進行T-SPOT.TB試驗在診斷肺結核方面的價值

程 利

肺結核是臨床上呼吸內科的常見病。此病患者的主要臨床表現為低熱、盜汗、消瘦、乏力、咳痰和咳血等，可嚴重影響其生活質量。因此，對肺結核患者進行快速、準確的診斷具有非常重要的臨床價值[1]。相關的臨床實踐證實，用T-SPOT.TB試驗診斷肺結核可取得很好的效果[2]。為了進一步證實此診斷方法的有效性，筆者對2014年6月至2015年8月期間在我院經結核分枝桿菌分離培養試驗證實患有肺結核的32例患者的臨床資料進行回顧性研究。現將研究結果報告如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

本次研究的對象為2014年6月至2015年8月期間在我院經結核分枝桿菌分離培養試驗證實患有肺結核的32例患者和同期在我院進行常規體檢的16例健康人。我們將32例肺結核患者作為肺結核組，將16例健康人作為健康組。在肺結核組32例患者中，有女性17例，男性15例。他們的年齡在14歲至74歲之間，平均年齡為（47.25±4.17）歲。在健康組16例健康人中，有女性7例，男性9例。他們的年齡在15歲至77歲之間，平均年齡為（48.18±5.72）歲。

1.2 試驗方法

為這兩組人均進行T-SPOT.TB試驗和PPD試驗。進行T-SPOT.TB試驗的方法是：（1）使用由上海復星科技有限公司生產的T-SPOT.TB 試劑盒對受檢者進行T-SPOT.TB試驗。（2）經受檢者的肘正中靜脈采集其靜脈血6ml。（3）使用適量的肝素對受檢者的血樣進行抗凝處理。（4）對血樣中的PBMC（外周血單個核細胞)進行分離處理。（5）將 AIM-V培養液（干細胞無血清培養液） 加入到血樣中，使用五分類計數儀對血樣中的PBMC進行計數，然后將血樣中PBMC的濃度稀釋至 2.5 × 105 個 /ml。（6）將 50 μl的抗原 B（CFP-10）、50 μl的結核桿菌特異性抗原 A（ESAT-6）、50 μl的植物血凝素（PHA）和50 μl的AIM-V培養液分別加入到抗體微孔板的抗原 B 檢測孔、抗原A檢測孔、PHA 對照孔及陰性對照孔中，然后在每個微孔中加入100 μl的血樣。（7）將抗體微孔板置于37攝氏度、二氧化碳濃度為5.0%的培養箱中進行培養，進行培養的時間為15～20個小時。（8）使用PBS溶液對抗體微孔板進行洗滌，然后在每個微孔中加入50μl的顯色溶液，然后將抗體微孔板靜置5～10min。（9）使用蒸餾水對抗體微孔板進行洗滌，然后對各個微孔中的斑點進行計數。進行PPD 試驗的方法是：（1）使用由北京祥瑞生物有限公司生產的卡介菌純蛋白衍生物試劑對受檢者進行PPD 試驗。（2）在受檢者左前臂的尺側注射0.1 ml的卡介菌純蛋白衍生物試劑。（3）在注射完成72小時后，對受檢者注射部位硬結的直徑進行測量。

1.3 試驗結果的判定標準

1.3.1 T-SPOT.TB試驗結果的判定標準[3]受檢者進行T-SPOT.TB試驗的結果符合以下兩種情況之一即可判定為陽性。（1）陰性對照孔中的顯色點數少于6個，且檢測孔中的顯色點數與陰性對照孔中的顯色點數之差大于或等于6個。（2）陰性對照孔中的顯色點數多于或等于6個，但檢測孔中的顯色點數大于陰性對照孔中顯色點數的二倍。

1.3.2 PPD 試驗結果的判定標準[4]（1）陰性：受檢者注射部位硬結的[(縱向直徑+橫向直徑)/2]的值小于5.0 mm。（2）受檢者注射部位硬結的[(縱向直徑+橫向直徑)/2]的值大于或等于5.0 mm。

1.4 敏感度和特異度的計算方法[5]

（1）敏感度=真陽性例數/（真陽性例數+假陰性例數）（2）特異度=真陰性例數/（真陰性例數+假陽性例數）。

1.5 統計學處理

我們使用SPSS16.0軟件包對本次實驗的數據進行處理，計量資料以（X ±s）表示，采用t檢驗，計數資料用n(%)表示，采用x2檢驗，用P＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 用T-SPOT.TB試驗、PPD試驗診斷肺結核敏感度和特異度的比較

用T-SPOT.TB試驗診斷肺結核的敏感度、特異度分別為96.55%和78.95%，用PPD試驗診斷肺結核的敏感度、特異度分別為79.31%和52.63%。用T-SPOT.TB試驗診斷肺結核的敏感度和特異度均明顯高于用PPD試驗進行診斷的敏感度和特異度，二者相比差異具有顯著性（P＜0.05）。詳細結果見表1。

2.2 用T-SPOT.TB試驗和PPD試驗診斷肺結核的

ROC曲線 使用ROC曲線分析法評價用T-SPOT.TB試驗和PPD試驗診斷肺結核的效果。進行ROC曲線分析的結果顯示，用T-SPOT.TB試驗診斷肺結核的效果明顯優于用PPD試驗進行診斷的效果。詳細結果見圖1。

表1 用T-SPOT.TB試驗和PPD試驗診斷肺結核敏感度和特異度的比較 ［n（%）］

3 討論

肺結核是臨床上呼吸內科的常見病。此病患者的主要臨床表現為低熱、盜汗、消瘦、乏力、咳痰和咳血等，可嚴重影響其生活質量。因此，對肺結核患者進行快速、準確的診斷具有非常重要的臨床價值。近年來，隨著醫療技術的不斷發展，使用T-SPOT.TB試驗診斷肺結核的方法逐漸得到了臨床上的認可。為了進一步探討進行T-SPOT.TB試驗在診斷肺結核方面的臨床價值，筆者將2014年6月至2015年8月期間在我院經結核分枝桿菌分離培養試驗證實患有肺結核的32例患者作為肺結核組，再選取同期在我院進行常規體檢的16例健康人作為健康組。為這兩組人均進行T-SPOT.TB試驗和PPD試驗。試驗結束后，比較用T-SPOT.TB試驗和PPD試驗診斷肺結核的敏感度和特異度。本次研究的結果顯示，用T-SPOT.TB試驗診斷肺結核的敏感度、特異度分別為96.55%和78.95%，用PPD試驗診斷肺結核的敏感度、特異度分別為79.31%和52.63%。用T-SPOT.TB試驗診斷肺結核的敏感度和特異度均明顯高于用PPD試驗進行診斷的敏感度和特異度。

綜上所述，進行T-SPOT.TB試驗在診斷肺結核方面具有非常重要的臨床價值。此診斷方法值得在臨床上推廣應用。

[1] 顧國林,周芬,郭健,等. T-SPOT.TB 試驗診斷菌陽及菌陰肺結核的價值[J].實用醫學雜志,2015,31(9):1535-1536.

[2] 張立華,靳文香,賈紅彥,等. T- SPOT 與結核菌素試驗對結核病患者的臨床診斷價值[J].中華臨床醫師雜志,2012,6(14):4107-4108.

[3] 榮蘭香,馬淑紅,艾清,等.T. SPOT- TB 試驗與 PPD 試驗對結核病患者診斷價值相關性比較[J].中國實驗診斷學,2013,17(8):1475-1476.

[4] 江道斌,溫澍,齊曼古力·吾守爾,等.結核感染 T 淋巴細胞斑點試驗在菌陰肺結核診斷中價值[J].中華實用診斷與治療雜志,2013,27(10):1037.

[5] 張玉平,丁顯平,張麗媛,等. T- SPOT. TB、 痰涂片和 TBDNA 檢測在肺結核診斷中的比較研究[J].成都醫學院學報,2013,8(1):49-51.