用GC法測定一品康牌珍美軟膠囊中天然維生素E的含量

2015-10-24 02:29:21秦迎春

中國醫(yī)藥指南 2015年13期

秦迎春

（湖南省張家界市食品藥品檢驗所，湖南張家界 427000）

秦迎春

（湖南省張家界市食品藥品檢驗所，湖南張家界 427000）

旨在用建立氣相色譜法檢測一品康牌珍美軟膠囊中天然維生素E的含量。本品原標準采用HPLC法測定產品中天然維生素E的含量。樣品需要經皂化提取處理一系列操作后，再進行測定。本文為簡化操作、減少復雜操作過各程對檢驗結果的影響，將原標準中的HPLC改為GC法，經方法學研究，維生素E的線性范圍0.781208～3.840072 mg/mL，精密度的RSD=0.61%，加樣回收率為97.34%，結果表明該法簡便、結果準確、精密度良好，可作為該產品中天然維生素E的含量測定法，進行質量控制。

氣相色譜法；天然維生素E；一品康牌珍美軟膠囊；含量測定

一品康牌珍美軟膠囊是G保健食品，配方中含有天然維生素E為其標志性成分，維生素E是一類具有生育酚結構化合物的總稱［1-2］，該類化合物一類良好的抗氧劑，天然維生素E的生物活性及安全性較合成品高，而其中生物活性最高的是d-α-生育酚，具有祛黃褐斑的功效［3-4］。為實現(xiàn)產品質量控制，本文建立了用GC法測定天然維生素E的含量。通過多次試驗，結果證明該法簡便、快速，測定結果準確可靠。

1 儀器與試樣

1.1 儀器：GC-2010氣相色譜儀、FID檢測器（日本島津）、AOC-5000自動進樣器、GCSoltuion色譜工作站、AUW220D電子分析天平。

1.2 試劑及試樣：正已烷（色譜純，天津化學試劑研究院）；一品康牌珍美軟膠囊（廣東長興科技保健品有限公司，批號：20130601）；維生素E對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號：100062-201110）；三十二烷（Standard for GC≥98.6%；Aladdin industral corporation；Lot#1325045）。

2 方法與結果

2.1 方法的建立

2.1.1 色譜條件及系統(tǒng)適用實驗。色譜柱：HP-1毛細管柱（30 m× 0.320 mm×0.25 μm，Agilent Technologies），柱溫：265 ℃，進樣口溫度290 ℃，F(xiàn)IP為檢測器，檢測器溫度300 ℃，分流進樣，進樣比45∶1。維生素E峰與內標物三十二烷峰的分離度＞1.5。

2.1.2 校正因子測定：取內標物三十二烷約0.2 g，精密稱定，置200 mL棕色容量瓶中，加正已烷適量使溶解，再加正已烷稀釋至刻度，搖勻，即得。另取對照品維生素E約20 mg，精密稱定，置20 mL棕色量瓶中，精密加入內標溶液“mL”的棕色量瓶中，精密，搖勻，即得。取樣1 μL注入氣相色譜儀，測定，計算校正因子。

2.1.3 測定法：取樣品10粒的內容物，攪勻，適量精密稱定，置20 mL棕色量瓶中，精密加入內標溶液10 mL，充分振搖，使維生素E溶解，用膜孔為0.45 μm的有機濾膜過濾，取續(xù)濾液，即得。吸取續(xù)濾液1 μL注入氣相色譜儀，測定，即得。

2.2 試液制備。①內標溶液的制備：精密稱取三十二烷0.4790 g，置500 mL棕色容量瓶中，加正已烷適量使溶解，再加正已烷置刻度，搖勻，即得。②對照品溶液的制備和校正因子的測定：精密稱取對照品兩份［對照品1：0.01925 g；對照品2：0.01917（對照品的純度為98.6%）］，置20 mL棕色容量瓶中，分別精密加入內標溶液10 mL，搖勻。吸取1 μL注入氣相色譜儀，計算校正因子1與校正因子2，并求平均校正因子（即校正因子）。③供試品溶液的制備：取供試品10粒的內容物，攪勻，精密稱定，置20 mL的棕色容量瓶中，精密加入內標溶液10 mL，充分振搖使維生素E溶解。取樣品溶液經有機濾膜（膜孔0.45 μm）過濾，取續(xù)濾液置棕色進樣瓶中。

2.3 樣品含量測定：取樣品兩份（因抽樣受限，只做了一批試樣。批號：20130601），按供試品溶液制備方法制成供試液，精密吸取供試液1 μL，注入氣相色譜儀，測定維生素E與內標物的峰面積，根據色譜結果，按內標法計算含量。結果見表1。

表1 樣品含量測定結果

2.4 線性關系考查：精密稱取對照品0.07932 g（純度98.6%），置25 mL棕色容量瓶中，精密加入內標物溶液10 mL，搖勻，作為對照品貯備溶液。精密量取對照品溶液1、2、2.5、3、3.5、5 mL置10 mL棕色容量瓶中，再分別加入內標溶液，使最終體積成5 mL，搖勻。進樣1 μL測定，記錄色譜。根據測定結果，以維生素E的峰面積與內標物峰面積的比值作為縱坐標Y，以對照品溶液的濃度作為橫坐標X，繪制標準曲線。得線性方程Y=0.9759X+0.0288，r=0.9999，線性范圍0.781208～3.840072 mg/mL，標準曲線圖見圖1。

圖1 標準曲線圖

2.5 精密度試驗：精密稱取對照品0.01875 g（純度為98.6%），置20 mL棕色容量瓶中，分別精密加入內標溶液10 mL，搖勻。吸取1 μL注入氣相色譜儀，重復測定6次，按測定結果計算維生素E對照品峰面積與內標物面積的比值。計算結果的RSD=0.62%（n=6），表明儀器精密度良好。如果見表2。

表2 精密度試驗結果

2.6 重復性試驗：精密稱取供試品0.2801 g，置20 mL棕色容量瓶中，精密加入內標物溶液10 mL，充分振搖，使溶解。溶液經膜孔為0.45 μm有機濾膜過濾，取續(xù)濾液至棕色進樣瓶。精密吸取1 μL，注入氣相色譜儀，重復運行6次，測定維生素E含量。結果RSD=0.61%，表明方法精密度高，重現(xiàn)性良好。結果見表3。

表3 重復性試驗結果

2.7 穩(wěn)定性試驗：取圖5供試品溶液，按含量測定的色譜條件，分別在0、2、24 h時，進樣1 μL，測定維生素E峰面積與內標物峰面積，計算峰面積比值。結果RSD=0.33%（n=3），結果表明供試品在24 h內基本穩(wěn)定。見表4。

表4 穩(wěn)定性試驗結果

2.8 加樣回收試驗：精密稱取對照品0.04353 g（純度98.6%），置50 mL棕色容量瓶中，精密加入內標物溶液25 mL，搖勻，作為對照品貯備液。取20 mL的棕色容量瓶3個，分別編為1、2、3號。再取已知含量的樣品10粒的內容物，攪勻，精密稱取3份，分置3個編號的棕色量瓶中，再精密量取對照品貯備液3 mL、5 mL、7 mL依次加入已稱取樣品上述編號的1、2、3號容量瓶中，再加入內標液，使最終體積為10 mL，充分振搖，將溶液經有機濾膜（膜孔0.45 μm）過濾，取續(xù)濾液置棕色進樣瓶中。精密進樣1 μL進行測定，每一濃度重復運行3次。以維生素E與內標物峰面積的比值，用圖4的曲線方程測定維生素E的濃度，根據濃度算出含量及回收率，并求RSD值，結果見表5。