中性粒細胞中毒顆粒與降鈣素原聯合檢測對細菌性肺炎診斷的意義

洪 駿，唐海霞，戴 雯，吳 嘉

細菌性肺炎是感染性疾病導致患者死亡的重要原因之一［1］。血液中炎癥標志物的水平變化與細菌感染性疾病的嚴重程度密切相關，可作為其病情監測和療效評估的有效指導［2］。中性粒細胞中毒顆粒(toxic granulation，TG)是細胞質中出現的比正常中性顆粒粗大、大小不等、呈黑色或紫黑色的顆粒。外周血中性粒細胞TG可作為炎癥評估指標，有助于診斷急性細菌性感染［3-4］。本研究通過分析細菌性肺炎患者中性粒細胞毒性指數(neutrophils toxicity granulation index，TG%)與其他炎癥指標的相關性，探討TG對于細菌性肺炎病情監測的意義。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取2013年1－6月于本院呼吸科確診為細菌性肺炎的住院患者88例，男51例，女37例，年齡(56±27)歲。所有入選病例均排除嚴重的肝腎功能不全、惡性腫瘤、血液系統疾病、全身免疫性疾病、大面積燒傷或近期手術者。選取初診未經任何治療患者50例，經抗生素治療3 d后，分別檢測治療前、后血液學指標。選取同期本院體檢中心的100例健康體檢者為正常對照組，男58例，女42例，年齡(45±16)歲。所有入選對象均經病史詢問、常規體格檢查及各項輔助檢查，包括心電圖、X線胸片、腹部B型超聲波檢查、肝腎功能檢測等。檢測結果均顯示正常，且排除心血管疾病、腦卒中、糖尿病、高血壓、肝或腎功能異常等。本研究通過醫院倫理委員會批準，入選對象均簽署知情同意書。

1.2 方法 所有研究對象分別采用EDTA-K2抗凝和分離膠促凝采血管收集禁食12 h以上的靜脈血各3 mL，細菌性肺炎患者的血標本分別于入院時即刻和入院治療1周后采集。檢測并比較兩組外周血TG%、血清降鈣素原(procaicltonin，PCT)、C反應蛋白(C-reactive protein，CRP)、白細胞計數(white blood cell，WBC)、中性粒細胞百分比(neutrophilic granulocyte percentage，NEUT%)及中性粒細胞計數(neutrophil count，NEUT#)水平。全血 WBC、NEUT%、NEUT#測定采用日本Sysmex XE-5000全自動血液分析儀及配套試劑。CRP測定采用意大利DELTA全自動特定蛋白分析儀及配套試劑和校準品。血清PCT測定采用羅氏公司E-411化學發光儀及配套試劑。TG顯微鏡計數由本實驗室工作經驗超過5年的技術人員進行，采用Sysmex SP-1000i全自動推片機推片，珠海BASO公司提供的瑞-吉氏染液染片，結果以TG%表示:TG%=(含TG的中性粒細胞數/計數的100或200個中性粒細胞)×100%。所有檢測均在當日室內質控在控的情況下，嚴格按照儀器操作規程操作。

1.3 統計學處理 用SPSS 16.0軟件進行分析。分析前各組數據均以Kolmogorov-Smirnov法檢驗其分布特征。正態分布數據以均數±標準差(±s)表示。正態分布數據多組間比較采用單因素方差分析，方差齊時兩兩組間比較用LSD檢驗，方差不齊時用Tamhane’s T2檢驗。變量間相關性采用Sperman相關分析。P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 細菌性肺炎患者的TG%及炎癥指標水平細菌性肺炎患者的 TG%、PCT、CRP、WBC、NEUT%、NEUT#均顯著高于健康對照組(P均＜0.05)，結果見表1。

表1 細菌性肺炎組與正常對照組血液學檢測結果(±s)

表1 細菌性肺炎組與正常對照組血液學檢測結果(±s)

注:與正常對照組相比，*P＜0.05

項目 細菌性肺炎組(n=88)正常對照組(n=100)TG(%) 17.13 ±22.06*0 PCT(μg/L) 2.97 ±12.19* 0.08 ±0.08 CRP(mg/L) 54.80 ±52.50* 2.30 ±4.67 WBC(×109/L) 10.26 ±4.93* 6.33 ±1.48 NEUT(%) 74.04 ±12.28* 58.39 ±8.35 NEUT#(×109/L) 7.79 ±4.46*3.79 ±1.76

2.2 細菌性肺炎患者TG%與炎癥指標的相關性分析 TG%與 PCT、CRP、WBC、NEUT%、NEUT#均呈顯著正相關(P均＜0.05)，結果見表2。

2.3 抗生素治療前后細菌性肺炎患者的炎癥指標變化 50例細菌性肺炎患者經入院治療后，TG%、PCT和 CRP明顯降低(P ＜0.05)，WBC、NEUT%和NEUT#則無明顯變化(P ＞0.05)，結果見表3。

3 討論

中性粒細胞的噬苯胺藍顆粒在早幼粒細胞階段形成并在中性粒細胞成熟，包含有效抗菌成分。當發生嚴重細菌感染時，粒細胞集落刺激因子被激活，大量未成熟粒細胞釋放入外周血。同時噬苯胺藍顆粒中酸性黏液物質不斷增多，最終形成中性粒細胞中毒顆粒。這些中毒顆粒在pH值5.5～7.3時能夠有效增強滅菌活性。有研究表明，中性粒細胞TG%可反映體內炎癥水平［5］。本研究顯示，細菌性肺炎患者的TG%顯著高于健康對照組，且與傳統炎癥指標CRP、WBC、NEUT%、NEUT#均呈顯著性正相關，提示TG%與細菌性肺炎患者體內炎癥水平密切相關，可作為細菌性感染的有效指標，與報道結果一致［6］。WBC、NEUT%和 NEUT#3項指標易受失血、白血病等非炎癥因素的干擾。CRP屬于急性時相反應蛋白，當發生炎癥感染時會增高。然而CRP是由肝臟產生，當肝臟功能受損時，會影響CRP的產生。因此，TG%在診斷細菌性感染時比WBC、CRP 等指標更為準確［7］。

表2 TG%與其他炎癥指標的相關性分析

表3 治療前后炎癥指標的結果(x ± s，n=50)

PCT是血清降鈣素前體，在正常人血清中含量極少。在嚴重細菌感染的早期(2～3 h后)即可升高，且峰值可維持24 h［8］。肺部發生細菌感染時，細菌的代謝產物是誘導炎性介質級聯反應的始發因子，進一步導致全身炎癥反應綜合征的加重，最終使血循環中的PCT水平顯著上升。PCT水平不受非細菌感染因素影響。病毒感染、自身免疫性疾病患者PCT水平維持在正常范圍，或僅有輕度增加［9］。Sangil等［10］對169例呼吸道感染患者血清PCT的研究結果表明，院內獲得性肺炎組及社區獲得性肺炎組與病毒性肺炎組相比，血清PCT明顯升高。隨著感染性疾病嚴重程度的增加，PCT水平也呈現顯著升高的趨勢，并與患者預后相關。石玉玲等［11］研究發現，細菌性肺炎患者的TG%與血清PCT水平呈顯著正相關，進一步提示TG%可作為細菌性感染的潛在指標，有助于區分細菌性與非細菌性肺炎。

本文通過進一步比較細菌性肺炎患者入院治療前、后TG%及各炎癥指標的變化，發現細菌性肺炎患者入院治療后的TG%、PCT、CRP顯著降低，而WBC、NEUT%和NEUT#則無明顯變化，提示TG%可作為反映體內炎癥水平的指標用于細菌性肺炎患者的療效評估，與文獻報道［12］相一致，有助于細菌性肺炎患者的鑒別診斷、病情監測及療效評估。

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