食用菌厲眼蕈蚊Lycoriella ingenua在溫度逆境下的存活率

曲紹軒，馬 林，袁 野，宋金俤，林金盛，李輝平，侯立娟

(江蘇省農業科學院蔬菜研究所，南京 210014)

Lycoriella ingenua Dufour 隸屬雙翅目Diptera、長角亞目Nematocera、眼蕈蚊科Sciaridae、厲眼蕈蚊屬Lycoriella。L.ingenua 世界分布，是歐洲以及澳大利亞雙孢蘑菇Agaricus bisporus Lange 生產上的主要害蟲之一，也是韓國香菇Lentinula edodes(Berk.)Pegler、平 菇Pleurotus ostreatus Kumm 和雙孢菇生產上的主要害蟲之一(White and Smith，2000;Smith，2002;Lewandowski et al.，2004)。成蟲可攜帶病菌造成子實體細菌性和真菌性病害(Scheepmaker et al.，1996)，雌成蟲繁殖力強，每雌一生可產卵150-170 粒，適宜條件下完成一代僅需21 d(Hussey and Gurney，1968)。該蟲在我國2013年首次報道，是野生食用菌的主要害蟲之一(曲紹軒等，2013)。作為國家食用菌產業技術體系蟲害防控崗位，我們經過5年的全國各主產區抽樣調查和監測，發現L.ingenua 在北京、河南、云南、江蘇、浙江等地為優勢種群，寄主范圍包括平菇、秀珍菇Pleurotus pulmonarius Fr.、雙孢蘑菇、香菇、美味牛肝菌Boletus edulis Bull.、松口蘑Tricholoma matsutake Sing.、青口蘑T.quercicola Zange 等，成蟲不取食，主要是幼蟲取食食用菌菌絲和子實體，其生物學特性尚不清楚。

本研究探討逆境溫度對L.ingenua 各蟲態存活力的影響，為研究不同地理區域種群的變化規律、預測預報和防治奠定基礎。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試蟲采自2012年本實驗室食用菌栽培大棚，寄主為雙孢蘑菇。第一代產卵后，收集到養蟲箱內，箱內放置平菇出菇袋，孵化的幼蟲以平菇的菌絲和子實體為食，待其化蛹轉至新的養蟲箱中。在室內以平菇為寄主繼代飼養至第20 代。溫度保持在22-25℃，濕度在80%以上。

1.2 試驗方法

以40℃作為各蟲態極端最高溫度，0℃作為成蟲、蛹、幼蟲的極端最低溫度，為研究卵對低溫的耐受力，將-20℃設為卵的極端最低溫度。各蟲態逆境溫度設置如下:成蟲、蛹、幼蟲為40℃、38℃、35℃、5℃、3℃、0℃共6個不同溫度梯度;卵增加3個低溫梯度-5℃、-10℃、-20℃，共9個溫度梯度。各溫度暴露處理時間為0.5 h、2 h、4 h、8 h、12 h、24 h、48 h、60 h 共8個時間段。在不同溫度下各暴露處理時間結束后，將各蟲態放回到25℃、RH80%的人工氣候箱中，添加平菇菌絲繼續飼養觀察。

成蟲:試驗材料取自人工規模化繼代飼養第21 代的成蟲，取羽化后3日齡，每個處理重復3 次，每重復20 頭成蟲。

卵:第21 代成蟲交尾收集到的1日齡卵，每個處理重復3 次，每重復20 粒。

幼蟲:第20 代初孵化的幼蟲，3 齡幼蟲，每個處理重復3 次，每重復20 頭幼蟲。

蛹:第20 代新化的蛹，2日齡內。每個處理重復3 次，每重復20個。

將上述各蟲態放置70 mm 的平皿內，皿內鋪有濾紙保濕，處理時幼蟲添加平菇菌絲作為食物，其他蟲態不添加食物。卵在0℃以下的低溫處理時濾紙保持干燥。按照不同的溫度和不同的暴露時間取樣觀察。各處理下的不同蟲態轉回到25℃、RH80%的人工氣候箱后，成蟲能正常活動記為存活;幼蟲用毛筆輕觸無反應或不能活動的視為死亡，如進入下一蟲態視為存活;蛹可發育到下一蟲態，視為存活;卵可孵化成幼蟲視為存活，10 d后仍未孵化視為死亡。記錄卵的孵化情況、幼蟲的死亡情況、蛹的羽化情況和成蟲死亡情況。計算各蟲態的存活率。

1.3 數據處理

各處理下的存活率由SPSS 20.0 統計軟件計算其平均數和標準差。同一溫度在相同暴露時間下各蟲態的存活率利用ANOVA 進行方差分析，各蟲態間的差異顯著性分析用Tukey's 多重比較法，顯著性差異水平為P＜0.05。

2 結果與分析

2.1 低溫條件下厲眼蕈蚊各蟲態的存活能力

試驗結果表明，相同低溫處理下隨著暴露時間的延長，各蟲態的存活率逐漸降低(表1)。低溫對各蟲態存活率影響的差異顯著性分析表明，相同暴露時間，成蟲在5℃低溫下的死亡率均低于其它蟲態，表現出較高的適應性。但成蟲對0℃低溫適應性較差，0℃下暴露24 h 后全部死亡，相同暴露時間下其它蟲態的存活率分別為6.7%(卵)、25.0%(幼蟲)、58.3%(蛹)。卵對短暫的低溫處理具有一定的耐受力，但隨著時間增加和溫度的下降死亡率驟升。

在無水無食條件下，成蟲在0-5℃下暴露0.5 h后停止活動，轉至室溫條件下觀察飛行恢復情況，隨著溫度的降低和暴露時間的延長成蟲死亡率增加。在3℃和5℃下，暴露60 h 后，成蟲的存活率分別為13.3%、96.7%;在0℃下，暴露24 h 后全部死亡。

幼蟲在5℃下暴露24 h 后停止取食，恢復室溫后能正常進行取食，暴露24 h 后開始死亡，暴露時間延長至60 h 后存活率為5.0%;在3℃下，暴露12 h 后開始死亡，48 h 后存活率為3.3%，60 h后全部死亡;在0℃下，暴露處理0.5 h 開始死亡，至48 h 后全部死亡。幼蟲對于24 h 內的低溫的耐受力高于成蟲。

蛹在5℃暴露24 h 后恢復室溫仍能全部羽化，延長時間到60 h，蛹的存活率降為70%;在3℃下，處理24 h 后存活率為43.3%，處理48 h 后全部死亡;在0℃下，處理4 h 內恢復室溫仍能正常羽化，但隨著處理時間的延長存活率明顯下降，至48 h 后全部死亡。

卵較耐短暫低溫，在3℃和5℃下暴露12 h 恢復室溫后能正常孵化，暴露處理時間超過24 h 開始死亡。0-20℃低溫條件下，能夠適應短暫的低溫，隨著暴露時間的增加存活率逐漸降低。5-20℃達到全部死亡的暴露時間分別為:60 h，48 h，48 h，12 h，8 h 和4 h。

2.2 高溫下厲眼蕈蚊各蟲態的存活能力

試驗結果表明，不同蟲態對高溫的耐受能力不同。成蟲對高溫的適應性顯著性高于其它蟲態，其次是蛹，幼蟲和卵不耐高溫。在38℃和40℃高溫下，幼蟲、卵分別在暴露12 h、0.5 h 和2 h、0.5 h 后全部死亡。蛹的羽化率隨著溫度升高而降低。當溫度高于35℃，嚴重影響其羽化率。

表1 各蟲態在不同溫度逆境下的存活率(%)Table1 The survival rates of Lycoriella ingenua under different adverse temperatures

(續上表)

在35℃下，成蟲暴露24 h 后開始死亡，存活率隨著暴露時間的增加下降緩慢，60 h 后存活率為66.7%;幼蟲和卵暴露60 h 后存活率均為13.3%，低于成蟲和蛹(31.7%)的存活率。

3 結論與討論

L.ingenua 是世界性的菇類害蟲，它能主動遷至各類食用菌上為害，喜鉆蛀，寄主范圍廣，防治難度大。L.ingenua 已發展成我國食用菌上的重要害蟲之一，該蟲害在我國不同栽培模式下的生物學特性尚不清楚，國內對其發生規律尚未有報道，缺乏預測預報信息。

本試驗研究了不同逆境溫度下該蟲各蟲態的存活率，探索其對溫度的適應性。結果表明，成蟲對高溫的適應性強，在相同高溫條件下，存活率高于其它蟲態。蛹與卵較耐短暫低溫，0℃下最長可存活48 h，卵在-5℃仍可存活幾個小時。與其形態極為相似的平菇厲眼蕈蚊L.pleuroti 相比，L.ingenua 成蟲對高溫的耐受力明顯較高。在35℃下，成蟲在暴露60 h 有66.7%的存活率，但平菇厲眼蕈蚊成蟲在34℃下暴露4 h 全部死亡。人們連續5年統計了農田土層中不同季節L.ingenua 幼蟲的數量，發現在4-11月的土層內均發現幼蟲，尤以初夏(6-7月)和秋季(9-10月)數量最多(Nielsen，2004)。該蟲在工廠化的菇房內全年可見，工廠化栽培的雙孢菇菇房內適宜蘑菇生長的最佳溫濕度條件，同時也有利于L.ingenua 的生長和繁殖(Jess et al.，2006)。L.ingenua 也是發酵料害蟲的優勢種群，在雙孢菇培養料發酵時，隨培養料進入菇房內，先以培養料內的腐殖質為食，菌絲萌發后轉以菌絲為主要食物。根據本研究對L.ingenua 溫度適應性的觀察，該蟲的成蟲和蛹對35℃以上的高溫適應性較高，可能以這種蟲態在菇房內越夏，卵和蛹對0℃以上低溫具有一定的耐受力，可在南方菇房、野外以各種蟲態越冬，工廠化栽培的食用菌上可全年為害，應及早引起重視。

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