常見稀釋粉對豬精液品質的影響試驗

趙 媛 （貴州省六盤水市鐘山區農業局 553000）

常見稀釋粉對豬精液品質的影響試驗

趙 媛 （貴州省六盤水市鐘山區農業局 553000）

精液保存是人工授精的重要組成部分，為篩選出最適合運用于生產的精液稀釋粉，選取了貴州市場最為廣泛的比利時CXM、西班牙Bio、美國Vim3種精液稀釋粉，進行稀釋保存對比試驗，檢測3種精液稀釋粉對精液稀釋與保存的效果。結果表明， “CXM”稀釋粉對精液稀釋及活力保存方面顯著優于其余兩組 （P＜0.05），且精液保存48h后輸精活力還能達到0.72，與其余兩者稀釋粉相比對精液稀釋與保存的效果最佳，適宜在生產中運用。

豬；精液；成活率；精液稀釋；人工授精；試驗

隨著人工授精技術的廣泛推廣，精液保存技術也越來越受到重視。精液保存是為了延長精子的貯存時間和維持其受精能力，便于長途運輸，擴大精液的使用范圍，提高種公豬的配種效能。這對于充分發揮良種公畜的遺傳潛力，降低傳染病的傳播幾率，加快畜群品種改良步伐具有重要意義[1]。目前精液的保存方法主要是通過稀釋后置于15～25℃環境中進行常溫保存[2]。由于稀釋液所提供的弱酸性環境，使得精子的運動能力和代謝效率受到了一定的抑制，因此常溫保存只能在一定時間范圍內延長精子的存活時間和保持受精能力。精液保存時間、保存效果是人工授精應用成敗的關鍵因素[3]，因此篩選出保存時間長、保存效果良好的稀釋粉，對人工授精技術和母豬繁殖性能的發揮有重要的經濟效益[4]。故判斷出適合貴州豬場使用的精液稀釋粉勢在必行，本試驗為此展開了研究。

1 材料與方法

1.1 精液與稀釋粉

新鮮精液由貴州省六盤水市某種豬場提供。經調查，貴州市場上最常見的精液稀釋粉有3種，均采購于農業部定點市場——貴陽市農業生產資料綜合批發市場：比利時CXM（產品批 2010-F-016577）、 美國 Vim Semen（產品批號EXP20150103）、 西班牙 Bio Pig（產品批號 24/05/2014-4），各精液稀釋粉均在保質期內。

1.2 主要儀器

顯微鏡、17℃恒溫冰箱、恒溫電熱板、精密溫度計、恒溫水浴鍋等。

1.3 精液的稀釋

稀釋粉按使用說明進行配比溶解，配制好的精液稀釋液置于37.5℃恒溫水浴鍋內。按 《豬常溫精液生產與保存技術規范 （GB/T 25172-2010）》進行稀釋[5]，精液稀釋后進行精子活力檢查，活力不低于0.7時，進行分裝。稀釋液總量以體積V計，按公式1計算：

V1—采精量，單位ml；

C—精子密度，單位108個/ml；

S—每頭份總精子數，單位108個；

V2—每頭份劑量，單位ml。

稀釋好的精液置于22～25℃下1～2h后，平放入17℃恒溫箱內避光保存。保存的精液每隔4～8h搖動一次，防止底層的精子被壓死。

1.4 精液稀釋后的活力觀察

本試驗采用間隔12h觀察制，稀釋后進行首次觀察記錄，每次觀察記錄間隔時間為12h。活力檢測時，用移液器取稀釋好的精液中層精液20ul，置于37.5℃恒溫電熱板上，在400倍鏡下進行檢查。每次用移液器取精液3滴，并且每個樣滴觀察1個視野，視野內的觀察選擇較為清晰的中層觀察。

1.5 數據記錄

每次觀察結果登記于Microsoft Office Excel 2007，利用Spss 18.0軟件進行數據分析，通過對各組間數據差異顯著性分析對各組精液稀釋粉稀釋、保存效果進行評判。

2 結果與分析

2.1 原精液活力檢測

經檢測，本試驗用原精液密度為2.1×108個/ml，活率為0.92，可以進行下一步試驗。

2.2 精液稀釋保存效果檢測

精液經3種精液稀釋液稀釋后，立即進行檢測，檢測所得第一次活力觀察計時為0h，每間隔12h對保存效果觀察一次，每次觀察3個樣滴，登記于表中，詳細記錄觀察時間、觀察到的每組活力，并計算出每組數據的平均值，最終通過Spss 18.0軟件進行數據分析，結果見附表。

附表 3種稀釋粉不同時間段對精液活力保存效果觀察結果

附表顯示，各組精液稀釋后活力均有所下降，CXM組對保護精液活力不受打擊能力顯著優于Bio組和Vim組 （P＜0.05），Bio組對保護精液活力不受打擊能力與Vim組相比，差異不顯著 （P＞0.05）。稀釋精液保存至輸精最低要求活力0.7時，CXM組保存48h后活力顯著優于Bio組和Vim組（P＜0.05），活力可達0.72，Bio組與Vim組保存不到12h時活力已降至0.7以下，差異顯著 （P＜0.05）。

3 討論

精液在稀釋時，活力有所下降[6]，其應激因素有來自滲透壓、溫度、稀釋劑的打擊，也有稀釋速度的打擊等[7]。比較3種稀釋粉在稀釋時對保護精液活力不受打擊能力從弱到強為CXM組＜Bio組＜Vim組。

精液稀釋液在保存精液時，CXM組保存48h后活力顯著優于Bio組和Vim組 （P＜0.05），活力可達0.72，說明CXM對精液活力保存能力在3種豬精液專用稀釋粉中最佳。Bio組與Vim組保存不到12h時活力已降至0.7以下，差異顯著（P＜0.05）。它們保存稀釋精液活力至輸精最低要求時的保存時間從強到弱為CXM＞Bio＞Vim。通過附表可看出，精液稀釋后活力隨保存時間延長而下降，這與陳清森等[8]報道相同。

4 結論

本試驗對比了貴州市場上常見3種豬專用精液稀釋粉對精液的稀釋保存效果，所對比的精液稀釋粉在稀釋保存時均對原精液有一定的打擊，且根據其打擊性大小，可以按它們打擊性從弱到強排列為CXM精液稀釋粉＜Bio精液稀釋粉＜Vim精液稀釋粉；3中豬專用精液稀釋粉在對精液稀釋保存的能力從強到弱排列為CXM精液稀釋粉＞Bio精液稀釋粉＞Vim精液稀釋粉；綜合分析，CXM稀釋粉對精液稀釋及活力保存方面顯著優于其余兩組 （P＜0.05），且48h內輸精活力還能達到0.72，與其余兩者稀釋粉相比對精液稀釋與保存的效果最佳，適宜在生產中運用。

[1]鮮紅，鄭鴻培，等.豬精液常溫保存研究進展[J].黑龍江動物繁殖，2004（1）：42-43.

[2]高飛，岳奎忠，楊增明，等.豬精液液態保存的研究進展[J].中國畜牧雜志，2004，40（6）：46-49.

[3]孫德林，等.豬人工授精與產業化工程[M].北京：中國農業科學技術出版社，2005.

[4]吳同山，胡艷娟，張守全，等.不同稀釋劑對母豬繁殖性能的影響[J].PIG TODAY，2007（3）：21-23.

[5]GB/T 25172-2010，豬常溫精液生產與保存技術規范[S].

[6]俞湘麟，吳昊晏，曹建國，等.不同精液稀釋粉與保存溫度對豬精液的保存效果[J].上海畜牧獸醫通訊，2009（9）：52-53.

[7]霍立軍.長期液態保存的公豬精液中精子的活率，線粒體活性，獲能和頂體完整性檢測[D].哈爾濱：東北農業大學，2002.

[8]陳清森，譚岳華，胡斌，等.四種豬精液稀釋粉的比較試驗[J].國外畜牧學（豬與禽），2012（8）：65-66.

趙媛，女，中級畜牧師。