速生高抗雄性楊的組織培養(yǎng)與快繁研究

劉廣卿　丁芳　孫喜云　孫鳳嶺

摘要：利用正交試驗研究不同基本培養(yǎng)基，不同濃度6-BA、NAA、IBN、ZT等5個因子對速生高抗雄性楊樹增殖及壯苗和生根的影響，結(jié)果表明：5個因素對于楊樹側(cè)芽增殖的影響由強(qiáng)到弱依次為：基本培養(yǎng)基>6-BA濃度>IBN濃度>ZT濃度>NAA濃度。5個因素對于楊樹生根的影響由強(qiáng)到弱依次為：基本培養(yǎng)基>6-BA濃度>ZT濃度>NAA濃度>IBN濃度。最適宜楊樹增殖的培養(yǎng)基為：1/2MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L+IBN 0.5 mg/L+ZT 0.15 mg/L，最適宜楊樹壯苗與生根的培養(yǎng)基為：WPM+6-BA 1.0 mg/L+NAA 1.5 mg/L+IBN 1.0 mg/L+ZT 0.05 mg/L。

關(guān)鍵詞：速生高抗雄性楊；增殖；壯苗；生根；培養(yǎng)基篩選；激素

中圖分類號： S792.110.5 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號：1002-1302（2015）10-0055-02

楊樹是華北、華東地區(qū)栽培量最大的樹種，其特點是生長迅速、高大挺拔、迅速成林，能防風(fēng)沙、吸收廢氣。楊樹可廣泛用于生態(tài)防護(hù)林、 三北防護(hù)林、農(nóng)林防護(hù)林、工業(yè)用材林。楊樹作為道路綠化、園林景觀也是非常優(yōu)秀的樹種。目前，很多人摒棄原有生長速度稍緩的雄性楊，大量栽培速生的雌楊樹，以致每年四五月份楊絮漫天飛揚，近年來，楊絮已經(jīng)成為污染環(huán)境、引發(fā)火災(zāi)的重要原因之一。四五月份正趕上冬小麥灌漿期，大量楊絮包裹在小麥植株上，影響其光合作用，造成小麥大面積減產(chǎn)。近年來，三倍體楊等陸續(xù)問世，但由于其在材質(zhì)、抗蟲性等方面存在一些問題，阻礙了三倍體楊的大面積推廣，速生高抗雄性楊具有材質(zhì)優(yōu)良、抗蟲、抗病、速生等特征，是取代現(xiàn)有楊樹品種的不二選擇[1]。為了盡快獲得大量速生高抗雄性楊幼苗，筆者采用正交試驗方法，對楊樹組培苗進(jìn)行瓶內(nèi)增殖與生根，篩選出最適宜的組培苗壯苗與增殖的培養(yǎng)基配方，旨在為促進(jìn)楊樹產(chǎn)業(yè)化發(fā)展提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

速生高抗雄性楊。

1.2 方法

取當(dāng)年生枝條，獲取無菌瓶苗，篩選出適合其增殖壯苗及生根的培養(yǎng)基。

1.2.1 試驗設(shè)計 采用MS、WPM、1/2MS、1/2 WPM培養(yǎng)基作為基本培養(yǎng)基，6-BA、NAA、IBN、ZT 4種植物激素各設(shè)4個梯度水平，采用正交試驗進(jìn)行最佳培養(yǎng)基激素配比篩選（表1）。培養(yǎng)基中均加入蔗糖30 g/L、瓊脂6 g/L，pH值為5.8，每個培養(yǎng)基分裝8瓶，經(jīng)高壓滅菌后待用。

1.2.2 材料處理 選擇生長健壯的植株，剪取當(dāng)年生、半木質(zhì)化腋芽飽滿的枝條5～10 cm，去掉可見葉，在流動的自來水中沖洗15～20 min，揩干水分。在無菌室內(nèi)的超凈工作臺上用75%乙醇處理30 s，0.1%HgCl2滅菌 10 min，用無菌水沖洗5～7次，剪成長0.5～1.0 cm、含有1～2個腋芽的莖段，接種到基本培養(yǎng)基中，待腋芽長出1～2 cm再接種到增殖培養(yǎng)基中進(jìn)行增殖培養(yǎng)，繼代增殖以后，轉(zhuǎn)入壯苗生根培養(yǎng)基中進(jìn)行壯苗生根培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度26 ℃，光照時間12 h/d，光照強(qiáng)度2 000 lx，每3 d記錄1次，共記錄45 d。采用正交試驗設(shè)計，共 16個處理，試驗因子見表1，每個處理8瓶，每瓶接種3～4個莖段。

1.2.3 統(tǒng)計方法 接種后30 d，觀察不同處理的生根數(shù)、側(cè)芽數(shù)，計算側(cè)芽率、生根率[2]，并對統(tǒng)計結(jié)果進(jìn)行方差分析。

2 結(jié)果與分析

由表2、表3可知，不同培養(yǎng)基組合對楊樹側(cè)芽率影響不同，在基本培養(yǎng)基為1/2MS、6-BA濃度為1.0 mg/L、NAA濃度為1.0 mg/L、BN濃度為0.5 mg/L、ZT濃度為 0.15 mg/L 時增殖效果最佳。這5個因素對于楊樹側(cè)芽增殖的影響由強(qiáng)到弱依次為：基本培養(yǎng)基>6-BA濃度>IBN濃度>ZT濃度>NAA濃度。基本培養(yǎng)基對楊樹增殖的影響最為顯著。由表2、表4可知，不同培養(yǎng)基組合對楊樹壯苗率影響不同，其中在基本培養(yǎng)基為WPM、6-BA濃度為 1.0 mg/L、NAA濃度為1.5 mg/L、IBN濃度為1.0 mg/L、ZT濃度為0.05 mg/L時生根效果最佳。這5個因素對于楊樹生根的影響由強(qiáng)到弱依次為：基本培養(yǎng)基>6-BA濃度>ZT濃度>NAA濃度>IBN， 6-BA、NAA、IBN、 ZT 不同水平對速生楊樹的生根影響并不顯著，說明速生高抗雄性楊樹生根條件要求不高，屬于容易生根的植物。

3 結(jié)論與討論

實際生產(chǎn)過程中，除了培養(yǎng)基的種類和各類植物生長調(diào)節(jié)劑對器官的分化起重要作用外，外植體的消毒方式以及細(xì)胞分裂素和生長素配比等都是誘導(dǎo)器官發(fā)生的關(guān)鍵因素[3]。在組培過程中產(chǎn)生的污染、褐變等問題，將是今后重點研究方向。

參考文獻(xiàn)：

[1]尹偉倫. 中國楊樹栽培與利用研究[M]. 北京：中國林業(yè)出版社，2005.

[2]張小單，趙恒田，李 晶，等. 鉆天柳莖段腋芽誘導(dǎo)消毒方法與培養(yǎng)基的篩選[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，41（33）：12894-12897，12932.

[3]康 冰，王關(guān)平，張小紅，等. 歐美黑楊離體再生途徑及影響因子的研究[J]. 西北植物學(xué)報，2004，24（12）：2355-2358.周曉燕，馬彥玲，楊 涓. 蘆葦組培快繁技術(shù)的研究[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2015，43（10）：57-58，327.