高效液相色譜法測(cè)定復(fù)方氟麻滴鼻液3組分含量

楊躍龍，王寧，粟艷飛

（湖南省懷化市食品藥品檢驗(yàn)所，湖南懷化418000）

高效液相色譜法測(cè)定復(fù)方氟麻滴鼻液3組分含量

楊躍龍，王寧，粟艷飛

（湖南省懷化市食品藥品檢驗(yàn)所，湖南懷化418000）

目的建立測(cè)定復(fù)方氟麻滴鼻液中鹽酸麻黃堿、氧氟沙星、地塞米松磷酸酯含量的高效液相色譜法。方法色譜柱為Shim-pack C18柱（250 mm×4.6mm，5μm），流動(dòng)相為甲醇-10 g/L乙酸銨溶液（磷酸調(diào)節(jié)pH至6.0，52∶48），流速為1.0 mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為256 nm，柱溫為30℃，進(jìn)樣量為10μL。結(jié)果該方法不受處方中輔料的干擾；鹽酸麻黃堿、氧氟沙星、地塞米松磷酸酯的進(jìn)樣量線性范圍分別為0.363 2～10.896 0μg（r=0.999 6，n=9），0.269 0～8.070 8μg（r=0.999 5，n=9），0.046 5～1.395 6μg（r=0.999 9，n=9），平均回收率分別為98.80%，99.28%，99.36%，RSD分別為1.82%，2.14%，1.18%（n=9）。結(jié)論該方法操作簡(jiǎn)便、靈敏度高、重復(fù)性好，可用于復(fù)方氟麻滴鼻液中鹽酸麻黃堿、氧氟沙星、地塞米松磷酸酯的含量測(cè)定。

高效液相色譜法；復(fù)方氟麻滴鼻液；鹽酸麻黃堿；氧氟沙星；地塞米松磷酸酯

復(fù)方氟麻滴鼻液是療效優(yōu)良的醫(yī)院制劑，主要成分為鹽酸麻黃堿、氧氟沙星、地塞米松磷酸酯，具有消炎、止癢功效，用于治療急、慢性鼻炎與鼻竇炎。原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)較簡(jiǎn)單，無(wú)法控制藥品質(zhì)量。為了有效控制本品質(zhì)量，本試驗(yàn)中參考文獻(xiàn)［1-6］，用高效液相色譜（HPLC）法同時(shí)測(cè)定復(fù)方氟麻滴鼻液中3組分的含量，現(xiàn)報(bào)道如下。

1　儀器與試藥

LC-10AT型系列高效液相色譜儀（日本島津公司）；AB135-S型電子分析天平（梅特勒-托利多公司）。鹽酸麻黃堿對(duì)照品（批號(hào)為171241-201007），氧氟沙星對(duì)照品（批號(hào)為130454-200403，含量為98.4%），地塞米松磷酸酯對(duì)照品（批號(hào)為100016-201015），均由中國(guó)食品藥品檢驗(yàn)所提供，供含量測(cè)定用；復(fù)方氟麻滴鼻液（湖南省辰溪人民醫(yī)院，批號(hào)分別為20130424，20130825，20130924）；甲醇為色譜純，其他試劑均為分析純。

2　方法與結(jié)果

2.1色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

色譜柱：Shim-pack C18柱（250 mm×4.6 mm，5μm）；進(jìn)樣量：10μL；柱溫：室溫；檢測(cè)波長(zhǎng)：256 nm；流速：1.0mL/min；流動(dòng)相：10 g/L乙酸銨溶液（用磷酸調(diào)節(jié)pH至6.0）-甲醇（48∶52）。在此條件下，色譜圖見圖1。

2.2溶液制備

精密量取本品2mL，置25mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。取氧氟沙星對(duì)照品、鹽酸麻黃堿對(duì)照品各20 mg，精密稱定，置25mL容量瓶中，加水適量，溶解；取地塞米松磷酸酯對(duì)照品約10mg，精密稱定，置50mL容量瓶中，用水稀釋至刻度；精密吸取地塞米松磷酸酯對(duì)照品溶液10mL，置上述25mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得對(duì)照品溶液。按處方工藝制備不含氧氟沙星、鹽酸麻黃堿和地塞米松磷酸酯的陰性樣品，按供試品溶液制備方法制成陰性對(duì)照品溶液。

2.3方法學(xué)考察

線性關(guān)系考察：取混合對(duì)照品溶液，分別進(jìn)樣1.0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0，15.0，20.0，30.0μL，依法測(cè)定。以進(jìn)樣量X（μg）為橫坐標(biāo)、峰面積（Y）為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸。得回歸方程氧氟沙星為Y=1 726 188.483 3X-87 795.925 2，r=0.999 5（n=9）；鹽酸麻黃堿Y=38 369X+2 304.7，r=0.999 6（n=9）；地塞米松磷酸酯為Y=997 025X+730.68，r=0.999 9（n=9）。結(jié)果表明，氧氟沙星、鹽酸麻黃堿、地塞米松磷酸酯進(jìn)樣量線性范圍分別為0.269 0～8.0708μg，0.3632～10.896 0μg，0.046 5～1.3956μg。

穩(wěn)定性試驗(yàn)：取同一供試品溶液，分別于0，2，6，8，12，24 h時(shí)進(jìn)樣測(cè)定。結(jié)果氧氟沙星、鹽酸麻黃堿、地塞米松磷酸酯的RSD分別為0.07%，0.85%，1.20%（n=6），表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

精密度試驗(yàn)：精密吸取同一混合對(duì)照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄峰面積。結(jié)果氧氟沙星、鹽酸麻黃堿、地塞米松磷酸酯峰面積的RSD分別為1.30%，0.78%，1.30%（n=6），表明儀器精密度良好。

圖1　高效液相色譜圖

重復(fù)性試驗(yàn)：取同一批樣品（批號(hào)為20130424），依法平行制備6份供試品溶液，進(jìn)樣測(cè)定含量。結(jié)果氧氟沙星、鹽酸麻黃堿、地塞米松磷酸酯含量的RSD分別為0.07%，0.85%，1.20%（n=6），表明該方法重復(fù)性良好。

加樣回收試驗(yàn)：分別精密量取0.535 4，0.7976，0.007 952g/L的氧氟沙星、鹽酸麻黃堿、地塞米松磷酸酯對(duì)照品混合對(duì)照液8，10，12mL置25mL容量瓶中。取已知含量的樣品1mL（含氧氟沙星、鹽酸麻黃堿、地塞米松磷酸酯分別為4.98，9.8，0.071825g/L），加水稀釋至刻度，平行制備9份溶液。按擬訂色譜條件，依法進(jìn)樣，測(cè)定，計(jì)算回收率。結(jié)果見表1。

2.4樣品含量測(cè)定

取2批樣品，按2.2項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按擬訂色譜條件分別進(jìn)樣測(cè)定。結(jié)果見表2。

3　討論

制劑中各組分紫外吸收性能相差較大，氧氟沙星吸收最強(qiáng)，鹽酸麻黃堿最弱。氧氟沙星和地塞米松磷酸酯分別在294 nm和242 nm波長(zhǎng)處有最大吸收；另用分光光度計(jì)掃描，麻黃堿在256 nm波長(zhǎng)處有最大吸收，且不易受溶劑峰干擾。故選256 nm波長(zhǎng)作為3組分的檢測(cè)波長(zhǎng)，以提高靈敏度。

表1　加樣回收試驗(yàn)結(jié)果（n=9）

表2　樣品含量測(cè)定結(jié)果

曾用0.05 mol/L磷酸二氫鉀-甲醇（45∶55，pH=4.0）［7］和10 g/L乙酸銨溶液［（用磷酸調(diào)節(jié)pH至（6.0±0.05）］-甲醇（48∶52）［8］作為流動(dòng)相進(jìn)行試驗(yàn)。結(jié)果用后者作為流動(dòng)相，在256 nm波長(zhǎng)處鹽酸麻黃堿有最大吸收，且鹽酸麻黃堿色譜峰與氧氟沙星及地塞米松磷酸酯的色譜峰分離良好，峰形較對(duì)稱且尖銳，陰性樣品無(wú)干擾。

用HPLC法測(cè)定復(fù)方氟麻滴鼻液中氧氟沙星、鹽酸麻黃堿、地塞米松磷酸酯的含量，準(zhǔn)確性高，重復(fù)性好，且操作簡(jiǎn)便快速，可用于測(cè)定復(fù)方氟麻滴鼻液的質(zhì)量控制。

［1］田曉東，顧利紅.復(fù)方氧氟沙星滴鼻液的制備及臨床應(yīng)用［J］.海峽藥學(xué)，2000，12（1）：12-14.

［2］呂琳，朱宇明，韓冬，等.感冒軟膠囊中鹽酸麻黃堿的含量測(cè)定［J］.長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2005，21（3）：38.

［3］田靜，許亞玲，淘金.HPLC測(cè)定小兒化痰止咳顆粒劑中鹽酸麻黃堿的含量［J］.中成藥，2005，27（7）：852-854.

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［5］杜斌，吳春麗，張振中.HPLC法測(cè)定地塞米松磷酸酯注射劑的含量［J］.鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版，2006，41（1）：154-156.

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［8］姚育法，林曉凱，張守堯，等.HPLC法同時(shí)測(cè)定鼻可靈噴霧劑中3組分的含量［J］.中國(guó)藥房，2007，18（34）：2 700-2 701.

Determ ination of Ephedrine Hydrochloride，Ofloxacin and Dexamethasone Phosphate Contents in Com pound O floxacin Ephedrine Nasal Drops by HPLC

Yang Yuelong，Wang Ning，Su Yanfei
（Huaihua Municipal Institute for Food and Drug Control，Huaihua，Hunan，China 418000）

Objective To establish an HPLC method for determining the ephedrine hydrochloride，ofloxacin and dexamethasone phosphate contents in Compound Ofloxacin Ephedrine Nasal Drops.M ethods The chromatographic column was Shim-pack C18column（250 mm× 4.6 mm，5μm），the mobile phase was composed of methanol-10 g/L ammonium acetate（adjusting to pH 6.0 with phosphoric acid，52∶48）；the flow rate was 1.0 mL/min；the detection wavelength was 256 nm；the column temperature was 30℃and the injection volume was 10μL.Results This method was not interfered by the auxiliary materials in prescription.The linear ranges of ephedrine hydrochloride，ofloxacin and dexamethasone phosphate were 0.363 2-10.896 0μg（r=0.999 6，n=9），0.269 0-8.070 8μg（r= 0.999 5，n=9）and 0.046 5-1.395 6μg（r=0.999 9，n=9）respectively，their average recovery rates were 98.80%，99.28%and 99.36%，RSD were 1.82%，2.14%and 1.18%（n=9）respectively.Conclusion The method is simple and accurate with high sensitivity and good repeatability，and can be used for the determination of ephedrine hydrochloride，ofloxacin and dexamethasone phosphate contents in Compound Ofloxacin Ephedrine Nasal Drops.

HPLC；Compound Ofloxacin Ephedrine Nasal Drops；ephedrine hydrochloride；ofloxacin；dexamethasone phosphate

R927.2；R987

A

1006-4931（2015）16-0095-03

2014-05-28；

2015-01-04）