北五味子果實有效部位的連續制備技術研究

·實驗研究·

北五味子果實有效部位的連續制備技術研究

王安華1,韓志福2,胡高升1

(1.沈陽藥科大學中藥資源教研室，遼寧 沈陽 110016;2.哈藥集團技術中心，黑龍江 哈爾濱 150020)

摘要：目的建立北五味子中不同組分的制備方法。方法通過CO2超臨界流體萃取(SFE)技術得到北五味子油；油中的3種主要木脂素含量及亞油酸含量的檢測方法為高效液相色譜法和氣相色譜法；SFE提取后的殘渣用來提取多酚類成分，提取工藝用響應曲面法優化，提取物中的多酚含量用Folin-cicalteu′s試劑進行測定；多酚提取殘渣再進行水提醇沉，得到北五味子粗多糖，用苯酚硫酸法進行多糖含量測定。結果北五味子油的出油率為14.1%，油中亞油酸含量為58.4%，3種主要木脂素(五味子醇甲、五味子乙素、五味子甲素)總含量為9.44%；北五味子多酚最佳提取條件為60%乙醇，溶液倍量25，提取時間31 min，在此提取條件下，出膏率為41.2%，其中多酚含量為2.56%；北五味子粗多糖提取率為3.88%。結論本制備工藝提高了北五味子的利用率，同時也為開發北五味子中不同藥品及保健功能產品提供了原材料。

關鍵詞：五味子；木脂素；多酚；多糖

基金項目:國家科技支撐計劃(No.2011BAI03B04)

作者簡介：王安華,男，研究方向：中藥資源學，E-mail：sywanganhua@163.com

通訊作者：胡高升，男，博士研究生，研究方向：中藥生物技術，Tel：024-23986501，E-mail：115644862@qq.com

中圖分類號：R284.2文獻標識碼：A

Studies on continuous preparation of effective fractions from FructusSchisandraeChinensis

WANGAn-hua1,HANZhi-fu2,HUGao-sheng1

(1.SchoolofTraditionalChineseMaterialMedica,ShenyangPharmaceuticalUniversity,Shenyang

110016，China;2.HarbinPharmaceuticalGroupTechnologyCenter,Harbin150020,China)

Abstract：ObjectiveTo establish preparative method of the different fractions from Fructus Schisandrae chinensis(FSC).MethodsThe FSC oil was obtained by CO2 supercritical fluid extraction (SFE).The contents of three main lignans and linoleic acid in oil were determined using HPLC and GC,respectively.The debris was subsequently used to extract phenolic compounds,in which,the condition was optimized using response-surface method.The content of phenolic compound was determined using Folin-cicalteu′s reagent.Finally,debris after phenolic compounds extraction was used to extract polysacharrides by water extraction and ethanol precipitation and the content of polysaccharides was determined by phenol-sulfate method.ResultsThe oil yield rate was 14.1%,in which,the sum content of three main lignans reached 9.44% and the content of linoleic acid content in oil was 58.4%.The optimized condition for phenolic compounds extraction was 60% ethanol,solvent/material ratio as 25,sonication time as 31 min.The yield rate was 41.2% and the content of phenolic compounds was 2.56%.The yield of polysaccharide reached 3.88%.ConclusionOur continuous extract method improved the exploration rate of FSC and facilitated the preparation of different extract meeting the different need of medicine and health foods development.

Key words:FructusSchisandraechinensis;Lignan;Polyphenols;Polysaccharides

北五味子[Schisandrachinensis(Turcz.) Baill]為木蘭科(Magnoliaceae)五味子屬(SchisandraMichx.)藥用植物，藥用部位為干燥成熟果實。北五味子主產于亞洲東部和歐洲北部，秋季采摘后，烘干或曬干，除去果梗和雜質，即為北五味子藥材。主要功效為收斂固澀，益氣生津，補腎寧心。主要用于久嗽虛喘、久瀉不止、心悸失眠等[1]。

在《中國藥典》2010年版[1]中收載的制劑中有60個處方制劑含有北五味子藥材，經過調查發現北五味子的國內產量超過90%應用在醫藥領域(包括中成藥，飲片和提取物)，在藥品行業中的需求量屬于穩步提高狀態。在保健品開發方面，國內在北五味子保健品和食品領域的研究和產品較少，目前主要是五味子果酒、猴頭菇羊肚菌五味子膠囊和靈芝五味子膠囊等幾種較小規模的產品。國外對北五味子的保健品開發較成熟，僅韓國北五味子產品每年在國內的銷售額超過1千萬元，其北五味子原材料及提取物主要來自中國，產品形態以化妝品，保健品和食品為主。北五味子果實傳統的提取方法主要的提取目標是木脂素類成分，多用高濃度乙醇提取，提取后的殘渣往往被丟棄，造成了較大的原料浪費，本文對北五味子不同有效部位的提取工藝進行了摸索和優化，旨在得到一種能夠綜合利用五味子資源的提取方法，為開發具有不同功能的保健品提供原料。

1儀器與材料

1.1主要儀器超臨界萃取設備(沈陽東宇藥物技術研究院超臨界制造分公司)；日立高效液相色譜儀(UV-VIS Detector L-2420 Autosampler L-2200 Pump L-2130 Column Heater AT-330)，D2000色譜工作站；Agilent 7890 A型氣相色譜儀(美國安捷倫公司)；毛細管柱DB-WAX(30 m×0.25 mm，0.25 μm)。

1.2主要材料北五味子果實采自遼寧省本溪市清源縣，經過沈陽藥科大學賈景明教授鑒定為北五味子[Schisandrachinensis(Turcz.) Baill]果實。正己烷，乙醇(山東禹王試劑公司)；三氟化硼-甲醇溶液(美國Sigma公司)；氫氧化鉀(天津市大茂試劑廠)和亞油酸(美國Sigma公司)；液相用乙腈，水均為色譜純；苯酚、碳酸鈉(山東禹王試劑公司)，Folin-cicalteu′s試劑(上海生物生工有限公司)；五味子醇甲對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號:110857-200709)；五味子乙素對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號:110765-200710)；五味子甲素對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號:110764-200609)；綠原酸(Sigma-Aldrich 公司)。

2實驗方法

2.1超臨界萃取法提取五味子果實油脂北五味子果實經干燥粉碎后，過20目篩，精密稱定，均勻填裝進萃取釜，超臨界萃取設備型號(CLJ-B-120-35-1)。萃取條件(萃取釜溫度40 ℃，速率7.5 ℃·min-1，壓力30 MPa；分離釜溫度30 ℃，壓力4.5 MPa；萃取時間3 h)。每隔30 min，收集五味子油脂類成分。

2.2運用響應曲面法優化五味子多酚提取工藝以經過超臨界提取后的北五味子果實粉末為原材料，再根據響應曲面法[2]，提取液為不同濃度的乙醇，各組取0.3 g粉末，精密稱定，置具塞錐形瓶中，超聲振蕩提取1次，混勻后離心10 min，轉速4 000 rpm，吸取上清液，測定多酚含量。

2.3五味子果實中多糖的提取精密稱取北五味子粉末5 g(提取完油脂及多酚的五味子果實粉末)，置于150 mL錐形瓶中，加入100 mL蒸餾水，充分混懸，超聲處理20 min，吸取上清液，沉淀再加入100 mL蒸餾水，再充分混懸，超聲處理20 min，合并上清液。在溶液中加入適量 95%乙醇，使溶液中的乙醇濃度為80%，混勻，置于4 ℃下沉淀12 h后，在3 000 rpm，室溫下離心5 min，棄去上清液，加入10 mL丙酮重新混懸沉淀，離心，棄上清液，加入10 mL乙醚重新混懸沉淀，離心，棄上清液，反復多次，然后在室溫下揮干沉淀中的有機溶劑，得到北五味子果實粗多糖干燥粉末。

2.4五味子醇甲、甲素、乙素的含量測定方法

2.4.1色譜條件梯度洗脫條件見表1，Platisil C18色譜柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)，流動相：乙腈-水溶液，流速：1.0 mL·min-1，檢測波長：250 nm，進樣量：10 μL，柱溫：30 ℃。

表1　高效液相梯度洗脫條件

2.4.2對照品溶液的制備分別精密稱取五味子醇甲、五味子甲素及五味子乙素對照品適量，置于10 mL量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，配制成含0.37 mg·mL-1五味子醇甲，0.34 mg·mL-1五味子甲素及0.54 mg·mL-1五味子乙素的標準品溶液。

2.4.3供試品制備精密稱定北五味子果實油脂0.2 g，精密加入乙腈(正己烷飽和)20 mL，混勻，超聲提取20 min，補足失重，室溫離心5 min，轉速4 000 rpm，取上清液過0.45 μm濾膜，得樣品溶液。

2.4.4線性關系考察取對照品，加甲醇制成含60、120、180、240和300 μg·mL-1五味子醇甲；34、68、102、136和170 μg·mL-1五味子甲素及36、72、108、144和180 μg·mL-1五味子乙素的5種不同濃度對照品溶液，進樣體積為10 μL，以峰面積(X)對濃度(Y)進行線性回歸，五味子醇甲、五味子甲素和五味子乙素的回歸方程分別為：Y=6.3×10-5X+8.413 5，r=0.999 9；Y=9.8×10-5X+8.366 4，r=0.999 6；Y=1.0×10-4X+11.285，r=0.999 5。實驗結果表明，五味子醇甲在60～300 μg·mL-1，五味子甲素在34～170 μg·mL-1和五味子乙素在36～180 μg·mL-1范圍內呈良好的線性關系，3種木脂素對照品與五味子樣品HPLC液相色譜圖見圖1。

圖1　北五味子油脂類成分液相色譜圖 A.木脂素標準品; B.超臨界提取的五味子種子油脂 1.五味子醇甲;2.五味子甲素;3.五味子乙素

2.4.5方法學考察精密度試驗:取同一對照品溶液，連續注入高效液相色譜儀6次，進行分析。五味子醇甲的平均峰面積為2 755 906.56，RSD為1.78%，五味子乙素的平均峰面積為963 119.20，RSD為1.84%，五味子甲素的平均峰面積為715 207.50，RSD為1.65%。結果表明，測定方法精密度良好。

穩定性試驗：取同一北五味子油脂供試品溶液，分別在0、3、6、9、12、24 h進樣，五味子醇甲的平均峰面積為1 775 850.23，RSD為1.00%，五味子乙素的平均峰面積為769 914.50，RSD為1.42%，五味子甲素平均峰面積為733 284.32，RSD為1.71%。結果表明樣品在24 h內穩定。

重現性試驗：精密稱取同一北五味子種子油脂0.2 g，平行6份，按 “2.4.3” 項下操作，制得供試品溶液，各10 μL 分別注入高效液相色譜儀。計算求得五味子醇甲的平均含量為6.19 mg·g-1，RSD為1.61%；五味子乙素的平均含量為2.57 mg·g-1，RSD為1.58%；五味子甲素的平均含量為3.80 mg·g-1，RSD為1.21%。結果表明，測定方法重現性良好。

加樣回收率試驗：精密稱取已知含量的北五味子種子油脂樣品0.1 g，共6份，分別加入等同于樣品中五味子醇甲，五味子甲素及五味子乙素含量50%的混合對照品溶液，按供試品項下操作并按含量測定方法進行測定，計算求得五味子醇甲平均加樣回收率為101.08% ，RSD為1.88%；五味子乙素平均加樣回收率為99.45%，RSD為1.12%；五味子甲素平均加樣回收率為99.85%，RSD為0.98%。

樣品測定：按上述色譜條件進行分析，以外標一點法分別計算測定五味子醇甲，五味子甲素和五味子乙素含量。

2.5五味子油脂類成分亞油酸測定方法

2.5.1氣相色譜條件色譜柱：DB-WAX 毛細管柱(30 m×0.25 mm，0.25 μm)；升溫程序：100 ℃，維持3 min，以60 ℃·min-1升至180 ℃·min-1，維持4 min，再以20 ℃·min-1升至250 ℃，維持8 min；加熱器溫度：250 ℃；載氣(N2)壓力:8.586 8 Psi；進樣量：1 μL；分流比：5∶1。

2.5.2樣品處理根據“2.1”項下制備方法得到北五味子果實油脂。精密稱定北五味子果實油脂9 mg，置于2 mL離心管中，加入300 μL 0.5 mol·L-1氫氧化鉀-甲醇溶液，搖勻，置于60 ℃恒溫水浴中皂化反應30 min。將皂化反應物冷卻至室溫，加入600 μL 14%三氟化硼-甲醇溶液，在60 ℃恒溫水浴中加熱3 min，冷卻至室溫后，加入600 μL正己烷萃取，上層溶液供氣相色譜分析用，樣品溶液進樣前稀釋20倍。

2.5.3標準品溶液配制精密吸取亞油酸對照品8.3 mg，按“2.4.2”項下方法配制20.75 mg·mL-1標準品溶液。

2.5.4線性范圍考察精密吸取亞油酸標準品溶液10、20、30、40和50 μL，加正己烷定容至1 mL，配制成亞油酸含量為0.207 5、0.415 0、0.622 5、0.830 0和1.037 5 mg·mL-1的4種溶液，分別精密吸取1 μL進樣，以峰面積(A)對濃度(C)進行線性回歸，得回歸方程：C= 0.000 8A+0.016 9，r=0.998 9。結果表明：在濃度為0.207 5～1.037 5 mg·mL-1范圍內，線性范圍良好。

2.5.5樣品含量測定取亞油酸標準品，北五味子油脂各1 μL進樣，檢測結果圖2。

圖2　北五味子油脂樣品氣相色譜圖 A.油酸標準品;B.北五味子油脂　a.亞油酸

2.6五味子多酚測定方法

2.6.1Folin-cicalteu′s試劑配制及碳酸鈉溶液配制取Folin-cicalteu′s試劑500 μL置于1.5 mL離心管中，精密加入500 μL重蒸水，配制成50%的Folin-cicalteu′s試劑。再取無水碳酸鈉粉末適量，加重蒸水配制成質量分數為2%的碳酸鈉溶液[3]。

2.6.2對照品溶液的制備精密稱取綠原酸適量，置于1 mL量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，配制成含5.0 mg·mL-1綠原酸的標準品溶液。

2.6.3線性關系考察取對照品，加甲醇制成含0、75、100、150、200和500 μg·mL-1綠原酸的6種不同濃度對照品，取上述溶液各30 μL，加入碳酸鈉溶液600 μL后，搖勻，靜置5 min，再加入30 μL Folin-cicalteu′s試劑，搖勻，靜置30 min，750 nm處測吸光度，對吸光度(A)與綠原酸濃度(C)進行線性回歸，回歸方程分別為：C=9.0×10-4A+0.108 6，r=0.999 5。實驗結果表明綠原酸在75～500 μg·mL-1范圍內呈良好的線性關系。

2.6.4供試品溶液的制備精密稱取北五味子果實粉末0.8 g，置于50 mL具塞錐形瓶，加甲醇20 mL，超聲提取40 min(功率250 W，頻率40 kHz)，補足失重，轉速4 000 rpm,離心10 min后吸取上清液，過孔徑0.45 μm微孔濾膜，續濾液為供試品溶液[4]。

2.6.5方法學考察精密度試驗：取同一對照品溶液連續測定6次，平均吸光度為0.43，RSD為1.24%。結果表明，測定方法精密度良好。

穩定性試驗：取同一樣品溶液再0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5和3.0 h進行測定，平均吸光度為0.53，RSD為1.85%，結果表明樣品溶液在3 h內穩定。

重現性試驗：精密稱取同一產地北五味子粉末0.80 g，平行6份，按供試品項下操作，制得供試品溶液，進行測定，平均含量為70.49 mg·g-1，RSD為1.30%。結果表明，測定方法重現性良好。

加樣回收率試驗：精密稱取已知含量的北五味子樣品0.40 g，共6份，分別加入等同于樣品中50%總酚含量的綠原酸標準品，按供試品項下操作，制得供試品溶液，進行測定，平均含量為70.98 mg·g-1，RSD為0.97%。

2.7五味子多糖測定方法

2.7.1五味子粗多糖制備[5]見“2.3”項下操作。

2.7.2苯酚溶液的制備取苯酚100 g，加鋁片0.1 g和碳酸鈉蒸餾，收集180 ℃餾分，吸取此餾分16 mL加蒸餾水200 mL，置于棕色瓶中放冰箱備用。

2.7.3葡萄糖標準溶液制備精密稱取無水D-葡萄糖10 mg，定容于1 mL容量瓶中，制成濃度為10 mg·mL-1的葡萄糖標準溶液，分別精密吸取該濃度標準品溶液，配制成濃度為20、40、80、100、120和150 μg·mL-1的標準品溶液。

2.7.4標準曲線的制備精密量取20 μL葡萄糖各標準品溶液，用蒸餾水補足至200 μL，加入100 μL 5%苯酚溶液，混勻后，再加入98%濃硫酸500 μL，混勻后置于40 ℃水浴反應15 min，流水冷卻至室溫，在紫外可見分光光度計中測定490 nm處的吸光度，以蒸餾水為空白對照，測定3次，取平均值，對吸光度(A)與葡萄糖濃度(C)進行線性回歸，回歸方程為C=3.9×10-3A+0.033 3，r=0.997 1。

2.7.5方法學考察精密度試驗：取同一對照品溶液連續測定6次，平均吸光度為0.49，RSD為1.74%。結果表明，測定方法精密度良好。

穩定性試驗：取同一樣品溶液再0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5和3.0 h進行測定，平均吸光度為0.46，RSD為1.12%，結果表明樣品溶液在3 h內穩定。

重現性試驗：精密稱取北五味子粉末0.8 g，平行6份，按“2.7.1”項下操作，制得供試品溶液，進行測定，平均含量為14.20 mg·g-1，RSD為1.23%。結果表明，測定方法重現性良好。

加樣回收率試驗：精密稱取已知含量的北五味子樣品0.4 g，共6份，分別加入等同于樣品中50%粗多糖含量的葡萄糖標準品，按供試品項下操作，制得供試品溶液，進行測定，平均回收率為99.21%，RSD為0.89%。

3結果

3.1超臨界提取物中木脂素、亞油酸含量及油脂收率北五味子干燥成熟果實粉末中油脂和木脂素提取效率結果如表2所示，超臨界提取北五味子果實后，所得到的油脂成分中亞油酸含量約占51.84%，木脂素類成分的含量分別為五味子醇甲58.37 mg·g-1、五味子甲素12.49 mg·g-1和五味子乙素23.55 mg·g-1，3種木脂素含量之和為94.41 mg·g-1。說明通過超臨界提取法可以得到以亞油酸為主要成分，同時富含木脂素的油脂類成分。

表2　北五味子果實中亞油酸和木脂素提取效率表

3.2北五味子粗多糖提取率經過提取油脂及多酚成分后的北五味子果實粉末，再運用水提醇沉的方法得到北五味子粗多糖，運用苯酚硫酸法，測定粗多糖得率為3.88%。

3.3響應曲面法優化五味子多酚提取工藝本試驗采用Design 8.0.6設計，采用Central Composite設計試驗優化最佳提取方法，選取3個主要因素：乙醇濃度、提取時間和溶液倍量作為自變量，以多酚提取率作為響應函數，采用響應曲面法[2]，通過回歸得出自變量與響應函數之間的統計模型，確定提取北五味子多酚的最佳工藝參數。其中，乙醇濃度、提取時間和溶液倍量分別以A，B，C表示，并以+1.682、+1、0、-1、-1.682分別表示自變量的高、較高、中、較低和低水平，水平及因素編碼見表3。

表3　試驗因素水平及編碼表

表4　得率試驗值與模型預測值

續表4：

序號乙醇濃度(%)提取時間(min)倍量(倍)實測值(%)預測值(%)195020350.670.71205020150.740.87

表5　回歸模型方差分析

表6　回歸方程系數顯著性檢驗

通過對乙醇濃度，提取時間和倍量進行試驗優化設計，由表4可知，得到相應的二次方程模型：Y=1.28+0.019A+0.049B-0.026C-0.067AB+0.038AC+0.030BC-0.38A2-0.079B2-0.17C2。

A/B/A2/B2/BC對提取率的影響極顯著，由表6可知，C/C2對提取率顯著，表明試驗因子對響應值不是簡單的線性關系，因子間一次項的影響相對較小，而二次項影響較顯著。這和回歸方程中的二次項影響較為顯著一致。因素A、B、C都對提取效率的線性效應顯著，因素A2、B2、C2對提取效率的曲面效應顯著，AB、AC、BC對提取效率的交互影響顯著。

在溶液倍量是25倍時，如圖3所示，乙醇濃度和提取時間的交互作用顯著，當乙醇濃度不變時，多酚提取率隨著提取時間的增加，呈現先增加而后遞減的趨勢，當提取時間固定時，多酚提取率隨乙醇濃度的增加也是先增加而后減小，說明當乙醇濃度和提取時間都處于中間水平時，多酚提取率最高。

在提取時間是30 min時，如圖4所示，乙醇濃度和溶液倍量的交互作用顯著，當乙醇濃度不變時，多酚提取率隨著提取時間的增加，呈現先增加而后減少的趨勢，只是變化范圍較小，當倍量固定時，多酚提取率隨著乙醇濃度的變化，先增加后下降，變化范圍遠大于倍量，說明，在一定倍量以后，對多酚提取率的影響不大。在兩者同時處于中間水平時，多酚的提取效率達到最大。

在乙醇濃度為60%時，如圖5所示，提取時間和溶液倍量的交互作用顯著，當提取時間不變時，多酚提取率隨著溶液倍量的增加，也呈現先增加后下降的趨勢，當溶液倍量不變時，多酚提取率隨提取時間的變化，先增加而后下降。結果與上文乙醇濃度和溶液倍量的交互作用類似，充分說明溶液倍量是這3個因素中，對多酚提取率影響最小的。

圖3　乙醇濃度和提取時間交互影響多酚得率的響應曲面圖及等高線圖

圖4　乙醇濃度和倍量交互影響多酚得率的響應曲面圖及等高線圖

圖5　倍量和提取時間交互影響多酚得率的響應曲面圖及等高線圖

通過對二次多項式數學模型的解逆矩陣，求出最大多酚提取率的工藝條件是乙醇濃度59%、提出時間31 min和溶液倍量25倍，預測北五味子多酚提取率達到1.28%。為了進一步驗證回歸模型的有效性，根據得出的最佳工藝參數以及實際操作過程中的可行性進行驗證試驗，在乙醇濃度59%、提出時間31 min、溶液倍量25倍的條件下，實測得率1.25%±0.03%,與預測值相接近，結果表明該模型具有合理性。

4討論

研究證明五味子小極性成分具有一定的毒副作用[6,7]，這是五味子保健品開發過程中的巨大障礙。對韓國的部分五味子產品進行了檢測，結果表明，這些產品中僅含有微量的醇甲，其他的小極性木脂素更是微乎其微。另外，在這些產品中均發現了520 nm下的吸收峰，以及明顯的五味子辛香氣和酸澀口感，這些現象表明，國外五味子開發過程中所應用的提取部位不含或含有很少的木脂素類成分，借鑒這一特點，對五味子的提取工藝進行了以上優化，將五味子提取物多樣化，藥品生產可用油脂和木脂素提取部位，保健品生產可用多酚與有機酸部位以及多糖部位，當然，之前必須要有相應的毒理與藥效學評價。這一提取工藝在國內外尚未系統見報道，我們對其進行了專利申請保護(專利號：ZL201210456113.3)。

通過超臨界提取法得到的北五味子油脂類成分具有環保，提取率高，無有機溶劑殘留等優點，而且其中亞油酸含量為58%，三種主要木脂素類成分含量高達9.4%以上，該油狀提取物中還有其他木脂素，因為對照品缺乏，未對其進行定量，因為都為同類型木脂素，我們對其進行了粗略估計，以醇甲計，油狀物中總木脂素含量約為20%，遠高于目前市面上的五味子提取物中木脂素含量(總木脂素含量為2%～9%)，且雜質類成分干擾少，可開發為多種劑型。

采用響應曲面法優化北五味子多酚提取工藝，是為了確定最佳提取工藝，并且與正交試驗相比，響應曲面法可以給出全面的數據以供評價研究。通過分析發現，影響北五味子多酚提取效率的主要因素是乙醇濃度和提取時間，而倍量影響相對較小，說明在中試生產中，可以重點優化前兩者的條件，而倍量只要在適量的范圍內即可。

已經提取過油脂和多酚的北五味子粉末，然后再提取得到粗多糖的得率為3.88%。與之前果實直接提取的粗多糖得率相比有所減少，分析原因可能與提取多酚的溶劑、溶劑轉移和容器殘留等方面有關系，但是考慮到北五味子果實已經提取過油脂和多酚，因此粗多糖得率是在合理范圍內。

由于人們對北五味子中藥材資源的不重視，導致北五味子野生資源的不斷減少，如何有效地利用現有資源是目前發展中藥產業的一大問題[8]。同時，也有很多關于五味子在抗HIV和抗腫瘤[9]、抗老年癡呆[10]的研究，其應用前景非常樂觀。與以前單一考察某一類成分的提取效率相比，綜合地把北五味子果實中每一步提取之后的殘渣再提取一次，得到其中的主要成分，這樣既可以節約成本，又有利于二次開發北五味子資源。

參考文獻：

[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典2010年版(一部)[S].北京:中國醫藥科技出版社,2010:61-62.

[2] 徐衛東,王佩香,歐陽臻,等.響應曲面法優化桑枝多糖提取工藝[J].中國藥房,2011,22(43):4064-4067.

[3] 郭志欣,顧地周,宋宇輝,等.五味子藥渣中多糖提取工藝研究[J].江蘇農業科學,2013,41(5):254-255.

[4] 趙豐麗,張云鴿,龐冠蘭.柿葉多酚測定條件及其抗氧化活性的研究[J].中國實驗方劑學雜志,2012,18(11):173-176.

[5] 陶移文,田庚文，張文峰.比較兩種提取方法對元胡粗多糖制備及理化性質的影響[J].海南醫學院學報,2011,17(1):17-20.

[6] 何來英,馮曉蓮,孫明,等.五味子的急性毒性和遺傳毒性研究[J].實用預防醫學，2004,11(4):645-648.

[7] 陳曉銘,謝珣,孫晶晶,等.五味子與遠志醇提物的急性毒性和益智藥效研究[J].實用預防醫學，2006,13(4):807-809.

[8] 高劍鋒,劉春山.五味子藥材資源的研究概況[J].中國醫藥指南,2010,8(18):66-69.

[9] Hwanga DS,Shin SY,Lee YN,et al.A compound isolated fromSchisandrachiensisinduces apoptosis[J].Bioorg Med Chem Lett,2011,21(20):6054-6057.

[10] Hu D,Li C,Han N,et al,Deoxyschizandrin isolated from the fruits ofSchisandrachinensisameliorates Aβ1-42-induced memory impairment in mice[J].Planta Med,2012,78:1332-1336.