－6):Calcd 5.17，found 5.48。

用類似的方法合成白色固體8b和8c。

8b:收率80%，m.p.203℃～204℃;

1H NMR δ:7.12(d，J=15.7 Hz，1H)，6.80(d，J=15.7 Hz，1H)，6.64(d，J=8.0 Hz，1H)，6.52(d，J=8.0 Hz，1H)，6.29(s，1H)，5.83(s，2H)，4.12(s，2H)，3.64(s，3H)，3.26(s，2H); MS m/z:416.2{［M－Na + H］+} ;鈉原子吸收含量(×10－6):Calcd 5.56，found 6.33。

8c:收率86%，m.p.203℃～204℃;

1H NMR δ:7.12(d，J=15.7 Hz，1H)，6.80(d，J=15.7 Hz，1H)，6.64(d，J=8.0 Hz，1H)，6.52(d，J=8.0 Hz，1H)，6.29(s，1H)，5.83(s，2H)，4.12(s，2H)，3.26(s，2H); MS m/z:464.2{［M－Na +H］+};鈉原子吸收含量(×10－6):Calcd 5.19，found 5.68。

2　結果與討論

合成5a時，由于4a在極性溶劑中的溶解度很小，反應速度慢，反應程度低，加入二氯甲烷后，反應速度加快，反應比較完全。

合成7a時，在柱層析后重結晶，7a純度大大提高，降低了下一步水解反應后的純化難度。

合成8a時，由于合成量少，用傳統的成鹽和重結晶方法不易得到高純度的8a。我們推測將7a的氫氧化鈉水解溶液經低溫濃縮后直接用純水和乙腈進行HPLC制備，可使8a保持羧酸鈉鹽離子狀態。經檢測，8a水溶性良好，pH≈9，無無機鹽存在，說明8a是羧酸鈉鹽。另據鈉原子吸收含量測定顯示，8a分子中僅含一個鈉原子，進一步說明8a是以羧酸鈉鹽的形式存在。

參考文獻

［1］Camille G W.The Practice of Medicinal Chemistry ［M］.Academic Press，2008.

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［6］M V R Reddy，P Venkatapuram，Muralidhar R，et al.Discovery of a clinical stage multi-kinase inhibitor sodium(E)-2-{2-methoxy-5-［(2'，4'，6'-trimethoxystyrylsulfonyl)methyl］phenylamino}-acetate(ON.01910.Na):Synthesis，structure activity relationship and biological activity［J］.J Med Chem，2011，54:6254－6276.

·制藥技術·

Synthesis of Deuterated Rigosertib Analogs

CHEN Ke1，GONG Yu2，FAN Lei2，XU Ke-xin2，CHEN Yuan-wei1，2
(1.State Key Laboratory of Biotherapy，Sichuan University，Chengdu 610074，China; 2.Hinova Pharmaceuticals Inc.，Chengdu 610074，China)

Abstract:Two intermediates，2，4，6-trimethoxybenzaldehyde(2a)and 2，4，6-trideuteromethoxybenzaldehyde(2b)，were prepared from 2，4，6-trihydroxybenzaldehyde.Three deuterated Rigosertib analogs，in yield of 80%～86%，were synthesized by the reaction of oxidization，condensation-decarboxylation，reduction，substitution and hydrolysis from［(4-alkaxy-3-nitrobenyl)-thion］acetic acid.The structures were confirmed by1H NMR and MS.

Keywords:2，4，6-trihydroxybenzaldehyde; deuterated drug; synthesis

通訊作者:陳元偉，教授，E-mail:ywchen@ hinovapharma.com

作者簡介:陳錁(1985－)，男，漢族，重慶綦江人，碩士研究生，主要從事有機合成的研究。E-mail:chenke006@163.com

收稿日期:2014-08-25;

修訂日期:2015-04-27

DOI:10.15952/j.cnki.cjsc.1005－1511.2015.06.0557 *

文獻標識碼:A

中圖分類號:O625.32; R914.5