解郁開心丹對抑郁模型大鼠神經內分泌的影響

解郁開心丹對抑郁模型大鼠神經內分泌的影響

周慶瑩，劉宏巖*

(長春中醫藥大學，長春 130117)

摘要：目的觀察解郁開心丹對抑郁模型大鼠血清皮質醇、β-內啡肽含量的影響。方法將80只SD雄性大鼠隨機分為正常組、模型組、陽性藥物對照組、中藥高劑量組、中藥中劑量組、中藥低劑量組，每組10只；用慢性應激結合孤養的方式造模。造模后給藥，陽性藥物對照組給予鹽酸氟西汀混懸液10 mg/d；中藥高、中、低劑量組分別給予解郁開心丹2.0，1.0，0.5 g/d (給藥體積為每100 g體質量給予1.0 mL)，模型組給予等量生理鹽水，連續28 d。用放射免疫分析法檢測大鼠血清皮質醇、β-內啡肽的含量。結果與模型組比較，中藥高劑量組、中藥中劑量組大鼠的血清皮質醇含量明顯減少，β-內啡肽的含量明顯增加，P<0.05；中藥高劑量組、中藥中劑量組與陽性藥物對照組比較無明顯差異，P>0.05。結論解郁開心丹具有與西藥抗抑郁藥物氟西汀同樣的抗抑郁作用，且抗抑郁作用機制可能與調節大鼠的血清皮質醇、β-內啡肽的平衡有關。

關鍵詞：抑郁模型；解郁開心丹；血清皮質醇；β-內啡肽

DOI:10.13463/j.cnki.jlzyy.2015.04.028

中圖分類號：R285.5文獻標志碼： A

文章編號：1003-5699(2015)04-0401-03

基金項目:吉林省科學技術廳、吉林省自然科學基金(201015118)。

作者簡介:周慶瑩(1985-)，女，碩士研究生，助教，主要從事中醫臨床基礎理論研究。

收稿日期:(責任編輯：趙玉芝2014-08-27)

收稿日期:(責任編輯：趙玉芝2014-12-24)

*通信作者:劉宏巖，電話-18686698557，電子信箱-hong.yancc@163.com

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Effect of Jie Yu Kai Xin Dan on neuroendocrine of model rats with depression

ZHOU Qingying,LIU Hongyan*

(Changchun University of Chinese Medicine,Changchun 130117,China)

Abstract:ObjectiveTo observe the influence of Jie Yu Kai Xin Dan on depression model rats’ serum cortisol and the content of beta-endorphin.MethodsThe 80 male SD rats were randomly divided into normal group,model group,positive drug control group,Chinese medicine high dose group,Chinese medicine medium dose group,Chinese medicine low dose group,each group of 10 rats.Make mould with chronic stress combining with solitary keeps the way.After building,positive drug control group given fluoxetine hydrochloride mixed suspension 10 mg/d.Chinese medicine high,medium and low dose groups,respectively,to give Jie Yu Kai Xin Dan 2.0 g,1.0 g and 0.5 g/d (dosing volume per 100 g body quality give 1.0 mL),model group was given amount of normal saline,continuous 28 d.Radiation immunity analysis method is used to inspect the rat serum cortisol,the content of beta-endorphin.ResultsCompared with model group,high dose of Chinese Medicine group and medium dose group of rats serum cortisol content decreased significantly,the content of beta-endorphin increased significantly,P<0.05.Traditional Chinese medicine (TCM) in high dose group and medium dose group compared with positive drug control group has no significant difference,P>0.05.ConclusionJie Yu Kai Xin Dan has the same antidepressant effect with western medicine antidepressants fluoxetine,and the antidepressant mechanism may be related to regulating the rat serum cortisol and beta-endorphin of balance.

Keywords:depression model;Jie Yu Kai Xin Dan;serum cortisol;beta-endorphin

抑郁癥屬于復雜情感性精神障礙的一種臨床類型，其顯著而持久的情緒低落是抑郁癥主要的特征。發病過程中常伴有無愉快感、興趣喪失；疲乏感或精力減退；精神運動性遲滯或激越；自責、自我評價過低、或有內疚感；聯想困難或自覺思考能力下降；反復出現想死的念頭或有自殺、自傷行為；睡眠障礙；食欲降低或體質量明顯減輕；性欲減退等癥狀[1]。近些年抑郁癥的發病率逐年升高，已經成為當今社會上嚴重危害人類身體健康、社會職業功能和生活質量的重大精神生理心理疾病。 隨著中醫對抑郁癥研究的不斷增加，特別是中藥復方治療抑郁癥方面已經取得了可喜的臨床療效。本文在“解郁開心丹對抑郁大鼠模型腦內單胺類神經遞質影響”的基礎上進一步研究解郁開心丹對抑郁大鼠模型神經內分泌的影響，進而探討解郁開心丹抗抑郁作用機制。

1實驗材料

由長春中醫藥大學基礎實驗動物中心提供的清潔級健康成年雄性SD大鼠80只，體質量(200±20) g，合格證號:SCXK(吉-2011-0004)。“解郁開心丹”由柴胡、桂枝、人參、龍骨、牡蠣、郁金、黃芩、大黃、夜交藤、制何首烏等組成(購于長春市中東市場醫藥超市)。按照灌胃劑量制成水煎劑濃縮至相應濃度后，置4 ℃冰箱儲存備用。鹽酸氟西汀每片20 mg,蘇州中化藥品工業有限公司，批號H20064844。按照灌胃劑量制成相應濃度的混懸液后,置4 ℃冰箱儲存備用。碘皮質醇放射免疫分析藥盒(購于天津九鼎醫學生物工程有限公司)，β-內啡肽放射免疫分析藥盒(購于上海瑞齊生物科技有限公司)。臺式冷凍離心機(sigma Corp3k15)；電子顯微鏡(萊卡)；寶特ELX-808酶標儀(ELX-808)；GHP-9270隔水式培養箱(上海莜翼儀器設備有限公司)；BS-1100型分析天平(天津斯維科科技有限公司生產)。

2實驗方法

2.1動物分組80只SD大鼠自由飲食，自然光線，適應性喂養1周后。按照Open-Field評分方法：將得分≤20分和得分≥130分的大鼠剔除后，剩余的大鼠隨機分為6組。分別為：正常對照組、模型組、陽性藥物對照組、中藥高劑量組、中藥中劑量組和中藥低劑量組(每組10只)。

2.2模型制備具體造模方法采用慢性不可預見性溫和應激結合孤養法制備大鼠抑郁模型。從第8天起,正常組大鼠同籠飼養，自由飲食飲水，不給予任何刺激。其余各組大鼠單籠飼養，并開始接受21 d各種不同的應激刺激。包括：1)禁水24 h；2)禁食24 h；3)4 ℃冰水游泳5 min；4)2 h行為限制；5)夾尾1 min；6)潮濕環境；7)晝夜顛倒。7種應激刺激每天隨機安排1種，每種應激刺激不連續出現。

2.3給藥情況除正常組外，其余各組大鼠在接受28 d應激刺激后，開始灌胃給藥。給藥量如下：陽性藥物對照組給予鹽酸氟西汀混懸液10 mg/d；中藥高、中、低劑量組分別給予解郁開心丹2.0,1.0,0.5 g/d(給藥體積為每100 g體質量給予1.0 mL)，模型組給予等量生理鹽水。

2.4血清皮質醇及β-內啡肽的測定給藥28 d后麻醉大鼠，腹主動脈取血，靜置0.5 h后，離心分離血清后置于-20 ℃冰箱內備用。具體檢測方法如下：

表1　檢測方法

3實驗結果

與正常組比較，模型組大鼠的血清皮質醇含量明顯增加，β-內啡肽含量明顯減少；與模型組比較，中藥高劑量組、中藥中劑量組大鼠的血清皮質醇含量明顯減少，β-內啡肽的含量明顯增加，P<0.05；中藥高劑量組、中藥中劑量組與陽性藥物對照組比較無明顯差異，P>0.05。見表2。

組 別皮質醇/(μg/dL)β-內啡肽/(pg/mL)空白組 36.63484±8.110446 362.6054±65.02026 模型組 46.43663±4.504350#248.9691±36.92187#陽性藥組40.27182±4.660892△349.7105±31.13860△高劑量組39.13687±2.331602△331.1741±62.80685△中劑量組38.07931±7.163919△320.6970±69.51599△低劑量組43.41871±3.550504 263.9594±55.72480

注：模型組與空白組比較，#P<0.05；與模型組相比較，△P<0.05

4討論

有研究認為，抑郁癥患者血漿皮質醇的分泌失去了正常自發性夜間負反饋機制，患者血漿皮質醇濃度分泌增加[2]。研究發現，抑郁癥患者垂體和腎上腺體積增大，與正常人比較約增生38%,增生程度與皮質醇的濃度相關，抑郁恢復皮質醇濃度下降，似乎增生也會隨之恢復[3]。有實驗證明抑郁癥患者皮質醇水平顯著高于對照組,經藥物治療后，其水平明顯降低，與對照組比較無顯著性差異[4]。

β-內啡肽(β-endorphin,β-EP)是體內主要的內阿片肽之一，是1976年發現的最早的內啡肽，其直接前體是由前阿黑皮素水解產生的β-趨脂素，主要集中于下丘腦—垂體軸中。β-內啡肽作為主要的內阿片樣物質，參與欣快、報酬行為等情緒調節活動[5]。有研究發現，抑郁癥患者存在血漿β-內啡肽及其他神經內分泌異常[6]，抑郁癥患者可能存在β-內啡肽的缺乏或功能缺陷[7]。 實驗結果證明，解郁開心丹可以明顯降低抑郁模型大鼠血清皮質醇的含量、增加β-內啡肽的含量，所以解郁開心丹對抑郁癥大鼠模型神經內分泌的異常起到了良性調節作用。由此推斷解郁開心丹的抗抑郁作用機制可能與調節神經內分泌有關。

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