汪洪濤 陳 成 余 芳 陳寶宏
(1.江蘇經貿職業技術學院食品系,江蘇 南京 211168;2.江蘇省食品安全工程技術研究開發中心,江蘇 南京 211168)
利用大豆發芽生產的豆芽是豆類食品消費的主要途徑之一[1]。豆芽口感鮮嫩,同時大豆發芽后可以使大豆中的許多不良性質得以克服和改進,如氣味、抗胰蛋白酶抑制劑等[2];同時在發芽過程中大豆發生了一系列化學和生理變化,也產生了干大豆中所缺乏的Vc,從而使發芽大豆制品在營養價值上得到進一步的提高,因而深受消費者的喜愛[3]。發芽大豆中營養成分的改變受大豆品種和溫度、濕度、光照等發芽條件的影響,目前對大豆在發芽過程中營養成分的變化研究較多,如朱新榮等[4]與于立梅等[5]對黃豆發芽中營養成分的變化規律進行了研究;王嶶等[6]對黑豆發芽中Vc變化規律進行了研究;鄭麗娜等[7]利用發芽大豆研制了復合乳制品,但目前大多研究只涉及某一種大豆以及部分營養成分,不能很好地體現不同品種大豆發芽過程中主要營養成分的變化差異。大豆的營養成分較多,主要的營養成分有蛋白質、脂肪、碳水化合物和大豆異黃酮等,且大豆主要品種有黃豆、黑豆和青豆。為了更好地了解這3種大豆在發芽過程中主要營養成分的變化規律,因此有必要通過控制一定的溫度和濕度同時對青豆、黑豆、黃豆3種大豆在發芽過程中其主要營養成分蛋白質、脂肪、還原糖、異黃酮、Vc的變化進行研究,探討其營養成分的變化規律,旨在為當前的大豆發芽食品生產和加工提供一些參考。
青豆(冀豆9號)、黑豆(丁村93-1藥黑豆)、黃豆(周豆12號):2012年10月采收于河南周口,曬干后陰涼干燥處密封保存;
試驗所用試劑:均為分析純,上海國藥集團化學試劑有限公司。
電熱鼓風干燥箱:DGF30/23-ⅢA型,南京試驗儀器廠;電熱恒溫培養箱:HG303-4型,南京實驗儀器廠;
可見分光光度計:722S型,上海菁華科技儀器有限公司;
電子天平:FA2104N型,上海菁華科技儀器有限公司;
循環水式多用真空泵:SHB-Ⅲ型,鄭州長城科工貿有限公司;
脂肪測定儀:SZF-06A型,上海洪紀儀器設備有限公司;
紫外可見分光光度計:UV-1801型,北京瑞利分析儀器有限公司。
1.3.1 發芽大豆的制備工藝
大豆→篩選→清洗→浸泡→發芽→選取→清洗→干燥→粉碎
基本步驟:用蒸餾水將無破損的黑豆、青豆、黃豆清洗干凈后,分別放入3個盆中,倒入約25℃左右的水,稍微淹沒大豆即可,置于20~30℃的恒溫箱中浸泡24h。取出溫水洗凈后,蓋上濕紗布,在28℃的恒溫恒濕發芽箱中發芽7d,然后每隔1d各自取出一部分發芽大豆,進行清洗瀝干后于50℃的真空干燥箱干燥至恒重,粉碎后于密封袋中4℃下避光冷藏。
1.3.2 發芽大豆中基本營養成分的測定
(1)粗蛋白含量:用凱氏定氮法測定[8];
(2)粗脂肪含量:用索氏提取法測定[8];
(3)還原糖含量:用3,5-二硝基水楊酸比色法測定[8];
(4)VC含量:用2,6-二氯靛酚滴定法測定[8]。
1.3.3 發芽大豆中異黃酮含量的測定
(1)異黃酮提取工藝:用石油醚對發芽大豆粉進行脫脂,然后準確稱量脫脂發芽大豆粉,按照1∶10(m∶V)的料液比加入70%的乙醇,置于50℃恒溫水浴鍋中1h,以2 000r/min離心5min后上清液即為異黃酮提取液[9]。
(2)樣品中異黃酮含量的測定:按參考文獻[10]測定提取液中總黃酮的含量,以染料木素為標準品,異黃酮的濃度(mg/mL)為橫坐標,260nm處的吸光度值為縱坐標,進行標準曲線的制作,得標準曲線的回歸方程為y=0.062 7x+0.000 3,R2=0.999 4。按式(1)計算提取液中總黃酮的提取率:

式中:
C——吸光度在標準曲線上對應的樣品中總黃酮的濃度,mg/mL;
V——提取后溶液的總體積,mL;
M——樣品的質量,mg。
按照微量凱氏定氮法和大豆中氮換算為蛋白質的系數為5.71,測出3種發芽大豆中的蛋白質含量。由圖1可知,隨著發芽時間的延長,3種大豆中蛋白質含量在第1天后都有所降低,然后都逐漸增加。這可能是由于在發芽開始需要消耗一部分蛋白質,同時浸泡后部分可溶性氮丟失導致總蛋白含量的降低;隨后隨著發芽時間的延長,豆中總糖、脂肪等成分在發芽過程中不斷消耗最終使大豆中蛋白質的含量增加[5]。青豆、黃豆、黑豆在發芽1d后蛋白質的含量分別為30.8%,31.3%,31.9%,第1~2天的過程中增加較顯著,隨后逐步增加,到第7天后蛋白質的含量分別為38.2%,38.9%,39.2%。和發芽1d后相比,青豆、黃豆、黑豆蛋白質含量分別增加了24.03%,24.28%,22.88%。

圖1 發芽時間對3種大豆蛋白質含量的影響Figure 1 The effect of different sprouting time on crude protein content of three kinds of soybean

圖2 發芽時間對3種大豆粗脂肪含量的影響Figure 2 The effect of different sprouting time on crude fat content of three kinds of soybean
由圖2可知,隨著發芽天數的增加,3種大豆中粗脂肪的含量都是平穩、逐步減少的。這說明大豆在發芽期間是要消耗脂肪的,可能是因為作為能源或者分解成小分子作為其新芽的成分。青豆、黃豆、黑豆在發芽1d后粗脂肪的含量分別為17.7%,18.5%,16.9%,隨后逐步減少,到第7天后粗脂肪的含量分別為11.1%,11.9%,10.7%。和發芽1d后相比,青豆、黃豆、黑豆粗脂肪的含量分別減少了37.28%,35.68.28% ,36.69%。
由圖3可知,3種大豆中還原糖的含量隨著發芽時間的增加而平穩增加。這可能是由于發芽時,大豆中內源淀粉酶被激活,而導致豆類淀粉發生降解。在淀粉酶的作用下,淀粉分解為葡萄糖等小分子糖類,為發芽提供能量[5]。在7d的發芽過程中,青豆中還原糖的含量由發芽第1天后的4.37%增加到10.01%,黑豆中還原糖的含量由發芽1d后的4.12%增加到9.30%,黃豆中還原糖的含量由第1天后的4.27%增加到9.7%。發芽7d后青豆、黃豆和黑豆中的還原糖含量分別比發芽1d后增加了129.06%,127.17%,125.73%。

圖3 發芽時間對3種大豆中還原糖含量的影響Figure 3 The effect of different sprouting time on reducing sugar content of three kinds of soybean
由圖4可知,3種大豆發芽過程中,VC的含量是逐步遞增的,在第1天到第4天每天增加較小,而第4天到第5天增加較顯著。這是由于發芽期間大豆內部參與物質代謝的酶類隨之活化或產生,而使機體內物質代謝不斷增強,參與VC合成代謝的酶類也隨之增強,使其豆芽組織中VC含量不斷增加[11]。從發芽第1天后到第7天后,青豆VC的含量由1.02mg/100g增加到9.5mg/100g,黑豆 VC的含量由0.99mg/100g增加到8.98mg/100g,黃豆 VC的含量由1.36mg/100g增加到10.39mg/100g。和發芽1d后的 VC含量相比,發芽7d后青豆、黃豆和黑豆中VC的含量分別增加了831.37%,663.97%,807.07%。
由圖5可知,3種大豆發芽過程中大豆異黃酮的含量在前4d內都是逐漸增加的,而且增加較顯著,第5天到第7天逐漸下降但降幅不大。這是因為大豆在發芽過程中呼吸作用增強,酶的種類和數量顯著增加,苯丙氨酸氨基裂解酶就是其中之一,而它又是異黃酮生物合成代謝的關鍵酶[11]。青豆中大豆異黃酮的含量由第1天后的0.266%到第4天后的0.505%再到第7天后的0.494%,黑豆中大豆異黃酮的含量由第1天后的0.310%到第4天后的0.531%再到第7天的0.513%,黃豆中大豆異黃酮的含量由第1天后的0.284%到第4天后的0.516%再到第7天后的0.509%。

圖4 發芽時間對3種大豆中Vc含量的影響Figure 4 The effect of different sprouting time on Vc content of three kinds of soybean

圖5 發芽時間對3種大豆中異黃酮含量的影響Figure 5 The effect of different sprouting time on isoflavone content of three kinds of soybean
通過控制一定的溫度和濕度同時對黃豆、黑豆和青豆發芽7d,每天抽樣測定豆芽的主要營養成分——蛋白質、粗脂肪、還原糖、異黃酮和Vc的含量水平。結果表明3種大豆隨著發芽過程中發生的一系列的生理和化學變化,其營養成分的變化規律相似:隨著發芽時間的延長,3種大豆中蛋白質的含量先減少后增加;還原糖、Vc含量都是逐漸增加的,其中Vc的含量從第4天后增加較顯著,這與朱新榮等[4]的研究結果一致;脂肪的含量都是逐漸減少,異黃酮的含量先增加后減少,到第4天后達到最大值,這與于立梅等[5]的研究結果相一致;3種大豆在不同的發芽時間段內其每種營養成分之間的差異不大,故在實際生產時可根據需要選擇價格相對便宜的大豆品種進行生產。本試驗未研究發芽溫度、濕度和氣體組分對3種大豆發芽后營養成分的影響,將在后續加以完善。
1 張繼浪,駱承庫.大豆在發芽過程中的化學成分和營養價值變化[J].中國乳品工業,1994,22(2):69~74.
2 范鎮基.芽類食品的開發前景[J].廣州食品工業科技,1995,11(4):18~20.
3 Sathe S K,Anine B C.Chemical form of selenium in soybean lection[J].Agriculture and Food Chemistry,1992,40(11):2 084~2 091.
4 朱新榮,胡筱波,潘思軼,等.大豆發芽期間多種營養成分變化的比較[J].中國釀造,2008(12):64~66.
5 于立梅,鐘惠曾,于新,等.大豆發芽過程中營養成分變化規律的研究[J].中國糧油學報,2010,25(8):20~22.
6 王薇,朱慶珍.黑豆不同發芽期VC變化規律研究[J].農產品加工(學刊),2011(10):49~51.
7 鄭麗娜,王麗娟,劉曉紅.發芽大豆復合乳制品的研制[J].食品與機械,2006,22(1):80~82
8 王燕,吳云輝.食品檢驗技術[M].北京:中國輕工業出版社,2011:70~132.
9 錢麗麗,左鋒,劉志明.微波預處理提取大豆異黃酮的研究[J].現代食品科技,2007,23(1):38~39.
10 顧建明,潘春云.大豆異黃酮的測定方法及其評價[J].上海大學學報:自然科學版,2007,13(6):742~745.
11 徐茂軍.不同品種大豆發芽過程中抗壞血酸合成累積的比較研究[J].中國糧油學報,2003,18(3):51~53.