血漿網膜素-1水平與結直腸癌的相關性研究

陳 燕，趙曉彤，陳明衛，2，李永翔，王圣毅，王佑民，2

血漿網膜素-1水平與結直腸癌的相關性研究

陳 燕1，趙曉彤1，陳明衛1，2，李永翔3，王圣毅3，王佑民1，2

目的探討血漿脂肪因子網膜素-1（omentin-1）水平和結直腸癌（CRC）的相關關系。方法 選取經術后病理檢查明確診斷為CRC的患者42例（腫瘤組）和接受纖維結腸鏡檢查為正常的健康志愿者42例（對照組），兩組間年齡、性別均匹配。采用ELISA法測定腫瘤組以及對照組空腹血漿omentin-1水平。結果與對照組相比，腫瘤組患者血漿omentin-1水平明顯升高（P＜0.05）。Pearson相關分析顯示，血漿omentin-1與高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）呈正相關（r＝0.57，P＜0.01），與血清三酰甘油（TG）、空腹胰島素（FINS）、腰臀比（WHR）、穩態模型胰島素抵抗指數（HOMAIR）均呈負相關（r＝－0.668、－0.493、－0.395、－0.371，P＜0.05）。多元逐步線性回歸分析顯示，TG、HDL-C、WHR為CRC患者血漿omentin-1的影響因素。結論血漿omentin-1水平可能與CRC發生有關。

脂肪因子；網膜素-1；結直腸癌

結直腸癌（colorectal cancer，CRC）是結腸癌和直腸癌的統稱，為常見的消化系統惡性腫瘤之一。研究［1－2］表明CRC與肥胖、胰島素抵抗以及代謝異常有關。脂肪組織作為一個代謝活躍的內分泌器官，可產生脂聯素、瘦素、抵抗素、內脂素、網膜素-1（omentin-1）等脂肪因子，這些因子在胰島素抵抗的發生或進展中發揮病因學作用，但在腫瘤發病中的作用，目前尚不完全清楚。研究［3－5］顯示部分脂肪因子如瘦素、內脂素和脂聯素等可能與CRC的發生發展密切相關。然而目前有關omentin-1在CRC發病中的作用卻知之甚少［6］。該研究旨在檢測CRC患者中血漿omentin-1水平變化，探討omentin-1與CRC發病的相關關系及其影響因素，為CRC的臨床防治提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 病例資料選擇2012年7月～2014年2月在安徽醫科大學第一附屬醫院普通外科新診斷的CRC患者42例（腫瘤組），年齡44～74（59.78± 14.57）歲，男20例，女22例。CRC均經術后病理檢查明確診斷。排除標準：①既往有惡性腫瘤史或CRC病史；②患炎癥性腸病包括潰瘍性結腸炎及克羅恩病；③家族性腺瘤性息肉病；④遺傳性非息肉性CRC及肛管癌；⑤糖尿病；⑥各種急性感染性疾病；⑦嚴重心、肝、腎功能損害。同時按照年齡、性別匹配要求，選取來我院進行纖維結腸鏡檢查的健康體檢人群42例（對照組），年齡45～75（60.38± 13.46）歲，男20例，女22例，體檢證實身體健康，結腸鏡發現為正常結腸黏膜像。該項研究得到安徽醫科大學第一附屬醫院醫學倫理委員會的批準。

1.2 指標檢測方法

1.2.1 一般指標 身高、體重、收縮壓（systolic blood pressure，SBP）、舒張壓（diastolic blood pressure，DBP）、腰圍、臀圍等由專門人員測量，體重指數（body mass index，BMI）＝體重／身高2（kg／m2），腰臀比（waist-hip ratio，WHR）＝腰圍／臀圍。

1.2.2 生化指標的測定 所有研究對象禁食12 h后于清晨抽取靜脈血（腫瘤組患者于入院后次日采血），采用酶化學法（日本島津公司生產的CL-7300全自動生化分析儀）測定空腹血糖（fasting bloodglucose，FPG）、總膽固醇（total cholesterols，TCH）、三酰甘油（triglycerides，TG）、高密度脂蛋白膽固醇（high-density lipoprotein-c，HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（low-density lipoprotein-c，LDL-C）。空腹胰島素（fasting insulin，FINS）采用放射免疫檢測法檢測，試劑盒由北京原子能研究所提供。用HOMA-IR公式評價胰島素抵抗（homeostatic model assessment of insulin resistance，HOMA-IR），HOMA-IR＝FPG（mmol／L）×FINS（mU／L）／22.5。

1.2.3 omentin-1檢測 采血時間與生化指標同時。抽取靜脈血2 ml，置于EDTA抗凝管中，每1 ml血液樣品中加入60 μl抑肽酶，以3 000 r／min離心15 min分離血漿，置于－80℃冰箱中備用，使用ELISA法測定血漿omentin-1水平。試劑盒由上海科敏生物科技有限公司提供。

1.3 統計學處理應用SPSS 20.0統計軟件進行分析，計量資料以±s表示，非正態分布變量經對數轉換正態化后分析。組間比較采用t檢驗。應用Pearson相關分析和多元線性回歸分析方法分析血漿omentin-1與其他變量間的相關關系。檢驗水準P＝0.05。

2 結果

2.1 腫瘤組與對照組間臨床參數、生化指標的比較與對照組相比，腫瘤組LDL-C、FINS、HOMA-IR、omentin-1明顯增高（P＜0.05），TC則明顯降低（P＜0.05）。兩組間年齡、性別構成、WHR、BMI、SBP、DBP、TG、HDL-C差異均無統計學意義，見表1。

表1 腫瘤組與對照組間臨床參數、生化指標的比較（n＝42，±s）

與對照組比較：*P＜0.05

項目腫瘤組對照組t值P值女／男22／2022／200.0001.000年齡（歲）59.78±14.5760.38±13.46－0.1730.863 WHR0.88±0.060.87±0.051.0710.287 BMI（kg／m2）23.66±2.8123.21±2.740.8400.287收縮壓（kPa）16.68±2.2717.55±3.29－1.4030.165舒張壓（kPa）9.93±1.4410.38±1.53－1.3870.169 TG（mmol／L）2.19±0.242.17±0.250.1910.789 TC（mmol／L）3.27±1.14*4.83±1.08－3.1280.032 HDL-C（mmol／L）1.39±0.821.71±0.63－0.2230.789 LDL-C（mmol／L）2.64±0.63*1.59±0.823.9060.027 FBG（mmol／L）5.18±0.714.93±0.610.1300.898 FINS（mU／L）9.44±6.11*7.03±3.493.0520.043 Ln（HOMA-IR）0.94±0.43*0.61±0.334.4850.012 omentin-1（ng／ml）71.54±31.80*31.22±19.876.9310.001

2.2 血漿omentin-1與不同臨床參數、生化指標間的Pearson相關分析Pearson相關分析顯示，在全組中omentin-1與HDL-C呈正相關（r＝0.57，P＜0.01），與TG、FINS、WHR、HOMA-IR均呈負相關（r＝－0.668、－0.493、－0.395、－0.371，P＜0.05）；在腫瘤組中omentin-1與HDL-C呈正相關（r＝0.528，P＜0.01），與TG、WHR、HOMA-IR均呈負相關（r＝－0.804、0.449、－0.353，P＜0.05）；在對照組中omentin-1與HDL-C呈正相關（r＝0.74，P＜0.01），與TG、FINS、WHR、HOMA-IR均呈負相關（r＝－0.884、－0.687、0.368、－0.385，P＜0.05）。見表2。

2.3 腫瘤組患者血漿omentin-1與不同臨床參數、生化指標間的多元線性回歸分析以omentin-1為應變量，以TG、TC、HDL-C、LDL-C、HOMA-IR、BMI、WHR、SBP、DBP為自變量對CRC組進行多元線性回歸分析，結果顯示，TG、HDL-C、WHR為其影響因素，回歸方程為omentin-1＝112.773－16.189×TG－28.508×WHR＋60.424×HDL-C，見表3。

3 討論

目前多數研究［7］認為脂肪因子可能是聯系肥胖與CRC發生發展的關鍵因素。作為脂肪因子之一的網膜素有兩個結構基因，即omentin-1和omentin-2。研究［8］證實，omentin-2在內臟脂肪低表達，在小腸潘氏細胞高表達，血中幾乎檢測不到omentin-2，而內臟脂肪優先表達omentin-1，在血循環中omentin-1是網膜素的主要形式。在已知的4個可增加胰島素敏感性的脂肪因子（脂聯素、內脂素、源于內臟脂肪組織的絲氨酸蛋白酶抑制劑和網膜素）中，已證實脂聯素、內脂素與中國漢族人群CRC發病密切相關［3－4］。本研究顯示，腫瘤組血漿omentin-1水平顯著增高，為對照組的2.29倍。兩組間反映肥胖狀態的指標如BMI、WHR差異無統計學意義，提示omentin-1與本組人群CRC發病可能存在密切聯系，且這種相關關系獨立于肥胖影響之外，但有待擴大樣本量來進一步證實。這與Fazeli et al［6］最近報道相似。此外，本組資料還顯示，與對照組相比，腫瘤組中反映胰島素抵抗狀態的指標（FINS、HOMA-IR）以及LDL-C顯著增高，TCH顯著降低，表明高胰島素血癥、胰島素抵抗以及脂代謝紊亂與CRC發病也存在相關關系。這與相關研究［9-11］結果一致。

一些臨床研究［12］表明2型糖尿病、肥胖、多囊卵巢綜合征患者體內血清omentin-1水平降低，血清網膜水平與BMI、腰圍、WHR、血清瘦素水平、空腹胰島素水平、HOMA-IR呈負相關，與血清脂聯素和HDL-C水平呈正相關。本組資料中Pearson相關分析顯示，無論是腫瘤組還是對照組，血漿omentin-1水平均與TG、FINS、WHR、HOMA-IR呈負相關，與HDL-C水平呈正相關，與文獻［12］報道一致。應用多元線性回歸分析顯示，在腫瘤組，TG、HDL-C、WHR為血漿omentin-1水平的影響因素。提示腹型肥胖、脂代謝紊亂通過影響CRC患者中omentin-1的表達與分泌參與CRC的發生發展。

目前有關omentin-1與CRC發病之間的分子機制尚不明確。研究顯示omentin-1可在有無胰島素情況下，影響細胞內絲／蘇氨酸蛋白激酶（the serine／threonine protein kinase，Akt）磷酸化活性。已知Akt信號通路除了在調節包括增殖、凋亡、代謝在內的細胞基本功能上必不可少，而且還涉及血管通透性、血管再生以及成熟過程，因此普遍認為Akt信號通路在腫瘤的發生發展上起著關鍵作用［13］。研究［13］顯示Akt信號通路的激活可提高CRC細胞增殖活性，抑制凋亡效應，上調血管內皮生長因子（VEGF）表達，誘導腫瘤血管形成，從而促進CRC的進展。此外，內皮型一氧化氮合成酶（eNOS）為已知的Akt下游作用靶點，而研究［14］已表明eNOS在CRC發病中發揮重要作用，其基因多態性與結腸癌的發病風險密切相關。由此推測omentin-1可能通過影響細胞Akt活性從而參與CRC的發病。此觀點有待體外實驗以及動物實驗來證實。最近發表的一些研究表明omentin-1可能參與不同部位腫瘤的發病，如前列腺癌［15］、肝癌［16］。

綜上所述，本研究表明腫瘤組血漿omentin-1水平明顯增高，omentin-1與CRC發病存在相關關系，并獨立于肥胖影響之外。TG、HDL-C、WHR為影響CRC患者血漿omentin-1水平的獨立影響因素。然而，本研究無法明確omentin-1與CRC發病之間的因果關系，有待體外細胞研究以及動物實驗來證實。

［1］ Kant P，Hull M A.Excess body weight and obesity-the link with gastrointestinal and hepatobiliary cancer［J］.Nat Rev Gastroebterol Hepatol，2011，8（4）：224－38.

［2］ Kang H W，Kim D，Kim H J，et al.Visceral obesity and insulin resistance as risk factors for colorectal adenoma：across-sectional，case-control study［J］.Am J Gastroenterol，2010，105（1）：178－87.

［3］ Chen M W，Ye S，Zhao L L，et al.Association of palma total and high-molecular-weight adiponectin with risk of colorectal cancer：an observational study in Chinese male［J］.Med Oncol，2012，29（5）：3129－35.

［4］ Chen M，Wang Y，Li Y，et al.Association of plasma visfatin with risk of colorectal cancer：An observational study of Chinese patients［J］.Asia Pac J Clin Oncol，2013：［Epub ahead of print］.

［5］ Kumor A，Daniel P，Pietruczuk M，et al.Serum leptin，adiponectin，and resistin concentration in colorectal adenoma and carcinoma（CC）patients［J］.Int J Colorectal Dis，2009，24（3）：275－81.

［6］ Fazeli M S，Dashti H，Akbarzadeh S，et al.Circulating levels of novel adipocytokines in patients with colorectal cancer［J］.Cytokine，2013，62（1）：81－5.

［7］ Joshi R K，Lee S A.Obesity related adipokines and colorectal cancer：a review and meta-analysis［J］.Asian Pac J Cancer Prev，2014，15（1）：397－405.

［8］ Yang R Z，Lee M J，Hu H，et al.Identification of omentin as a novel depot-specific adipokine in human adipose tissue：possible role in modulating insulin action［J］.Am J Physiol Endocrinol Metab，2006，290（6）：E1253－61.

［9］ Yang M H，Rampal S，Sung J，et al.The association of serum lipids with colorectal adenomas［J］.Am J Gastroenterol，2013，108（5）：833－41.

［10］葉 帥，陳明衛，李永翔，等.胰島素抵抗與結直腸癌關系的臨床研究［J］.中國慢性病預防與控制，2012，20（4）：378－81.

［11］趙麗麗，趙曉彤，毋飛飛，等.新診斷2型糖尿病合并惡性腫瘤的危險因素分析［J］.安徽醫藥，2014，18（6）：1058－62.

［12］de Souza Batista C M，Yang R Z，Lee M J，et al.Omentin plasma levels and gene expression are decreased in obesity［J］.Diabetes，2007，56（6）：1655－61.

［13］Chen J，Somanath P R，Razorenova O，et al.Akt1 regulates pathological angiogenesis，vascular maturation and permeability in vivo［J］.Nat Med，2005，11（11）：1188－96.

［14］Lim K H，Ancrile B B，Kashatus D F，et al.Tumour maintenance is mediated by eNOS［J］.Nature，2008，452（7187）：646－9.

［15］Mogal A P，van der Meer R，Crooke P S，et al.Haploinsufficient prostate tumor suppression by Nkx3.1：a role for chromatin accessibility in dosage-sensitive gene regulation［J］.J Biol Chem，2007，282（35）：25790－800.

［16］Zhang Y Y，Zhou L M.Omentin-1，a new adipokine，promotes apoptosis through regulating Sirt1-dependent p53 deacetylation in hepatocellular carcinoma cells［J］.Eur J Pharmacol，2013，698（1－3）：137－44.

Correlation between plasma omentin-1 levels and colorectal cancer

Chen Yan1，Zhao Xiaotong1，Chen Mingwei1，2，et al
（1Dept of Endocrinology，The First Affiliated Hospital of Anhui Medical University，Hefei 230022；2Anhui Provincial Laboratory of Endocrinology＆Metabolism，Hefei 230022）

ObjectiveTo investigate the relationship between plasma adipocytokine omentin-1 levels and colorectal cancer（CRC）.MethodsThis study was conducted among 42 patients with pathologically diagnosed CRC after operation as the case group，and 42 healthy subjects who underwent total colonoscopy because of a voluntary health check-up as the control group.The above two groups were matched between age and sex.After participants had fasted overnight，their blood samples were collected.Fasting plasma omentin-1 was measured using ELISA methods.ResultsThe omentin-1 levels in patients with CRC were significantly higher than in controls（P＜0.05）. Spearman correlation analysis showed that plasma omentin-1 was positively correlated with high density lipoprotein cholosterol（HDL-C）（r＝0.57，P＜0.01），and negatively correlated with serum triglyceride（TG），fsating insulin（FINS），waist hip ratio（WHR），HOMA model insulin resistance index（HOMA-IR）（r＝－0.668，－0.493，－0.395，－0.371，respectively，P＜0.05）.Multiple stepwise regression analysis showed that TG，HDL-C，WHR were the influencing factors of plasma omentin-1 in CRC patients.ConclusionThe plasma omentin-1 level may correlate with the development of CRC.

adipocytokine；omentin-1；colorectal cancer

R 574.62

1000－1492（2015）01－0075－04

2014－09－25接收

中華醫學會臨床科研專項基金（編號：12020320322）；安徽省科技廳科技攻關項目（編號：1206C0805034）

安徽醫科大學第一附屬醫院1內分泌科、3普通外科，合肥2300222安徽省內分泌代謝病省級實驗室，合肥 230022

陳 燕，女，碩士研究生；陳明衛，男，副教授，碩士生導師，責任作者，E-mail：chmw1＠163.com