老年人結直腸癌中EGFR、VEGF和P-gp表達及其相關性的分析

劉曉斌鄭原印

（1 福建醫科大學附屬寧德市閩東醫院病理科，福建 福安 355000；2 福建醫科大學附屬寧德市閩東醫院老年醫學科，福建 福安 355000）

老年人結直腸癌中EGFR、VEGF和P-gp表達及其相關性的分析

劉曉斌1，2鄭原印1*

（1 福建醫科大學附屬寧德市閩東醫院病理科，福建 福安 355000；2 福建醫科大學附屬寧德市閩東醫院老年醫學科，福建 福安 355000）

目的 探討EGFR、VEGF和P-gp蛋白在老年人結直腸癌中的表達及其相關性分析。方法 應用免疫組織化學技術對79例老年人結直腸癌病理切片進行EGFR、VEGF和P-gp的聯合檢測，并結合檢測結果進行統計學分析。結果 79例老年人結直腸腺癌組織中，VEGF、EGFR和P-gp蛋白的表達與結直腸腺癌組織的分化程度、浸潤深度、是否有癌栓、淋巴結轉移和Duck分期密切相關（P＜0.05）。EGFR表達與VEGF、P-gp陽性表達，及VEGF表達與P-gp陽性表達均無統計學意義（P＞0.05）。結論 VEGF、EGFR和P-gp的表達結果表明結直腸腺癌存在著多基因表達，這些基因可能參與了結直腸腺癌的發生和發展。三者的聯合檢測有助于判斷結直腸腺癌的生物學行為和預后。

結直腸癌；老年人；EGFR；VEGF；P-gp

結直腸癌是人類最常見的腫瘤之一，以老年人最常見，預后常較不理想。結直腸癌的發生是多基因參與的過程，針對癌基因變異因子的靶點，選擇突變基的有效分子靶向藥物，已成為結直腸癌綜合治療的一種新方法［1］。EGFR是酪氨酸激酶I型受體蛋白，能抑制腫瘤細胞的凋亡［2］。血管內皮生長因子（VEGF）被認為是一種特異性極強的促血管生成因子，促進新生血管及淋巴管的形成［3］。P-gp蛋白利用ATP提供的能量轉運特異性的底物，將藥物轉運出細胞外，與很多原發性腫瘤和獲得性耐藥相關［4］。本研究應用免疫組織化學方法檢測老年人結直腸癌組織中EGFR、VEGF和P-gP蛋白的表達情況，并分析其與臨床病理學的關系。

1　資料與方法

1.1病例資料：收集我院2012年1月至2015年5月手術切除的老年人（≥60歲）結直腸腺癌病例79例，找出原蠟塊，切片3張，進行免疫組化染色。

1.2檢測方法：79例結直腸癌標本，常規取材后組織塊經固定、脫水、包埋、切片、染色，光鏡觀察。免疫組化染色采用SP二步法，實驗步驟嚴格按照說明書進行。

1.3結果判定：EGFR、VEGF和P-gp蛋白表達陽性均為癌細胞質和細胞膜，呈棕黃色染色。陽性程度判斷：整張切片無陽性細胞（-），陽性細胞＜10%（+），陽性細胞數10%～50%（++），陽性細胞＞50%（+++）。（-）視為陰性，（+）至（+++）視為陽性。

1.4統計學處理：應用SPSS19.0統計學軟件處理，計數資料采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2　結 果

2.1EGFR與VEGF、P-gp蛋白在老年人結直腸腺癌組織中的表達：79例腺癌組織中EGFR與VEGF、P-gp蛋白陽性表達率分別為64.6%、51.9%、63.3%。EGFR、VEGF和P-gp蛋白表達陽性均為癌細胞質和細胞膜，呈棕黃色（圖1～3）。

2.2結直腸癌中EGFR與VEGF、P-gp蛋白表達的臨床病理關系，見表1。

2.3結直腸癌中EGFR與VEGF、P-gp蛋白陽性表達的關系，見表2。

2.4結直腸癌中VEGF和P-gp蛋白陽性表達的關系，見表3。

表2　EGFR與VEGF、P-gp蛋白陽性表達之間的關系

表3　VEGF與P-gp陽性表達之間關系

3　討 論

圖1　EGFR癌細胞胞質及胞膜陽性表達

圖2　VEGF癌細胞胞質及胞膜陽性表達

圖3　P-gp癌細胞胞質及胞膜陽性表達

表1　EGFR、VEGF與P-gp蛋白的表達與結直腸癌病理參數之間的關系

EGFR屬于酪氨酸激酶I型受體家族，能與EGF及TGF-α有效地結合或自身激活，進而參與激活重要的細胞信號通路，介導細胞分化、侵襲、黏附和細胞損傷的修復等［5-6］。本研究顯示EGFR在老年人結直腸腺癌組織中陽性表達率為64.6%，其表達率與腫瘤分化程度的降低、浸潤深度的加深、出現淋巴結轉移及Duck分期有明顯統計學意義（P＜0.05）。因此，采用有效的分子靶向藥物可以抑制結直腸腺癌的增殖、侵襲和轉移。臨床資料表明EGFR抑制劑（如西妥昔）單抗抗腫瘤藥物可以結合腫瘤細胞EGFR位點，抑制腫瘤細胞增殖旁路，抑制腫瘤生長并促使其凋亡。

VEGF是血管內皮細胞特異性的肝素結合生長因子，是目前發現作用最強的一種促血管生成因子，廣泛分布于體內各器官［7］。因此，VEGF是腫瘤研究的一個熱點［8］，VEGF-C表達下調或VEGF/VEGFR2通路下調可減慢腫瘤生長，抑制腫瘤轉移，并指出結腸癌中卡培他濱的抗瘤效應正是與其下調VEGF表達抑制血管生成作用密切相關［9-10］。本組結果顯示，VEGF蛋白與與腫瘤分化程度的降低、浸潤深度的加深、出現淋巴結轉移及Duck分期有明顯統計學意義（P＜0.05），說明VEGF與結直腸癌的發生有關。

P-gp是由多耐藥基因MDR1編碼的一種跨膜糖蛋白，利用ATP水解釋放的能量主動將化療藥物轉運至細胞外，導致細胞內藥物濃度低于殺傷濃度，從而使腫瘤產生多藥耐藥［10］。P-gp蛋白的表達水平與細胞的膜通透性、細胞內藥物的濃度以及細胞的耐藥程度有關。本組結果顯示，P-gp蛋白與腫瘤分化程度的降低、浸潤深度的加深、出現淋巴結轉移及Duck分期有明顯統計學意義（P＜0.05）。

綜上所述，結直腸腺癌的發生發展是多基因共同參與的復雜過程。本研究表明，EGFR、VEGF和P-gp三者之間并無明顯的內在關聯（P＞0.05），聯合檢測在結直腸腺癌組織中的表達有助于分子靶向藥物的選擇，減少不良反應，提高患者的生活質量。為結直腸癌的治療提供更科學、更合理、更個體化的治療方案。

［1］Sawyers C.Targeted cancer therapy［J］.Nature，2004，432（7015）：294-297.

［2］Tamas P.Mechanism of epidermal growth factor regulation of Vav2，a guanine nucleotide exchange factor for Rac［J］.Biol chem，2003，278（7）：5163-5171.

［3］趙芳芳.VEGF-C FLt4和結核菌L型感染在前列腺癌中的表達及臨床意義［J］.中國微生態學雜志，2010，22（3）：257-260.

［4］劉俊.HIF-la、P-gP在胰腺癌中的表達及其臨床病理學的意義［J］.中華肝膽外科雜志，2011，（17）：36-38.

［5］Rocha-Lina CM.EGFR targeting of solid tumors［J］.Cancer Control，2007，14（3）：295-304.

［6］Ciardiello F，Tortora G. EGFR antagonists in cancer treatment［J］. N Engl J Med，2008，358（11）：1660-74.

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［8］Ahluwalia A.Aberrant，ectopic expression of VEGF and VEGF receptors 1 and 2 in malignant colonic epithelial cells.Implications for these cells growth via an autocrine mechanism［J］.Biochem Biophys Res Commun，2013，437（4）：515-520.

［9］Khromova N.Downregulation of VEGF-C expression in lung and colon cancer cells decelerates tumor growth and inhibits metastasis via multiple mechanisms［J］.Oncogene，2012，31（11）：1389-1397.

［10］Wang KL，Li LP，Jing CP.Research progress of multidrug resistance reversal in colorectal cancer［J］.Chin J Curr Adv Gen Surg，2010，13（4）：306-310.

The Expression and the Relationship of EGFR，VEGF and P-gp in Colorectal Carcinoma of Elder People

LIU Xiao-bin1，2， ZHENG Yuan-yin1*
（1 Department of Pathology， Affiliated Mindong Hospital of Fujian Medical University， Fu'an 355000， China；2 Department of Elderly Medicine，Affiliated Mindong Hospital of Fujian Medical University， Fu'an 355000， China）

Objective To explore EGFR ，VEGF and P-gp in colorectal carcinoma of elder people and their pathological relationship. Methods Immunohistochemical technique was used in VEGF， EGFR and P-gp joint detection for 79 cases of colorectal carcinoma biopsy. The result was statistically analyzed. Results Statistical analysis showed that VEGF， EGFR and P-gp protein expression was related to colorectal carcinoma tissue differentiation， depth of invasion， with or without tumor thrombus， lymph node metastasis， and Duck stage（P＜0.05）. EGFR expression wasn't related to VEGF or P-gp expression，and VEGF expression wasn't related to P-gp expression（P＞0.05）. Conclusions VEGF， EGFR and P-gp expression results in colorectal carcinoma show the existence of multi-gene expression， and these genes may be involved in the occurrence and development of colorectal carcinoma. The joint detection is helpful in determining the biological behavior and prognosis of colorectal carcinoma.

Colorectal carcinoma； Elder people； EGFR； VEGF； P-gp

R735.3

B

1671-8194（2015）28-0001-03

2014年寧德市科技計劃項目（20140018）

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