NKA-Ⅱ樹(shù)脂富集純化銀杏葉聚戊烯醇

劉玉桃，楊小明*

（江蘇大學(xué)食品與生物工程學(xué)院，江蘇 鎮(zhèn)江 212013）

NKA-Ⅱ樹(shù)脂富集純化銀杏葉聚戊烯醇

劉玉桃，楊小明*

（江蘇大學(xué)食品與生物工程學(xué)院，江蘇 鎮(zhèn)江 212013）

從8種樹(shù)脂中篩選出對(duì)銀杏葉聚戊烯醇（polyprenols，PPs）有較大吸附率的NKA-Ⅱ樹(shù)脂。研究PPs在NKA-Ⅱ樹(shù)脂上的吸附特性，確定分離PPs適宜工藝參數(shù)。動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)研究表明，PPs在NKA-Ⅱ樹(shù)脂上的吸附過(guò)程符合一級(jí)吸附動(dòng)力學(xué)方程，控速步驟以液膜擴(kuò)散為主；吸附等溫曲線服從Langmuir和Freundlich等溫吸附方程。NKA-Ⅱ樹(shù)脂固定床純化PPs的操作條件：上樣質(zhì)量濃度0.73 mg/mL、流速2 mL/min；以流速1 mL/min的正己烷-丙酮（80∶20，V/V）洗脫，用量5 BV。經(jīng)NKA-Ⅱ樹(shù)脂固定床純化后，PPs含量從33.85%提高到71.54%，回收率為88.76%。樹(shù)脂柱再生第6次時(shí)，對(duì)PPs的分離純化能力才明顯降低，表現(xiàn)出良好的再生使用性。

大孔樹(shù)脂；吸附；聚戊烯醇

銀杏葉聚戊烯醇（polyprenols，PPs）是含有2 個(gè)反式和12～20 個(gè)順式異戊烯基、兩端分別為ω端基和不飽和α端基[1-4]的化合物，具有促進(jìn)機(jī)體造血機(jī)能、改善再生障礙性貧血的功效[5-7]，對(duì)高血壓、高血脂、糖尿病等都具有明顯的治療作用[8-10]。

近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外關(guān)于銀杏葉PPs的純化有許多報(bào)道，孫磊等[11]采用硅膠柱層析多次反復(fù)分離銀杏葉石油醚提取物后，得到含量為90%的PPs，但該方法耗時(shí)，有機(jī)溶劑消耗量大，效率低下。王成章[12]采用有機(jī)溶劑粗提-堿水解-冷凍除蠟，最后通過(guò)分子短程蒸餾得到純度為70%的PPs產(chǎn)品。此方法克服了反復(fù)過(guò)硅膠柱的缺陷，但生產(chǎn)條件要求高，耗能大，餾出溫度最高達(dá)300 ℃，可能會(huì)對(duì)PPs的結(jié)構(gòu) 有影響。楊克迪等[13]建立了甲醇溶液-銀離子配位體系，通過(guò)銀離子與PPs的不飽和鍵形成π絡(luò)合，有選擇性地分離PPs類化合物，使得產(chǎn)品純度有明顯提高。該方法在較溫和的條件下進(jìn)行，操作簡(jiǎn)單，但是PPs在有機(jī)相中與甲醇-水萃取相中銀離子接觸困難、操作時(shí)間長(zhǎng)，且甲醇飽和蒸汽壓較高，揮發(fā)嚴(yán)重，導(dǎo) 致銀離子濃度難以控制。因此需要一種穩(wěn)定、可重復(fù)使用、生產(chǎn)周期短的材料來(lái)分離純化PPs。

大孔吸附樹(shù)脂是一類有機(jī)高聚物吸附劑，它具有理化性質(zhì)穩(wěn)定、選擇性較好、生產(chǎn)周期短、樹(shù)脂再生方便、可重復(fù)使用等優(yōu)點(diǎn)，因而天然產(chǎn)物的分離純化中被廣泛應(yīng)用[14-16]。本實(shí)驗(yàn)以PPs吸附率為指標(biāo)，從8種大孔樹(shù)脂中篩選出具有良好吸附和解吸性能的樹(shù)脂，并對(duì)該樹(shù)脂吸附PPs的熱力學(xué)和動(dòng)力學(xué)過(guò)程進(jìn)行探討。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

銀杏葉采自江蘇大學(xué)校園，60 ℃烘干，粉碎備用；銀杏葉PPs標(biāo)準(zhǔn)品由本試驗(yàn)室自制，色譜純度大于95%；各種型號(hào)的大孔樹(shù)脂均購(gòu)自鄭州勤實(shí)科技有限公司。

異丙醇、正己烷、甲醇（均為色譜純） 國(guó)藥化學(xué)試劑有限公司；液相色譜分析用水為娃哈哈純凈水；其他試劑均為分析純 上?；瘜W(xué)試劑有限公司；其他用水為雙蒸水。

1.2 儀器與設(shè)備

1260高效液相色譜儀（包括G1322A在線脫氣、G1312C二元泵、G1329B自動(dòng)進(jìn)樣器、G1314B紫外檢測(cè)器、Chemstation工作站） 安捷倫科技有限公司；Shim-pack VP-ODS色譜柱（250 mm×4.6 mm） 日本島津公司；SHA-B水浴恒溫振蕩器 江蘇金壇市中大儀器廠。

1.3 方法

1.3.1 PPs含量的測(cè)定

PPs含量的測(cè)定采用高效液相色譜（high performance liquid chromatogrophy，HPLC）外標(biāo)法[17]，色譜條件：柱溫30 ℃，檢測(cè)波長(zhǎng)215 nm，流動(dòng)相為異丙醇-正己烷-甲醇-水（體積比54∶16∶27∶3），流速1 mL/min，進(jìn)樣量10 μL。分別準(zhǔn)確稱取PPs標(biāo)準(zhǔn)品配成不同質(zhì)量濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液進(jìn)行HPLC分析，以PPs標(biāo)準(zhǔn)品的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)（x），以有效組分的峰面積之和為縱坐標(biāo)（y），得PPs標(biāo)準(zhǔn)曲線為y=22 131x－54.49，線性范圍：0.023～0.74 mg/mL，相關(guān)系數(shù)R2=0.999。

1.3.2 PPs原料的制備

稱取100 g干燥的銀杏葉粉，按1∶6（g/mL）的料液比加入石油醚（沸程60～90 ℃），在70 ℃條件下熱回流提取4 h，重復(fù)3 次，抽濾，合并濾液，減壓濃縮后得到石油醚浸膏。稱取上述石油醚浸膏2.0 g，用50 mL石油醚溶解，加入等體積5% NaOH的甲醇溶液，于50 ℃條件下攪拌3 h。反應(yīng)完成后靜置分層，取出上層石油醚相減壓濃縮后得到銀杏葉PPs浸膏。稱取上述浸膏1.5 g用硅膠柱（400 mm×20 mm，裝100～200 目硅膠50 g）純化，以石油醚-乙酸乙酯（90∶10，V/V）洗脫液洗脫400 mL，減壓濃縮后用正己烷定容至100 mL，密封冷凍保存?zhèn)溆肹18]。

1.3.3 樹(shù)脂預(yù)處理

將樹(shù)脂用去離子水浸泡5 min，除去上漂的樹(shù)脂后無(wú)水乙醇浸泡24 h，充分溶脹后于50 ℃條件下烘干，存于干燥器內(nèi)備用。

1.3.4 樹(shù)脂對(duì)PPs平衡吸附量測(cè)定

準(zhǔn)確稱取處理好的樹(shù)脂各0.20 g，置于100 mL具塞三角瓶?jī)?nèi)，加入一定質(zhì)量濃度的PPs正己烷溶液20 mL，于25 ℃恒溫水浴中振蕩，充分吸附后，分離樹(shù)脂和溶液，采用1.3.1節(jié)方法測(cè)定平衡吸附后溶液中PPs的含量，根據(jù)公式（1）、（2）計(jì)算平衡吸附量和吸附率；樹(shù)脂則用正己烷快速洗滌3 次，加入正己烷-丙酮（8∶2，V/V）[19]，于25 ℃條件下恒溫振蕩，充分解吸后，按1.3.1節(jié)方法測(cè)定液相中PPs的含量，根據(jù)公式（3）計(jì)算解吸率。

式（1）～（3）中：qe為平衡吸附量/（mg/g）；E和D分別為平衡吸附率和解吸率/%；ρ0、ρe和ρd分別為PPs起始質(zhì)量濃度、平衡質(zhì)量濃度、在解吸液中的質(zhì)量濃度/（mg/mL）；Vi和Vd分別為起始溶液的體積和解吸液的體積/mL；M為樹(shù)脂干質(zhì)量/g。

1.3.5 靜態(tài)吸附動(dòng)力學(xué)

準(zhǔn)確稱取NKA-Ⅱ樹(shù)脂0.20 g，置于100 mL具塞三角瓶?jī)?nèi)，加入質(zhì)量濃度為0.446 0 mg/mL的PPs正己烷溶液，于25 ℃條件下恒溫振蕩，每隔0.5 h測(cè)定液相中PPs質(zhì)量濃度，按式（4）計(jì)算吸附量。

式中：qt和ρt分別為對(duì)應(yīng)吸附時(shí)間t時(shí)的吸附量/（mg/g）和PPs在溶液中的質(zhì)量濃度/（mg/mL）；Vi為起始溶液的體積/mL；M為樹(shù)脂干質(zhì)量/g。

1.3.6 靜態(tài)吸附等溫線

準(zhǔn)確稱取8 份NKA-Ⅱ樹(shù)脂，每份0.20 g，置于1 0 0 m L具塞三角瓶?jī)?nèi)，分別加入質(zhì)量濃度為0.45 mg/mL的PPs正己烷溶液10、13、16、19、22、25、28、31 mL，于15、25、35 ℃恒溫水浴中充分振蕩，計(jì)算樹(shù)脂的平衡吸附量。每個(gè)溫度重復(fù)做3 次。

1.3.7 固定床吸附分離

NKA-Ⅱ樹(shù)脂濕法裝柱，柱床體積22 mL，柱高28 cm。將一定質(zhì)量濃度的PPs正己烷溶液在恒溫條件下以一定流速連續(xù)流過(guò)樹(shù)脂柱，測(cè)定流出液中PPs的質(zhì)量濃度，分析料液質(zhì)量濃度、流速對(duì)穿透曲線的影響。

固定床吸附結(jié)束后，以3 BV的丙酮沖洗柱子，去除殘留的脂溶性雜質(zhì)后，依次以正己烷-丙酮（60∶40、80∶20、100∶0，V/V）溶液梯度洗脫，每個(gè)梯度3 BV。測(cè)定洗脫液中PPs質(zhì)量濃度，考察洗脫劑組成及流速對(duì)洗脫曲線的影響。

2 結(jié)果與分析

2.1 樹(shù)脂的篩選

8 種不同類型樹(shù)脂對(duì)PPs的平衡吸附量、平衡吸附率見(jiàn)表1。

表1 不同類型樹(shù)脂對(duì)PPs的平衡吸附量和吸附率（25 ℃）Table1 Equilibrium adsorption amounts and adsorption ratios for

由表1可見(jiàn)，樹(shù)脂NKA-Ⅱ?qū)Ps的平衡吸附量為38.12 mg/g，平衡吸附率達(dá)86.64%，而所選的其他樹(shù)脂的吸附率均低于30%。用正己烷-丙酮（8∶2，V/V）對(duì)NKA-Ⅱ樹(shù)脂解吸，解吸率97.87%。因此，選擇樹(shù)脂NKA-Ⅱ進(jìn)行靜態(tài)、動(dòng)態(tài)吸附研究。

2.2 NKA-Ⅱ樹(shù)脂吸附動(dòng)力學(xué)

25 ℃條件下，分別測(cè)定了不同吸附時(shí)間NKA-Ⅱ樹(shù)脂對(duì)PPs的吸附量，作出PPs在NKA-Ⅱ上的靜態(tài)吸附動(dòng)力學(xué)曲線和一級(jí)速率方程擬合 曲線見(jiàn)圖1。

圖1 PPs在NKA-Ⅱ上的吸附動(dòng)力學(xué)曲線 （A）及一級(jí)速率方程擬合曲線 （B） BFig.1 Adsorption kinetic curve of PPs on NKA-Ⅱ (A) and fitting curve of first-order rate equation (B)

圖1A顯 示，PPs在樹(shù)脂NKA-Ⅱ上的吸附量隨吸附時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸增加，大約4 h后達(dá)到吸附平衡。在吸附3 h時(shí)，吸附量已經(jīng)達(dá)到了平衡吸附量的 96%。分別利用一級(jí)、二級(jí)和準(zhǔn)二級(jí)動(dòng)力學(xué)模型對(duì)吸附速率進(jìn)行擬合[20]，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，采用二級(jí)和準(zhǔn)二級(jí)動(dòng)力學(xué)方程擬合的相關(guān)系數(shù)均小于一級(jí)動(dòng)力學(xué)方程，故PPs在NKA-Ⅱ上的靜態(tài)動(dòng)力學(xué)吸附特性最符合一級(jí)吸附動(dòng)力學(xué)特征（圖1B）。由圖1B可知，前3 h內(nèi)－ln（1－F）與時(shí)間t呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系（R2=0.996 0），表明PPs在大孔樹(shù)脂NKA-Ⅱ上的動(dòng)力學(xué)吸附符合一級(jí)速率方程。這說(shuō)明在所研究的條件下PPs在大孔樹(shù)脂上的吸附過(guò)程主要受液膜擴(kuò)散控制[21]。

在吸附過(guò)程中，吸附劑顆粒內(nèi)部的內(nèi)擴(kuò)散亦為速率控制步驟[22]。采用基于單分子層吸附的Bangham速率方程 lnqt= lnkB+m?1lnt對(duì)吸附動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)進(jìn)行擬合分析，從R2=0.992 5看，吸附前期（前3 h），PPs在NKA-Ⅱ樹(shù)脂上的吸附動(dòng)力學(xué)行為基本遵循Bangham速率方程的規(guī)律。

由以上分析可知，一級(jí)動(dòng)力學(xué)的擬合結(jié)果優(yōu)于Bangham速率方程，表明PPs在NKA-Ⅱ樹(shù)脂上的吸附主要受液膜擴(kuò)散控制，但顆粒內(nèi)擴(kuò)散對(duì)吸附過(guò)程也有一定的影響。

2.3 NKA-Ⅱ?qū)Ps的靜態(tài)吸附等溫曲線

圖2 PPs在樹(shù)脂NKA-Ⅱ上的吸附等溫線Fig.2 Adsorption isotherms of PPs on resin NKA-Ⅱ

為考察NKA-Ⅱ樹(shù)脂對(duì)PPs的吸附行為，測(cè)定了不同溫度條件下NKA-Ⅱ樹(shù)脂對(duì)PPs的吸附。由圖2可知，隨著吸附溫度升高，NKA-Ⅱ樹(shù)脂對(duì)PPs的吸附量逐漸降低，說(shuō)明PPs在NKA-Ⅱ樹(shù)脂上吸附屬于放熱過(guò)程，升高溫度不利于吸附過(guò)程進(jìn)行[23]。

在吸附平衡模型中， Langmuir等溫吸附方程和Freundlich等溫吸附方程是應(yīng)用最為廣泛的等溫吸附方程，方程分別如下：

式（5）、（6）中：qm為最大飽和吸附量/（mg/g），KL為結(jié)合常數(shù)/（mL/mg）；n、KF為等溫吸附特征常數(shù)。

分別用Langmuir和Freundlich等溫吸附方程對(duì)以上3 個(gè)溫度條件下的等溫吸附數(shù)據(jù)進(jìn)行擬合，擬合結(jié)果及相關(guān)參數(shù)見(jiàn)表2。

表2 銀杏葉PPs的靜態(tài)等溫吸附擬合結(jié)果Table2 Fitting results for static adsorption isotherms of polyprenols

由表2可知，Langmuir等溫吸附模型相對(duì)于Freundlich等溫吸附模型能較好地描述PPs在NKA-Ⅱ樹(shù)脂上的靜態(tài)吸附特性。表明此質(zhì)量濃度條件下，PPs在NKA-Ⅱ樹(shù)脂上的吸附趨近單分子層吸附。Langmuir擬合結(jié)果中可以看出，隨溫度的升高，樹(shù)脂的飽和吸附量qm減小，與實(shí)驗(yàn)結(jié)果相對(duì)應(yīng)。Freundlich方程擬合結(jié)果中n值可以看作是吸附優(yōu)惠性的體現(xiàn)，在較低溫度條件下擬合得到的n值均大于1，表明是優(yōu)惠吸附。

2.4 操作條件對(duì)固定床穿透曲線的影響

NKA-Ⅱ樹(shù)脂固定床吸附純化PPs時(shí)，當(dāng)流出液的PPs質(zhì)量濃度達(dá)到其上樣液的5%時(shí)即認(rèn)為PPs已穿透[23,25]。同一上樣流速（Q =2.0 mL/min），樣品初始質(zhì)量濃度對(duì)固定床穿透曲線的影響見(jiàn)圖3。

圖3 銀杏葉PPs質(zhì)量濃度對(duì)穿透曲線的影響Fig.3 Effect of PPs concentration on breakthrough curves

由圖3可以看出，上樣質(zhì)量濃度為1.53、0.73 mg/mL和0.35 mg/mL時(shí)PPs的穿透點(diǎn)分別為30、35 min和40 min，樹(shù)脂達(dá)到完全飽和吸附時(shí)的時(shí)間分別為180、190 min和210 min?？梢?jiàn)，流速一定時(shí)，上樣質(zhì)量濃度越高，穿透點(diǎn)和飽和吸附點(diǎn)越靠前，達(dá)到飽和吸附的時(shí)間越短。因此，提高上樣質(zhì)量濃度有利于提高樹(shù)脂的使用效率。然而，由圖3可見(jiàn)，與上樣質(zhì)量濃度0.73 mg/mL相比，1.53 mg/mL的效果不是太明顯，并且上樣質(zhì)量濃度過(guò)高時(shí)，在一定流速條件下，物質(zhì)和樹(shù)脂的接觸時(shí)間變短，造成吸附量的降低，損失率變大，不利于生產(chǎn)。因此確定0.73 mg/mL為適宜的上樣質(zhì)量濃度。

圖4 上樣流速對(duì)穿透曲線的影響Fig.4 Effect of sample loading flow rate on breakthrough curves

固定上樣質(zhì)量濃度為0.73 mg/mL，分析上樣流速對(duì)固定床穿透曲線的影響，結(jié)果見(jiàn)圖4。與上樣流速為1 mL/min時(shí)的穿透曲線相比，流速為2 mL/min和3 mL/min時(shí)的穿透點(diǎn)都比較提前，穿透曲線也較陡，這是因?yàn)榱魉偌涌鞂⒅苯涌s短固液兩相的接觸時(shí)間，致使傳質(zhì)區(qū)加長(zhǎng)。但是，由于流速由2 mL/min增加至3 mL/min時(shí)，洗脫效果不是太明顯，且流速增加造成溶劑和原料的浪費(fèi)。綜上所述，確定2 mL/min為適宜的上樣流速。

表3 不同條件下固定床吸附PPs的穿透時(shí)間與模型計(jì)算結(jié)果Table3 Comparison of the experimental and calculated breakthrough time of PPs Ps

通過(guò)Bohart-Adams數(shù)學(xué)模型ln（ρ0/ρ?1）=A?Kρ0t對(duì)上述數(shù)據(jù)進(jìn)行擬合，得到穿透時(shí)間的理論數(shù)值，將其與實(shí)驗(yàn)測(cè)得數(shù)據(jù)進(jìn)行對(duì)比。結(jié)果如表3所示，理論值與實(shí)驗(yàn)值相差較小，所以Bohart-Adams能夠較好地?cái)M合該操作數(shù)據(jù)。綜上所述選擇以質(zhì)量濃度0.73 mg/g、流速2.0 mL/min作為固定床上樣條件。

2.5 固定床洗脫

NKA-Ⅱ樹(shù)脂固定床吸附PPs后，按照1.3.7節(jié)中的方法進(jìn)行梯度洗脫，每個(gè)梯度為3 BV，0.5 BV接一個(gè)流分，并用HPLC法檢測(cè)其中的PPs質(zhì)量濃度，考察洗脫劑組成對(duì)洗脫效果的影響，結(jié)果見(jiàn)圖5。

圖5 銀杏葉PPs的梯度洗脫曲線Fig.5 Elution curve of polyprenols

由圖5可見(jiàn)，當(dāng)洗脫劑為正己烷-丙酮（8∶2，V/V）時(shí)，洗脫峰窄且集中，被解吸的PPs主要集中于6.5～9 BV段，且3 BV的解吸劑可將吸附的PPs幾乎完全洗脫。因此，確定洗脫溶液為正己烷-丙酮（8∶2，V/V），用量5 BV。

質(zhì)量濃度為0.727 4 mg/mL的PPs正己烷溶液以2 mL/min的流速上樣，待NKA-Ⅱ樹(shù)脂固定床吸附飽和后，以正己烷-丙酮（80∶20，V/V）為洗脫劑，分別以1 mL/min和1.5 mL/min的流速洗脫，每10 min接一個(gè)流分，測(cè)定各流分中的PPs質(zhì)量濃度直至幾乎檢測(cè)不到，繪制PPs的洗脫曲線見(jiàn)圖6。

圖6 流速對(duì)銀杏葉PPs洗脫曲線的影響Fig.6 Effect of elution flow rate on elution curves of polyprenols

圖6 顯示，洗脫流速較大時(shí)，洗脫峰較提前，拖尾現(xiàn)象也較明顯。洗脫峰提前是流速加快導(dǎo)致樹(shù)脂表面液膜變薄，使傳質(zhì)系數(shù)增大，從而增大傳質(zhì)速率所致；洗脫曲線出現(xiàn)拖尾原因是流速較快時(shí)，交換帶也相應(yīng)較長(zhǎng)。從圖6還可以看出，洗脫流速越慢，洗脫峰越集中，但流速太慢，生產(chǎn)周期延長(zhǎng)，因此選擇在1 mL/min流速條件下進(jìn)行洗脫。

最后，在上述條件下經(jīng)NKA-Ⅱ樹(shù)脂固定床富集后，分離物中PPs含量由浸膏中的33.85%提高到71.54%，PPs的回收率達(dá)到了88.76%。采用梯度洗脫的方法對(duì)樹(shù)脂固定床進(jìn)行再生，再生的樹(shù)脂固定床連續(xù)使用3 次，吸附量未有明顯下降，再生第6次時(shí)才有明顯下降，表明該樹(shù)脂有較好的再生使用性。

3 結(jié) 論

從8 種不同型號(hào)的大孔樹(shù)脂中篩選出對(duì)銀杏葉PPs有較大吸附量的NKA-Ⅱ樹(shù)脂。采用3種動(dòng)力學(xué)模型分析出PPs在NKA-Ⅱ上的動(dòng)力學(xué)吸附符合一級(jí)速率方程；兩個(gè)等溫吸附方程對(duì)比，Langmuir等溫吸附模型能較好地描述PPs在NKA-Ⅱ樹(shù)脂上的靜態(tài)吸附平衡，且該吸附過(guò)程是能夠自發(fā)進(jìn)行的放熱過(guò)程。同時(shí)對(duì)NKA-Ⅱ樹(shù)脂固定床純化PPs工藝進(jìn)行探討，優(yōu)化得到NKA-Ⅱ大孔樹(shù)脂對(duì)PPs動(dòng)態(tài)吸附的工藝參數(shù)為：上樣流速2 mL/min、上樣質(zhì)量濃度0.73 mg/mL；優(yōu)化得到NKA-Ⅱ大孔樹(shù)脂對(duì)PPs動(dòng)態(tài)解吸的工藝參數(shù)為：流速1 mL/min、洗脫劑正己烷-丙酮（80∶20，V/V）、用量5 BV。PPs含量從樹(shù)脂柱純化前的33.85%提高到71.54%，回收率為88.76%。樹(shù)脂柱再生第6次時(shí)，對(duì)PPs的分離純化能力才有明顯降低，表現(xiàn)出較好的再生使用性。

[1] 徐宏彬, 李玲. 植物聚戊烯醇研究概述[J]. 中國(guó)藥師, 2008, 11(8): 977-979.

[2] SWIEZEWSKA E, SASAK W, MANKOWSKI T, et al. The research for plant polyprenols[J]. Acta Biochimica Polonica, 1994, 41: 221-260.

[3] TAKIGAWA T, IBATA K, MIZUNO M. Synthesis of mammalian dolichols from plant polyprenols[J]. Chemistry and Physics of Lipids, 1989, 51(3): 171-182.

[4] VAN HOUTE H A, BUSSON R H, PARMENTIER G G, et al. Synthesis of [1-14C] dolichol acid[J]. Chemistry and Physics Lipids, 1994, 72: 103-107.

[5] 楊克迪, 陳鈞, 歐陽(yáng)臻, 等. 高效液相色譜/大氣壓化學(xué)電離質(zhì)譜分析銀杏葉中聚戊烯醇化合物[J]. 分析化學(xué)研究簡(jiǎn)報(bào), 2003, 31(8): 937-940.

[6] 楊克迪, 陳鈞, 童張法. 反相高效液相色譜法制備銀杏葉中聚戊烯醇同系物單體[J]. 色譜, 2003, 21(1): 49-51.

[7] 楊克迪, 劉自力, 童張法, 等. 銀杏葉聚戊烯醇類化合物分離工藝研究[J]. 廣西大學(xué)學(xué)報(bào): 自然科學(xué)版, 2002, 27(2): 136-139.

[8] 孫磊, 李春斌, 范圣第. HPLC測(cè)定銀杏葉中聚戊烯醇的含量[J]. 華西醫(yī)學(xué)雜志, 2006, 21(3): 297-299.

[9] 王成章. 銀杏葉聚戊烯醇的化學(xué), 純化和藥效研究[J]. 天然產(chǎn)物研究與開(kāi)發(fā), 2001, 13(2): 43-45.

[10] DANILOY L L, MALTSEY S D, DEYEYA A V, et al. Phosprenyl: a novel drug with antiviral and immunomodulatory activity[J]. Archivum Immunologiae et Therapiae Experimentalis, 1995, 44(5/6): 395-400.

[11] 孫磊, 李春斌, 白靜, 等. 正交設(shè)計(jì)法在銀杏葉聚戊烯醇提取工藝中的應(yīng)用[J]. 中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)雜志, 2006, 23(5): 361-363.

[12] 王成章. 銀杏葉聚戊烯醇(GP)的分離和衍生物合成機(jī)理及生物活性研究[D]. 北京: 中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院, 2007: 43-45.

[13] 楊克迪, 陳鈞, 楊小明, 等. 銀離子配位萃取銀杏葉中多萜長(zhǎng)鏈化合物的研究[J]. 無(wú)機(jī)化學(xué)學(xué)報(bào), 2006, 22(2): 243-247.

[14] 付玉杰, 劉曉娜, 侯春蓮, 等. 大孔吸附樹(shù)脂分離純化異甘草素的研究[J]. 離子交換與吸附, 2006, 22(4): 315-322.

[15] 朱洪梅, 韓永斌, 顧振新, 等. 大孔樹(shù)脂對(duì)紫甘薯色素的吸附與解吸特性研究[J]. 農(nóng)業(yè)工程學(xué)報(bào), 2006(5): 153-156.

[16] 賈雁高, 杜愛(ài)玲, 谷成燕, 等. AB8大孔樹(shù)脂吸附與硅膠層析法分離姜酚的對(duì)比研究[J]. 山東大學(xué)學(xué)報(bào): 工學(xué)版, 2010(2): 121-125.

[17] 李潔, 楊小明, 王云飛, 等. 響應(yīng)面法優(yōu)化銀杏葉聚戊烯乙酸酯水解工藝[J]. 食品工業(yè)科技, 2013, 34(7): 256-259.

[18] 翁娜, 陳劍鋒, 鄭晨暉, 等. 銀杏葉聚戊烯醇的分離純化[J]. 現(xiàn)代化工, 2007, 27(增刊2): 373-376.

[19] SWIEZEWSKA E, DANIKIEWICZB W. Polyisoprenoids: structure, biosynthesis and function[J]. Progress in Lipid Research, 2005, 44(4): 235-258.

[20] 付杰, 李燕虎, 葉長(zhǎng)燊, 等. DMF在大孔吸附樹(shù)脂上的吸附熱力學(xué)及動(dòng)力學(xué)研究[J]. 環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào), 2012, 32(3): 639-644.

[21] 黃永春, 楊鋒, 馬月飛, 等. 860021大孔樹(shù)脂吸附茶多糖的研究[J].現(xiàn)代化工, 2007, 27(增刊2): 220-224.

[22] YU Ying, ZHUANG Yuanyi, WANG Zhonghua. Adsorption of water-soluble dye onto functionalized resin[J]. Journal of Colloid and Interface Science, 2001, 2: 288-293.

[23] DING Yan, YANG Xiaoming, PAN G, et al. Adsorption and enrichment of alkalids from areca nut by means of macroporous resins[J]. Adsorption Science and Technology, 2012, 30(3): 193-204.

[24] 谷芳芳, 任鳳蓮, 吳梅林. X-5大孔樹(shù)脂吸附熊果酸的動(dòng)力學(xué)與熱力學(xué)特性研究[J]. 廣州化學(xué), 2006(3): 15-19.

[25] 朱靜, 陸晶晶, 袁其朋. 大孔吸附樹(shù)脂對(duì)石榴皮多酚的分離純化[J].食品科技, 2010, 35(1): 188-193.

Enrichment and Purification of Ginkgo biloba Leaf Polyprenols by NKA-Ⅱ Macroporous Resin

LIU Yutao, YANG Xiaoming*
(School of Food and Biological Engineering, Jiangsu University, Zhenjiang 212013, China)

Resin NKA-Ⅱ was selected as the best one among eight kinds of macroporous resins for the purification of polyprenols (PPs) from Ginkgo biloba leaves in terms of its highest adsorption rate for PPs. The adsorption behavior of PPs on NKA-Ⅱ resin was further investigated and optimum parameters for adsorption and desorption were procured. The data showed that the adsorption behavior of PPs on NKA-Ⅱ resin followed the first order kinetic equation. The adsorption process was mainly affected by film diffusion. The adsorption isothermal curve obeyed both Freundlich and Langmuir isotherm equations. PPs were separated by a fixed bed packed with NKA-Ⅱ resin under the operating conditions as follows: 0.73 mg/mL of the sample was loaded onto the column at a flow rate of 2 mL/min and eluted with 5 BV of hexane-acetone (80:20, V/V) at a flow rate of 1 mL/min. Under these conditions, the content of PPs increased from 33.85% to 71.54%, and the recovery was 88.76%. After the sixth regeneration, its separation capacity for PPs began to significantly decrease, showing a good regenerability.

macroporous resin; adsorption; polyprenols

TS218

A

1002-6630（2015）04-0063-05

10.7506/spkx1002-6630-201504012

2014-07-21

鎮(zhèn)江市工業(yè)攻關(guān)項(xiàng)目（GY2011015）

劉玉桃（1988—），女，碩士研究生，研究方向?yàn)樘烊划a(chǎn)物的分離純化。E-mail：512075928@qq.com

*通信作者：楊小明（1963—），女，教授，博士，研究方向?yàn)樘烊划a(chǎn)物研發(fā)。E-mail：XM_Yang1963@126.com