喉鱗癌中過氧化物增殖激活受體γ、Survivin和10號染色體缺失張力蛋白同源磷酸酶基因的表達及意義

喉鱗癌中過氧化物增殖激活受體γ、Survivin和10號染色體缺失張力蛋白同源磷酸酶基因的表達及意義

孫旭云陳建國江祺川康健

(遼寧醫學院附屬第一醫院耳鼻咽喉科，遼寧錦州121001)

摘要〔〕目的分析喉鱗癌中過氧化物酶增殖激活受體(PPAR)γ、生存素(Survivin)和10號染色體缺失張力蛋白同源磷酸酶基因(PTEN)的表達及其臨床價值。方法87例喉鱗癌術后患者作為觀察組，留取腫瘤的蠟塊組織。72例喉鱗狀上皮不典型增生組織作為對照組。72例癌旁正常黏膜組織作為正常對照組。應用免疫組化SP法檢測組織PPARγ、Survivin和PTEN的表達。結果觀察組Survivin表達明顯高于對照組和正常對照組，觀察組PPARγ和PTEN表達明顯低于對照組和正常對照組。觀察組PPARγ、Survivin和PTEN表達陽性率在不同分化程度和不同Ki67表達增殖指數中差別顯著，Survivin和PTEN表達陽性率與腫瘤最大徑、淋巴結轉移相關。PPARγ、Survivin和PTEN未見明顯相關性。結論喉鱗癌術后組織中Survivin高表達、PPARγ和PTEN低表達可以促進腫瘤發生和進展。PPARγ、Survivin和PTEN在不同臨床特征中的表達具有一定差異性。PPARγ、Survivin和PTEN之間未見明顯的協同作用。

關鍵詞〔〕喉鱗癌；過氧化物增殖激活受體(PPAR)γ；Survivin；10號染色體缺失張力蛋白同源磷酸酶基因(PTEN)

中圖分類號〔〕R76〔文獻標識碼〕A〔

第一作者：孫旭云(1964-)，女，碩士，副主任醫師，主要從事耳鼻咽喉頭頸疾病研究。

喉鱗癌病變發展過程中常伴有前期不典型增生等病變。病變發展過程中多種基因和蛋白具有顯著調節作用〔1，2〕。過氧化物酶增殖激活受體(PPAR)γ是核受體超家族成員，廣泛表達在脂肪、小腸上皮細胞等組織中〔3，4〕。早期人們認為其功能主要是調節脂肪細胞分化及糖、脂代謝，但是越來越多的證據表明PPAR-γ能夠調節多種生物學功能〔5，6〕，并且具有抑制腫瘤發生發展的作用。生存素(Survivin)是一種凋亡抑制蛋白，是抑制細胞凋亡的關鍵分子〔7〕。10號染色體缺失張力蛋白同源磷酸酶基因(PTEN)是較為經典的抑癌基因，其基因產物表達磷酸酶的活性，具有明顯的腫瘤抑制作用〔8〕。本文將重點關注PPARγ、Survivin和PTEN在喉鱗癌中的表達特征及相關性。

1材料與方法

1.1一般資料觀察組選自我院2011年1月至2014年6月行手術治療的87例喉鱗癌患者。術后留取腫瘤組織，并經病理醫師確診，并符合WHO診斷標準。男47例，女40例；年齡52～83歲，平均(64.8±5.7)歲。其中高分化30例，中分化26例，低分化31例。選擇72例喉鱗狀上皮不典型增生組織作為對照組，男37例，女35例；年齡50～78歲，平均(62.1±5.8)歲。選擇觀察組中的72例癌旁距腫瘤邊緣>3 cm的正常黏膜組織為正常對照組，男女各36例；年齡53～80歲，平均(60.9±5.0)歲。

1.2PPARγ、Survivin和PTEN檢測PPARγ、Survivin和PTEN蛋白檢測均應用免疫組化SP法、DAB顯色。操作嚴格按說明書進行，嚴格質控。

1.3PPARγ、Survivin和PTEN結果判讀PPARγ、Survivin和PTEN均以細胞質中出現棕黃色為陽性細胞，隨機選擇10個上皮細胞密集且染色較為集中的區域(熱點區)，計算陽性率，取平均值。以<25%為陰性，以≥25%為陽性。

1.4統計學方法應用SPSS13.0統計軟件進行χ2分析和線性相關分析。

2結果

2.1三組PPARγ、Survivin和PTEN陽性表達比較觀察組Survivin陽性表達明顯高于對照組和正常對照組，觀察組PPARγ和PTEN陽性表達明顯低于對照組和正常對照組。即正常對照組、對照組和觀察組中Survivin陽性表達有明顯升高趨勢。正常對照組、對照組和觀察組中PPARγ和PTEN陽性表達有明顯下降趨勢。見表1。

表1　三組中PPARγ、Survivin和PTEN

2.2PPARγ、Survivin和PTEN陽性表達在不同臨床特征中的表達觀察組PPARγ、Survivin和PTEN表達陽性率在不同分化程度和不同Ki67表達增殖指數中差別顯著，Survivin和PTEN表達陽性率與腫瘤最大徑、淋巴結轉移相關。見表2。

表2　PPARγ、Survivin和PTEN陽性表達在觀察組

2.3觀察組PPARγ、Survivin和PTEN表達相關性PPARγ、Survivin和PTEN之間均未見明顯相關性(P>0.05)。

3討論

喉鱗癌發生與多種因素有關，如煙草、酒精濫用等，其與個體的生活方式也有較大關系。腫瘤發展過程中有明顯的前驅病變，如鱗狀上皮的增生、單純性增生和不典型增生等。其在腫瘤性促進蛋白的作用下，使上皮細胞癌變并呈浸潤性生長。臨床特征中最重要的是聲音嘶啞，其他表達還有吞咽困難，異物感、咯血等。腫瘤常表現為邊界較清楚的扁平斑塊，有時表面呈潰瘍性。顯微鏡下顯示鱗狀細胞的分化，可見不同形態的核分裂象，常侵襲并穿透基底膜，周圍可見明顯的間質反應。組織學分級對判斷腫瘤的生長和預后的作用可能有限。突變型P53和細胞增殖指數是重要的蛋白指標，不僅可以判斷腫瘤預后，還可以在一定程度上指導手術的方式〔9〕。PPAR-γ具有一定的抗腫瘤作用，主要作用途徑有：①阻滯細胞周期、抑制腫瘤細胞的增殖，其途徑有P21和P27等；②誘導細胞分化〔10〕。③誘導腫瘤細胞凋亡：通過激活凋亡基因Proline Oxidase等促進凋亡進程〔11〕；④抑制血管生成和降低腫瘤的侵襲能力〔12，13〕。研究認為PPAR-γ可以促進腫瘤進展。張萌等〔14〕通過對肝細胞癌中PPAR-γ的表達進行檢測，發現PPAR-γ在肝細胞癌中的陽性率為51.3%，顯著高于正常肝組織中陽性率19.0%，認為PPAR-γ的表達可能具有組織特異性，且其表達可能有多向潛能。Survivin基因定位于17q25，編碼含有142個氨基酸，分子量16.5 kD〔15〕。其發揮作用是通過效應細胞蛋白酶受體1來調節凋亡進程的。近年來顯示Survivin的作用可能更多，如對腫瘤細胞增殖的調控作用，對血管生成的誘導作用等〔16〕。PTEN具有磷酸酯酶活性，其對腫瘤的作用主要是抑制腫瘤形成和進展〔17〕。研究認為PTEN可以引起細胞內第二信使磷脂酰肌醇(3，4，5)-三磷酸(PIP3)去磷酸化后形成PIP2，使PI3K-AKT的信號下調，抑制非貼壁依賴性細胞增殖，同時抑制腫瘤生長〔18，19〕。

本實驗結果提示Survivin高表達、PPARγ和PTEN低表達是促進腫瘤形成的重要蛋白指標。PPARγ和PTEN具有明顯的腫瘤抑制作用。提示Survivin高表達、PPARγ和PTEN低表達時使腫瘤分化更低，或者三者在調節腫瘤進展過程中通過調節分化而影響腫瘤的進展進程。Survivin和PTEN異常表達可以促進腫瘤的生長和腫瘤的淋巴道播散，此結果也提示Survivin和PTEN高表達可以有效促進腫瘤進展。徐萬宇等〔20〕在直腸癌的研究認為Survivin和PTEN呈負相關，具有負向作用，認為腺癌中由于PTEN失活，對PIP3去磷酸化的功能改變，使PI3K信號活化，引起核轉錄因子κB激活，上調Survivin表達后，有效抑制腫瘤細胞和血管內皮細胞凋亡，使進腫瘤細胞增殖和血管形成，加速腫瘤進展。而在本實驗中并未觀察到二者的協同作用，其可能是鱗癌與腺癌的蛋白表達特點不同所致，也可能是喉癌本身的特殊性所致，但是Survivin和PTEN，甚至其與PPARγ到底是否存在關聯性，有待在不同類型腫瘤中進行更多實驗來證實。綜上，PPARγ、Survivin和PTEN異常表達參與喉鱗癌形成和進展，三者發揮作用通路可能不相同。

4參考文獻

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〔2014-01-19修回〕

(編輯苑云杰)