嗜麥芽窄食單胞菌42-2降解黃曲霉毒素B1的效果研究

郝修震，岳曉禹，*，李長濱，辛　婷，李軍霞（.河南牧業(yè)經(jīng)濟(jì)學(xué)院質(zhì)檢系，河南鄭州450046；.中國農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院，北京00083）

嗜麥芽窄食單胞菌42-2降解黃曲霉毒素B1的效果研究

郝修震1，岳曉禹1，*，李長濱1，辛婷1，李軍霞2
（1.河南牧業(yè)經(jīng)濟(jì)學(xué)院質(zhì)檢系，河南鄭州450046；2.中國農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院，北京100083）

黃曲霉毒素B1（AFB1）對(duì)人類和家畜的健康危害很大。本文以嗜麥芽窄食單胞菌（Stenotrophomonas sp.42-2）為研究菌株，對(duì)其進(jìn)行了急性毒理實(shí)驗(yàn)，并利用該菌的上清液、發(fā)酵液和胞外蛋白粗提取液分別進(jìn)行了發(fā)霉玉米、飼料、生大黃、柏子仁和懷山藥的黃曲霉毒素B1降解實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明：活菌制劑在2.56×1010CFU個(gè)/mL劑量以下不會(huì)引起急性毒性反應(yīng)。在菌株42-2的上清液、發(fā)酵液和胞外蛋白粗提取液的毒素降解實(shí)驗(yàn)中，三者對(duì)發(fā)霉玉米中AFB1的降解率分別為：74.90%、82.60%和65.40%；對(duì)飼料中AFB1的降解率分別為：77.60%、82.50%和71.20%；對(duì)生大黃中AFB1的降解率分別為：73%、78.10%和68.40%；對(duì)柏子仁中AFB1的降解率為：76%、79.50%和70.50%；對(duì)懷山藥中AFB1的降解率分別為：65.30%、69.10%和61.10%。

嗜麥芽窄食單胞菌，黃曲霉毒素B1，毒素降解，應(yīng)用

黃曲霉毒素（Aflatoxin，AFT）是由Aspergillus flavus、Aspergillums nomius、Aspergillus parasiticus等多種真菌產(chǎn)生的次級(jí)代謝產(chǎn)物，其中黃曲霉毒素B1（AFB1）分布范圍最廣且化學(xué)性質(zhì)最穩(wěn)定，具有很強(qiáng)的毒性、致癌性、致突變性和致畸性，對(duì)人類和家畜的健康危害很大［1-3］。采用微生物或其分泌的代謝產(chǎn)物來對(duì)其進(jìn)行生物脫毒處理?xiàng)l件相對(duì)溫和，不會(huì)破壞產(chǎn)品的品質(zhì)，而且具備專一性強(qiáng)、轉(zhuǎn)化效率高、對(duì)環(huán)境沒有污染等優(yōu)勢(shì)，代表了生物解毒的新方向，而且有些還能增加產(chǎn)品的風(fēng)味和營養(yǎng)價(jià)值，從而備受研究者關(guān)注［4-8］。Liu等發(fā)現(xiàn)真菌假密環(huán)菌（Armillariella tabescens）的粗提液具有降解黃曲霉毒素B1的功能，并分離出一種黃曲霉毒素脫毒酶［9-10］。Teniola等從Rhodococcus erythopolis和Mycobacterium fluoranthenivorans細(xì)胞內(nèi)獲得的提取物具有黃曲霉毒素B1降解能力［11］。Zjalic等對(duì)白腐菌（Trametes versicolor）進(jìn)行了研究，認(rèn)為其具有降解黃曲霉毒素的能力［12］。Alberts等對(duì)Rhodococcus erythropolis降解毒素進(jìn)行了研究，并說明其AFB1降解能力是通過酶解作用實(shí)現(xiàn)的［8］。對(duì)Flavobacterium Aurantiacum的文獻(xiàn)報(bào)道表明，其不僅能顯著降低液體培養(yǎng)基中的黃曲霉毒素，并且沒有毒性副產(chǎn)物的生成［13-14］。利用嗜麥芽窄食單胞菌對(duì)具體實(shí)物中黃曲霉毒素進(jìn)行降解效果的研究，目前國內(nèi)外文獻(xiàn)中尚不多見。本研究以實(shí)驗(yàn)室分離保存的嗜麥芽窄食單胞菌（Stenotrophomonas sp.42-2）為研究菌株，對(duì)其急性毒理進(jìn)行了初步研究，同時(shí)利用Stenotrophomonas sp.42-2的上清液、發(fā)酵液和胞外蛋白粗提取液，選擇黃曲霉毒素含量較高的樣品發(fā)霉的玉米、發(fā)霉的飼料及中草藥進(jìn)行毒素降解實(shí)驗(yàn)，以分析其應(yīng)用價(jià)值，為實(shí)現(xiàn)其商品化提供依據(jù)。

1　材料與方法

1.1材料與儀器

Stenotrophomonas sp.42-2本實(shí)驗(yàn)室保存；發(fā)霉玉米、發(fā)霉飼料實(shí)驗(yàn)室自制；懷山藥、生大黃、柏子仁購自中藥市場(chǎng)；實(shí)驗(yàn)動(dòng)物成熟SD種小鼠40只，雌雄各半，四周齡，體重（20±2）g，SPF級(jí)，河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室提供；飼料SPF級(jí)小鼠生長發(fā)育標(biāo)準(zhǔn)飼料，北京科澳協(xié)力飼料有限公司。

HSX-250恒溫恒濕培養(yǎng)箱上海和呈儀器制造有限公司；HZQ-Q全溫振蕩器哈爾濱東聯(lián)電子設(shè)備有限公司。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1發(fā)酵液的制備果糖1.0%、胰蛋白胨1.0%、MgCl20.05 mol/L，起始pH為7.5，裝液量為25 mL/300 mL三角瓶，種子液培養(yǎng)時(shí)間為12 h，接種量為5%，控制降解溫度為35℃，搖床轉(zhuǎn)速140 r/min。

1.2.2發(fā)霉玉米及飼料的制備將購自飼料獸藥市場(chǎng)的玉米、飼料，置于恒溫恒濕培養(yǎng)箱中，28℃、90%相對(duì)濕度條件下培養(yǎng)10 d，備用。

1.2.3急性毒性實(shí)驗(yàn)

1.2.3.1菌懸液的制備發(fā)酵液經(jīng)離心處理得到菌體沉淀，用無菌水洗滌2次，涂布平板，參考依據(jù)GB/T 4789.2《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)》進(jìn)行菌落總數(shù)測(cè)定，計(jì)算出原始菌數(shù)，依次倍比稀釋，配制成含三個(gè)梯度活菌數(shù)的活菌懸浮液。

1.2.3.2最大耐受量的測(cè)定菌懸液采用最大耐受實(shí)驗(yàn)，灌胃量為0.2 mL/只。

實(shí)驗(yàn)小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)2 d，以了解其健康狀況和正常活動(dòng)情況。飼養(yǎng)室氣溫25℃，相對(duì)濕度45%。觀察其毛色光亮、行動(dòng)敏捷、無異常分泌物、健康活潑的動(dòng)物留作正式實(shí)驗(yàn)用。取40只健康小鼠，雌雄各半。以體重為指標(biāo)隨機(jī)分成四組，每組雌雄各5只。雌雄小鼠同時(shí)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)前全體動(dòng)物隔夜禁食16 h，不限制飲水。正式實(shí)驗(yàn)時(shí)，按照0.2 mL/只體重經(jīng)口灌喂給予受試小鼠。密切注意觀察2 h，看是否有急性毒性發(fā)作，記錄動(dòng)物中毒癥狀及死亡情況，由此可推斷樣品引起動(dòng)物哪些器官異常反應(yīng)。2 h后常規(guī)飲食，連續(xù)觀察7 d，每日早晨定時(shí)觀察記錄。根據(jù)各劑量組小鼠死亡情況查表計(jì)算最大耐受量［15-16］。

1.2.4胞外蛋白粗提取液及離心上清液的制備取發(fā)酵液置于大離心管中，6000 r/min離心15 min，得到上清液和菌體沉淀。取部分上清液進(jìn)行硫酸銨沉淀，取沉淀各添加pH8.0磷酸緩沖液使沉淀溶解。溶解后將溶液裝入透析袋中，置于4℃下，用pH8.0緩沖液透析除鹽約24 h，得到胞外蛋白粗提取液，備用。

1.2.5發(fā)霉玉米中黃曲霉毒素降解實(shí)驗(yàn)

1.2.5.1發(fā)霉玉米毒素降解培養(yǎng)取發(fā)霉玉米樣品進(jìn)行粉碎，之后過20目篩，稱取80.0 g，取四個(gè)250 mL具塞錐形瓶，每個(gè)瓶中加20.0 g的玉米樣品，然后分別加入50 mL的上清液、胞外蛋白粗提取液以及發(fā)酵液，并以50 mL去離子水作為陰性對(duì)照，混合均勻，37℃降解72 h。每個(gè)處理做3個(gè)重復(fù)。

1.2.5.2玉米樣品中黃曲霉毒素B1的測(cè)定將玉米樣品液體置于80℃的烘箱中烘干，準(zhǔn)確加入50.0 mL甲醇-水（80∶20）溶液和15.0 mL石油醚（沸程60～90℃），蓋塞后150 r/min振蕩30 min。用快速定性濾紙過濾于125 mL分液漏斗中，待分層后，放下下層甲醇-水溶液于50 mL燒杯內(nèi)，從中取10.0 mL（相當(dāng)于4.0 g樣品）于蒸發(fā)皿中，65℃水浴通風(fēng)揮干。用20%（20+80）甲醇-PBS2.0 mL分三次（0.8、0.7、0.5 mL）溶解并徹底沖洗蒸發(fā)皿中凝結(jié)物，移至小離心管加蓋振蕩后靜置待測(cè)。

1.2.5.3黃曲霉毒素降解率的計(jì)算黃曲霉毒素降解率AFB1（%）=（降解前樣品中黃曲霉毒素含量-降解后樣品中毒素剩余量）/降解前樣品中黃曲霉毒素含量×100

降解前樣品中黃曲霉毒素含量單位、降解后樣品中毒素剩余量單位均為μg/kg。

發(fā)霉飼料中黃曲霉毒素降解率、中草藥中黃曲霉毒素降解率計(jì)算方法同上。

1.2.6發(fā)霉飼料中黃曲霉毒素降解實(shí)驗(yàn)

1.2.6.1發(fā)霉飼料毒素降解培養(yǎng)結(jié)合GB/T 5009.22法進(jìn)行毒素的提取。取發(fā)霉飼料樣品進(jìn)行充分混勻，過20目篩，稱取20.0 g，取四個(gè)250 mL具塞錐形瓶，每個(gè)瓶中加5.0 g的飼料樣品，然后分別加入15 mL的上清液、胞外蛋白粗提取液以及發(fā)酵液，并以15 mL去離子水作為空白對(duì)照，混合均勻，37℃降解72 h。每個(gè)處理做3個(gè)重復(fù)。

1.2.6.2飼料樣品中黃曲霉毒素B1的測(cè)定結(jié)合GB/T 17480法進(jìn)行毒素的提取。首先將樣品液體置于80℃的烘箱中烘干，將處理好的樣品，加甲醇水溶液（1∶1）25 mL，加塞振蕩10 min，過濾于50 mL磨口試管中，棄掉1/4初濾液，再收集濾液，該濾液為待測(cè)的樣品提取液。

1.2.7霉變中草藥中黃曲霉毒素降解實(shí)驗(yàn)

1.2.7.1目的中草藥的篩選從實(shí)驗(yàn)室保存的中草藥中篩選出黃曲霉毒素含量較高的中草藥。具體操作是，將中草藥置于PDA培養(yǎng)基中，在30℃條件下培養(yǎng)一周，從中選出長有霉菌的中草藥。取霉變中草藥樣品進(jìn)行粉碎成粉末狀，充分混勻，過20目篩。取所選藥材粉末各80.0 g，每種取四個(gè)250 mL具塞錐形瓶，每個(gè)瓶中加20.0 g的中草藥樣品，然后分別加入50 mL的上清液、胞外蛋白粗提取液以及發(fā)酵液，并以50 mL去離子水作為空白對(duì)照，混合均勻，37℃降解72 h。每個(gè)處理做3個(gè)重復(fù)。

1.2.7.2中草藥樣品中黃曲霉毒素B1的測(cè)定首先將樣品液體置于80℃的烘箱中烘干，加甲醇水溶液（45∶55）100 mL，再加正己烷30 mL，振搖，過濾，取下層20 mL于分液漏斗中，加氯仿20 mL，振搖后靜置分層，放出氯仿層，立即經(jīng)盛有10 g氯仿濕潤過的無水硫酸銨的定量快速濾紙過濾于蒸發(fā)皿中，65℃水浴蒸干，用20%（20+80）甲醇-PBS 2.0 mL分三次（0.8、0.7、0.5 mL）溶解并徹底沖洗蒸發(fā)皿中凝結(jié)物，移至小離心管加蓋振蕩后靜置待測(cè)。

1.3數(shù)據(jù)處理與分析

所得數(shù)據(jù)均為3次的平均值，用SAS 9.0進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。

2　結(jié)果與分析

2.1活菌計(jì)數(shù)結(jié)果

按照要求，經(jīng)過菌落總數(shù)測(cè)定后，得到原始菌數(shù)為：2.56×1010CFU/mL。

2.2灌胃結(jié)果及最大耐受量的測(cè)定

灌胃結(jié)果觀察：灌胃后2 h觀察，小鼠均反應(yīng)正常，無異常現(xiàn)象。連續(xù)觀察7 d，無死亡現(xiàn)象，均正常存活，存活7 d的小鼠解剖，無異常。結(jié)果見表1。

表1　菌懸液的最大耐受量Table 1　The maximum tolerance of the cells solution

小鼠對(duì)菌懸液的最大耐受量為細(xì)胞數(shù)大于2.56× 1010CFU/mL，考察成人服用益生菌活菌制劑的實(shí)際用量為每日2 g，以及FAO/WHO頒布實(shí)施的《食品益生菌評(píng)價(jià)指南》，目前商品化生產(chǎn)的活菌制劑的活細(xì)胞數(shù)大約為108個(gè)/mL，因此2.56×108CFU/mL是安全無毒的。在以后的研究中可以進(jìn)行后續(xù)的遺傳毒性實(shí)驗(yàn)、亞慢性毒性實(shí)驗(yàn)和慢性毒性實(shí)驗(yàn)，以確保其應(yīng)用安全性。

2.3發(fā)霉玉米中黃曲霉毒素降解實(shí)驗(yàn)

由圖1和表2可知，發(fā)酵液對(duì)發(fā)霉玉米中AFB1的降解作用最強(qiáng)，高達(dá)82.6%，其次為上清液，胞外蛋白粗提液的降解效果最差。可以推斷出起主要作用的是降解黃曲霉毒素活性蛋白，但是在降解初期，可能由于菌體對(duì)毒素具有較強(qiáng)的吸附作用，此時(shí)解吸附作用不明顯。分析胞外蛋白粗提液的降解效果差的原因，可能在毒素提取的過程中由于蛋白含量比較高，會(huì)出現(xiàn)乳化現(xiàn)象，這對(duì)ELISA檢測(cè)試劑盒造成影響，會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)假陽性的結(jié)果，因而測(cè)出毒素含量較前兩種要高。

圖1　不同處理對(duì)玉米中AFB1的降解效果Fig.1　The AFB1 degradation results in maize

表2　ELISA檢測(cè)玉米中AFB1Table 2　The results of AFB1 in maize by ELISA method

2.4發(fā)霉飼料中黃曲霉毒素降解實(shí)驗(yàn)

圖2　不同處理對(duì)飼料中AFB1的降解效果Fig.2　The AFB1 degradation results in feed

表3　ELISA檢測(cè)飼料中AFB1含量Table 3　The results of AFB1 content in feed by ELISA method

由圖2和表3可知，發(fā)酵液對(duì)發(fā)霉飼料中AFB1的降解作用最強(qiáng)，高達(dá)82.5%，其次為上清液，胞外蛋白粗提液的降解效果最差。這一趨勢(shì)和降解玉米中的黃曲霉毒素基本一致。并且在實(shí)驗(yàn)過程中，發(fā)現(xiàn)加有三種不同溶液的飼料里面沒有霉菌的生長，這可能是由于Stenotrophomnas sp.的活性代謝產(chǎn)物能有效抑制霉菌的生長，以后的實(shí)驗(yàn)過程中可以加深活性產(chǎn)物對(duì)霉菌生長機(jī)理的研究。

2.5霉變中草藥中黃曲霉毒素降解實(shí)驗(yàn)

從實(shí)驗(yàn)室保存的中草藥中選出三種長有霉菌的中草藥，分別為生大黃、柏子仁和懷山藥。然后分別用上清液、胞外蛋白粗提取液以及發(fā)酵液對(duì)其進(jìn)行解毒，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表4～表6和圖3。

表4　ELISA檢測(cè)生大黃中AFB1的結(jié)果Table 4　The results of AFB1 in rhubarb by ELISA method

表5　ELISA檢測(cè)柏子仁中AFB1的結(jié)果Table 5　The results of AFB1 in Seman Biotae by ELISA method

表6　ELISA檢測(cè)懷山藥中AFB1的結(jié)果Table 6　The results of AFB1 in yam by ELISA method

圖3　不同處理對(duì)不同中草藥中AFB1的降解效果Fig.3　The AFB1 degradation results in different herbal medicines

從結(jié)果可以看出，上清液、發(fā)酵液和胞外蛋白粗提取液對(duì)生大黃中AFB1的降解率分別為：73%、78.10%和68.40%；對(duì)柏子仁中AFB1的降解率為：76%、79.50%和70.50%；對(duì)懷山藥中AFB1的降解率分別為：65.30%、69.10%和61.10%。從中可知，發(fā)酵液降解三種中草藥中的AFB1能力最強(qiáng)，其次是上清液，最差的是胞外蛋白粗提取液。中草藥多為植物的根、莖、葉、花、果實(shí)或全草類，含有適宜霉菌生長的成分，如糖、淀粉、蛋白質(zhì)及其他營養(yǎng)物質(zhì)，在采集的過程中，常因不能及時(shí)處理，或在貯藏過程中受潮等因素而長霉，從而產(chǎn)生AFB1。采用生物活性蛋白制劑來進(jìn)行中草藥的解毒可以達(dá)到不破壞中草藥成分的目的。對(duì)毒素的降解，某些微生物可以吸附黃曲霉毒素，形成菌體黃曲霉毒素復(fù)合體，從而降低毒素的危害［17-18］。自然界中生物產(chǎn)生的某些酶或活性蛋白也具有分解毒素分子的功能性基團(tuán)，可以把霉菌毒素轉(zhuǎn)化為無毒化合物［9-11］。本研究結(jié)果初步表明，Stenotrophomonas sp. 42-2菌株分泌的胞外蛋白活性物質(zhì)具有降解黃曲霉毒素的功能，與有關(guān)報(bào)道一致。Alberts等對(duì)紅串紅球菌降解AFB1的機(jī)理進(jìn)行研究，認(rèn)為其分泌的胞外酶對(duì)黃曲霉毒素產(chǎn)生生物降解作用［8］。Teniola等從污染的土壤中分離得到紅串紅球菌，其分泌的胞外酶具有較高的降解AFB1的能力［11］。Hormisch等從煤田附近污染的土壤樣品中分離到一株能夠AFB1的分支桿菌，進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)證明其對(duì)黃曲霉毒素的降解是生物酶解作用［19］。

3　結(jié)論

實(shí)驗(yàn)表明活菌制劑在2.56×1010CFU/mL劑量以下不會(huì)引起急性毒性反應(yīng)。

使用Stenotrophomonas sp.42-2的上清液、發(fā)酵液和胞外蛋白粗提取液分別進(jìn)行了發(fā)霉玉米、飼料和3種中草藥的降解實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明，對(duì)發(fā)霉玉米中AFB1的降解率分別為74.90%、82.60%和65.40%；對(duì)飼料中AFB1的降解率分別為77.60%、82.50%和71.20%；對(duì)生大黃中AFB1的降解率分別為73%、78.10%和68.40%；對(duì)柏子仁中AFB1的降解率為76%、79.50%和70.50%；對(duì)懷山藥中AFB1的降解率分別為65.30%、69.10%和61.10%。對(duì)黃曲霉毒素降解起到了較好的效果，為進(jìn)一步開展應(yīng)用研究提供了有益探索。

［1］岳曉禹，張恒業(yè)，辛婷，等.儲(chǔ)糧預(yù)測(cè)微生物模型的研究進(jìn)展［J］.中國糧油學(xué)報(bào)，2012，27（5）：118-123.

［2］賴先文，張荷，劉承蘭.稻米中黃曲霉毒素和赭曲霉毒素A的研究進(jìn)展［J］.食品工業(yè)科技，2014，35（22）：386-390.

［3］Kohli E，Raj H G，Kumari R，et al.Comparison of the Prevention of Aflatoxin B1-lnduced Genotoxicity by Quercetin and Quercetin Pentaacetate［J］.Bioorganic&Medicinal Chemistry，2002，12（18）：2579-2582.

［4］Kabak B，Dobson A D W，Var I.Strategies to prevent mycotoxin contamination of food and animal feed：a review［J］.CriticalReviews in Food Science and Nutrition，2006，46（8）：593-619.

［5］Smiley R D，Draughon F A.Preliminary evidence that degradation of aflatoxin B1 by Flavobacterium aurantiacum is enzymatic［J］.Journal of Food Protection，2000，63（3）：415-418.

［6］Motomura M，Toyomasu T，Mizuno K，et al.Purification and characterization of an aflatoxin degradation enzyme from Pleurotus ostreatus［J］.Microbiological Research，2003，158（3）：237-242.

［7］陳衛(wèi)，翟齊嘯.益生菌對(duì)食品安全危害因子的拮抗與減除［J］.中國食品學(xué)報(bào)，2014，14（11）：1-10.

［8］Alberts J F，Engelbrecht Y，Steyn P S，et al.Biological degradation of aflatoxin B1 by Rhodococcus erythropolis cultures［J］.International Journal of Food Microbiology，2006，109（1/2）：121-126.

［9］Liu D L，Yao D S，Liang R，et al.Detoxification of Aflatoxin B1 by Enzymes Isolated from Armillariella tabescens［J］.Food and Chemical Toxicology，1998，36：563-574.

［10］Liu D L，Yao D S，Liang Y Q，et al.Production，purification，and characterization of an intracellular aflatoxin-detoxifizyme fromArmillariella tabescens（E-20）［J］.Food andChemical Toxicology，2001，39（5）：461-466.

［11］Teniola O D，Addo P A，Brost I M，et al.Degradation of aflatoxin B1 by cell-free extracts of Rhodococcus erythropolis and Mycobacterium fluoranthenivorans sp.nov.DSM44556T［J］. International Journal of Food Microbiology，2005，105：111-117.

［12］Zjatic S，Reverbefi M，Ricelli A，et al.Trametes versicolor：a possible tool for aflatoxin control［J］.lnternational Journal of Food Microbiology，2006，107（3）：243-249.

［13］Hao Y，Brackett R E.Removal of aflatoxin B1 from peanut milk inoculated with Flavobacterium aurantiacum［J］.Journal of Food Science，1988，53：1384-1386.

［14］Line J E，Brackett R E.Factors affecting aflatoxin B1 removal by Flavobacterium aurantiacum［J］.Journal of Food Protection，1995，58：91-94.

［15］龍菲，文嬙華，楊慧，等.硫酸鋁鉀對(duì)小鼠的急性毒性和蓄積毒性實(shí)驗(yàn)［J］.毒理學(xué)雜志，2014，28（4）：298-300.

［16］劉曉風(fēng)，劉琳，王曉力，等.罌粟籽油毒理學(xué)研究與安全性評(píng)價(jià)［J］.中國糧油學(xué)報(bào)，2014，29（5）：65-69.

［17］Nagendra S，Xiaorong W.Aflatoxin B1 Binding Abilities of Probiotic［J］.Bioscience Microflora，1999，18（1）：43-48.

［18］El-Nezami H，Kankaanpaa P，Salminen S，et al.Ability of dairy strains of lactic acid bacteria to bind a common food carcinogen，aflatoxin B1［J］.Food and Chemical Toxicology，1998，36：321-326.

［19］Hormisch D，Brost I，Kohring G W，et al.Mycobacterium fluoranthenivorans sp.nov.，a fluoranthene and aflatoxin B1 degrading bacterium from contaminated soil of a former coal gas plant［J］.Systematic and Applied Microbiology，2004，27（6）：653-660.

Study on the degradation of aflatoxin B1 by Stenotrophomonas sp.42-2

HAO Xiu-zhen1，YUE Xiao-yu1，*，LI Chang-bin1，XIN Ting1，LI Jun-xia2
（1.Department of Quality Detection and Management，Henan University of Animal Husbandry and Economy，Zhengzhou 450046，China；2.College of Food，China Agricultural University，Beijing 100083，China）

Aflatoxin B1（AFB1）does great harm to human and animal health.The test of the acute toxicity of the strain had been done.The degradation tests of the AFB1 in mould maize，feed，rhubarb，semen boitae and yam had been implemented by using the strains’culture supernatant，the fermentation broth and the extracellular enzyme extract respectively.The results showed that the microbe cells didn’t cause the reaction of the acute toxic if the biomass was lower than 2.56×1010CFU/mL.The results of the degradation test of the AFB1 were as follows.In maize，the degradation rates were 74.90%，82.60%and 65.40%respectively.In feed the degradation rates were 77.60%，82.50%and 71.20%respectively.In rhubarb the degradation rates were 73%，78.10%and 68.40%respectively.In semen boitae the degradation rates were 76%，79.50%and 70.50%respectively.In yam the degradation rates were 65.30%，69.10%and 61.10%respectively.

Stenotrophomonas sp.；aflatoxin B1；toxin degradation；application

TS201.1

A

1002-0306（2015）20-0092-05

10.13386/j.issn1002-0306.2015.20.010

2015－02－02

郝修震（1967-），男，副教授，研究方向：食品安全，E-mail：hxz3098@163.com。

岳曉禹（1974-），男，博士研究生，副教授，研究方向：食品安全，E-mail：yuerain@163.com。

國家自然基金項(xiàng)目（U1404332）；鄭州市科研攻關(guān)項(xiàng)目（131PPTGG422-1）；河南省高等學(xué)校青年骨干教師資助計(jì)劃；校科技創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目（HUAHE2015015）。