消化道潰瘍患者奧美拉唑代謝相關基因CYP2C19的多態性分布

消化道潰瘍患者奧美拉唑代謝相關基因CYP2C19的多態性分布*

**通信作者 E-mail:junyuan99430@163.com

網絡出版時間：2015-09-11網絡出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/52.5012.R.20150911.2240.004.html

任凌雁， 袁軍**， 陳琨， 駱姝琳， 李偉， 令狐克燕

(貴州省人民醫院 中心實驗室， 貴州 貴陽550002)

[摘要]目的： 分析奧美拉唑代謝相關基因CYP2C19基因在消化道潰瘍患者中的多態性分布。方法： 選取消化道潰瘍患者23例為研究對象，采用基因芯片的方法檢測CYP2C19的基因多態性，并分析CYP2C19基因型總體分布和性別分布。結果： CYP2C19基因型(636GG,681GG)、(636GG,681GA)、(636GA,681GG)、(636GG,681AA)、(636GA,681GA)及(636AA,681GG)攜帶率分別為39.1%、30.4%、13%、8.7%、8.7%、0；CYP2C19基因快代謝型占39.1%，中代謝型占43.5%，慢代謝型占17.4%；不同性別在CYP2CI9基因分型上差異無統計學意義。結論： 檢測CYP2C19基因型可為奧美拉唑個體化用藥提供指導。

[關鍵詞]消化性潰瘍； 奧美拉唑； CYP2C19基因； 多態性,單核苷酸

[基金項目]*黔科平臺[2010]4005；[2010]筑科技合同字3-1號；黔科合sy[2010]3132號

[中圖分類號]R34-33; R573.1

The Polymorphism Distribution of Omeprazole Mechanism

Related CYP2C19 Gene in Patients of Peptic Ulcer

REN Lingyan， YUAN Jun， CHEN Kun， LUO Shulin， LI Wei， LINGHU Keyan

(CentralLaboratory,People'sHospitalofGuizhouProvince,Guiyang550002,Guizhou,China)

Abstract[] Objective: To investigate the polymorphism distribution of omeprazole mechanism related CYP2C19 gene in patients of peptic ulcer. Method: Twenty-three patients of peptic ulcer were selected, then adopting gene chip to test the polymorphism of CYP2C19. Analyzing the general distribution and gender distribution of CYP2C19 genotype. Results: CYP2C19 genotype(636GG,681GG),(636GG,681GA),(636GA,681GG),(636GG,681AA) ,(636GA,681GA) and (636AA,681GG) carrier rates were respectively 39.1%, 30.4%, 13%, 8.7%, 8.7%, 0；the extensive metabolizer, intermediate metabolizer, poor metabolizer of CYP2C19 gene were 39.1%, 43.5% and 17.4%; the gender differences in CYP2C19 had no statistical significance. Conclusion: Testing of CYP2C19 might be useful in suggesting medication of omeprazole.

[Key words] peptic ulcer; omeprazole;CYP2C19 gene; polymorphism，single nucleotide

奧美拉唑是目前針對消化道潰瘍應用最早且最廣泛的有效藥物，但是不同患者使用奧美拉唑的效果大相徑庭，遺傳背景差異可能是造成這一結果的主要因素[1-2]。CYP2C19作為細胞色素氧化酶P450超家族的主要藥物代謝酶，影響奧美拉唑、氯吡格雷等眾多藥物在人體內的代謝速度。由于奧美拉唑在體內經肝細胞微粒體中CYP2C19代謝，生成羥基奧美拉唑而失去活性[3]，而CYP2C19 基因又具有明顯的種族和地域的多態性分布[4]。因此本研究選擇消化道潰瘍患者為對象，檢測其CYP2C19的基因型，從而分析CYP2C19與奧美拉唑治療效果的相關性，旨在更好的為臨床用藥提供指導。

1對象與方法

1.1對象

采集消化科胃十二指腸潰瘍患者23例 ，平均年齡(61.8±3.73)歲，性別不限。經醫院倫理委員會批準，并經研究對象簽署知情同意書。

1.2標本采集

采集肘靜脈血標本2 mL，加入含EDTA抗凝劑的真空抽血管中，顛倒數次混勻，放置-20 ℃冰箱保存備用，使用百傲生物技術(上海)有限公司的全血DNA快速提取試劑盒提取人全血DNA。

1.3PCR擴增

25 μL PCR反應體系組成為：CYP2C19擴增反應液1和2各19 μL， 1 μL反應液A，樣本DNA 5 μL； PCR循環條件：50 ℃ 5 min；94 ℃ 5 min；94 ℃ 25 s，48 ℃ 40 s，72 ℃ 30 s，35個循環，72 ℃ 5 min。

1.4雜交顯色

在百傲全自動雜交儀中設置程序后進行自動雜交。反應結束后取出芯片，將其放入生物芯片識讀儀中，用百傲基因芯片圖像分析軟件進行圖像掃描，軟件自動分析判定所檢測基因的基因型(圖1)。

1.5觀察指標

觀察CYP2C19基因型的總體分布和性別分布，根據文獻[5]將CYP2C19基因分為快代謝型即基因型(636GG,681GG)，中代謝型基因型(636GG,681GA) 、(636GA,681GG)，慢代謝型基因型(636GG,681AA) 、(636GA,681GA)及(636AA,681GG) ，分析各種代謝基因型分布及性別分布。

圖1　芯片探針陣列圖 Fig.1　Chip probe array

1.6統計學方法

將數據采用SPSS 17.0軟件進行統計學分析，組間比較采用χ2檢驗，P<0. 05為差異有統計學意義。

2結果

CYP2C19基因型(636GG,681GG)、(636GG,681GA) 、(636GA,681GG)、(636GG,681AA) 、(636GA,681GA)及(636AA,681GG)芯片圖見圖2。男性和女性CYP2C19基因型頻率分布大致相同，差異無統計學意義(χ2=0.538，P>0. 05)。CYP2C19基因代謝類型的性別分布差異也無統計學意義(χ2=0.518，P>0. 05)。見表1。

圖2　CYP2C19基因型芯片分型結果 Fig.2　The results of the chip probe array of CYP2C19 genotype

基因型檢出總體男性女性快代謝型636GG,681GG9(39.1)6(40.0)3(37.5)中代謝型636GG,681GA7(30.4)5(33.3)2(25.0) 636GA,681GG3(13.0)2(13.3)1(12.5)慢代謝型636GG,681AA2(8.7)1(6.7)1(12.5) 636GA,681GA2(8.7)1(6.7)1(12.5) 636AA,681GG0.00(0.0)0(0.0) 合計23(100)15(100)8(100)

3討論

質子泵抑制劑(proton pump inhibitors,PPIs)是目前治療消化道潰瘍最有效的一類藥物，它通過高效快速抑制胃酸分泌和清除幽門螺旋桿菌達到快速治愈潰瘍的目的。質子泵抑制劑包括奧美拉唑、埃索美拉唑、泮托拉唑、蘭索拉唑等，其中又以奧美拉唑最為常用。有活性的奧美拉唑在人體內可經CYP2C19酶代謝生成無活性的羥基奧美拉唑，由于CYP2C19酶的表達具有遺傳多態性，因此不同基因型的人群對PPI的代謝速度可能有所不同。若患者攜帶CYP2C19突變基因，對奧美拉唑代謝能力弱，藥物容易在體內積累，治愈率較好，但產生不良反應風險可能增高；若患者攜帶野生型基因，對奧美拉唑代謝能力強，易造成療效不佳。因此CYP2C19的基因型檢測對奧美拉唑個體化的指導用藥是十分重要的。

CYP2C19 基因多態性分布具有明顯的種族和地域差異[6]。本研究對23例消化道潰瘍患者進行了CYP2C19基因檢測，從基因型的分布中可以看出男性和女性患者在(636GG,681GG)基因型的檢出率最多，分別為40%和37.5%；在(636GG,681AA)、(636GA,681GA)基因型中都分別有1例檢出，沒有發現(636AA,681GG)基因型。此外不同性別CYP2C19基因多態性分布差異無統計學意義，推測在分析CYP2C19基因多態性對藥物代謝的影響時，可能可以不必過多地考慮性別因素。

對于不同代謝型的患者其臨床用藥也有所差異，對于快代謝型患者，代謝能力強，奧美拉唑在體內暴露量偏低，適當增加劑量或增加每日服藥次數，可顯著提高患者體內藥物暴露量及疾病治愈率。對于中間代謝型患者代謝能力中等，奧美拉唑在體內暴露量處于快慢代謝之間，可按常規劑量用藥，并監測血藥濃度，必要時可按照上述快代謝患者方案適當增加劑量。對于慢代謝型患者，代謝能力差，奧美拉唑在體內暴露量高，按常規劑量用藥即可，并應加強臨床關注以防患者體內藥物積累量高導致不良反應。本研究的23例病例中，中代謝類型檢出率最高達43.5%，在男、女性中分別占46.7%、37.5%，這與中國人群CYP2C19代謝類型分布相似[7]。本次研究的慢代謝型檢出率為17.4%，高于白種人慢代謝檢出率(3%～5%)[8]，與東方人檢出率為13%～23%一致[9]。本次研究對這23例消化道潰瘍患者進行回訪，發現臨床醫生對快代謝患者增加了用藥劑量，療效較好。

CYP2C19基因檢測的開展將有效提高臨床用藥有效性，可以最大限度的提高藥物的安全性，真正意義上做到合理用藥、個性化用藥。

4參考文獻

[1] 張鑒,彭向,李軍,等.質子泵抑制劑的代謝與細胞色素P450[J].山東醫藥, 2005(2):20.

[2] 牛春燕,羅金燕.CYP2C19 基因多態性與質子泵抑制劑對消化性潰瘍患者抑酸效應的關系[J].世界華人消化雜志, 2007(19):2551-2155.

[3] 江爾勝,汪涓,孫啟泉,等. 奧美拉唑體內藥物分析[J].山東醫藥工業, 2003(4):12.

[4] 謝婧,胡欣,楊麗萍. CYP2C19* 17多態性對氯吡格雷臨床療效影響的系統評價[J].中國循證醫學雜志, 2014(3):271-276.

[5] 李鵬飛,楊海波, 趙蔭濤, 等.冠心病介入患者氯吡格雷藥物代謝相關基因CYP2C19的多態性分布[J].中國實用醫刊, 2014(10):64-65.

[6] Hulot JS, Hajjar R, Montalescot G. Clopidogrel and CYP2C19 testing: ready for clinical prime time[J], Clin Chem, 2012(1):154-157.

[7]梁艷, 劉振華, 白清清, 等.CYP2C1基因型與奧美拉唑治療消化道潰瘍療效的相關性[J].武警醫學, 2014(2):142-147.

[8] 陳琿,蔡泓敏,馮端浩,等.CYP2C9和CYP2C19基因多態性對藥物代謝的影響及個體化用藥研究進展[J].中國藥物應用與檢測, 2014(4):240-243.

[9] 嚴非,夏春華,熊玉卿.CYP2C19 基因多態性對藥物代謝的影響及其個體化用藥[J]. 中國臨床藥理學與治療學, 2010(8):949-953.

(2015-05-26收稿，2015-07-10修回)

中文編輯： 周凌； 英文編輯： 趙毅