分散固相萃取—?dú)庀嗌V法測(cè)定水果中的六六六農(nóng)藥殘留研究

摘要[目的]建立采用多壁碳納米管（MWCNTs）和乙二胺-N-丙基硅烷（PSA） 為吸附劑的分散固相萃取 （dSPE）凈化、氣相色譜測(cè)定水果中六六六殘留量的方法。[方法]水果樣品用乙腈提取，再加入 NaCl 和無(wú)水 MgSO4液液分離，然后在樣品提取液中加入無(wú)水 MgSO4、PSA和多壁碳納米管進(jìn)行分散固相凈化。[結(jié)果]所測(cè)定的4種六六六的質(zhì)量濃度在0.005～0.200 mg/L范圍內(nèi)與其峰面積比呈線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)（R2）均大于0.998 8，方法對(duì)所測(cè)定的9種物質(zhì)的檢出限均小于1.000 mg/L，樣品加標(biāo)回收率為80%～110%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（n=6）為2.42%～5.99%。[結(jié)論]該方法有較好的靈敏度，能夠滿足樣品測(cè)定的要求。

關(guān)鍵詞分散固相萃?。涣欢啾谔技{米管

中圖分類號(hào)S481+.8文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼

A文章編號(hào)0517-6611（2015）05-199-02

基金項(xiàng)目新疆自治區(qū)公益性科研院所基本科研業(yè)務(wù)資助項(xiàng)目。

作者簡(jiǎn)介朱然（1986- ），女，山東單縣人，助理研究員，碩士，從事色譜分析研究。

收稿日期2014-12-22

六六六（BHC）即六氯環(huán)己烷，曾是廣泛使用和生產(chǎn)的有機(jī)氯類農(nóng)藥，具有穩(wěn)定性強(qiáng)、不易分解的特點(diǎn)，大量使用除了會(huì)直接對(duì)農(nóng)作物造成污染外，還具有高度持久性和生物蓄積性的特點(diǎn)。雖然我國(guó)已經(jīng)禁止使用，但長(zhǎng)期使用后它們可以通過(guò)長(zhǎng)期的生物富集依然能夠?qū)θ梭w健康和生態(tài)環(huán)境造成不利影響[1]。國(guó)標(biāo)中規(guī)定六六六農(nóng)藥的殘留限量為再殘留限量[2]。再殘留限量是指一些持久性農(nóng)藥雖已禁用，但還長(zhǎng)期存在環(huán)境中，從而再次在食品中形成殘留，為控制該類農(nóng)藥殘留物對(duì)食品的污染而制定的其在食品中的殘留限量即為再殘留限量。

水果中本身含有糖類、氨基酸、蛋白質(zhì)、色素、維生素、有機(jī)酸、無(wú)機(jī)鹽等復(fù)雜的化學(xué)成分，對(duì)農(nóng)藥殘留量的測(cè)定產(chǎn)生嚴(yán)重干擾。近年來(lái)，QuEChERS方法[3]以其準(zhǔn)確、快速、簡(jiǎn)便、成本低廉的優(yōu)點(diǎn)，迅速成為農(nóng)藥多殘留的高效分析方法。目前，該方法已成為歐洲標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)認(rèn)可的試驗(yàn)方法。該方法在實(shí)際應(yīng)用中經(jīng)過(guò)不斷改良，主要用于各類食品、蔬菜、水果等樣品的前處理。碳納米管由于其具有納米級(jí)別的中空管狀結(jié)構(gòu)、大的比表面積、某些表面功能團(tuán)和疏水的表面能強(qiáng)烈吸附某些重金屬離子和有機(jī)化合物，而成為一種新的固相萃取吸附劑廣泛應(yīng)用于分析領(lǐng)域[4-5]。近年來(lái)碳納米管材料作為固相萃取填料在農(nóng)獸藥殘留分析中有一定的應(yīng)用[6-8]，但作為分散固相萃取劑的應(yīng)用較少。為此，筆者通過(guò)對(duì)QuEChERS方法的改良和氣相色譜電子捕獲檢測(cè)器建立了一種水果中六六六的殘留量分析檢測(cè)方法，以期為水果中六六六殘留檢測(cè)提供借鑒。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1儀器。

美國(guó)Thermo Trace 1300氣相色譜儀（配有電子捕獲檢測(cè)器ECD）；超聲波清洗器；熱電低溫高速離心機(jī)；渦旋混勻器。

1.1.2試劑。α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC 4種標(biāo)準(zhǔn)品均購(gòu)自農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測(cè)所。乙腈、丙酮、正己烷、乙酸乙酯均為色譜純，無(wú)水硫酸鎂（650 ℃灼燒4 h）。PSA和多壁碳納米管均購(gòu)自天津艾杰爾公司。氮?dú)猓杭兌取?9.999%。

1.2方法

1.2.1標(biāo)準(zhǔn)溶液配制。分別移取4種六六六標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液 100 μl至10 ml 容量瓶中，乙腈定容，配成 10 mg/L 混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。用空白樣品提取液配成不同濃度的基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，用于求取標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配?？瞻讟悠窞榱礄z出的水果樣品。

1.2.2氣相色譜條件。

色譜柱：美國(guó)Thermo TR-5毛細(xì)管柱（30.0 m×0.32 mm，0.25 μm）。程序升溫：100 ℃保持1 min，以10 ℃/min的速率升溫至150 ℃，保持1 min；以5 ℃/min的速率升溫至270 ℃，保持5 min；以280 ℃后運(yùn)行2 min。進(jìn)樣口溫度：230 ℃，進(jìn)樣量：1 μl。氮?dú)饬髁浚?.2 ml/min。ECD檢測(cè)器溫度：320 ℃。

1.2.3樣品處理。

1.2.3.1提取。稱取新鮮水果樣品約10 g（精確到0.000 1 g）置于50 ml離心管中，加20 ml乙腈，超聲提取0.5 h。加入5 g固體NaCl，離心分層。

1.2.3.2凈化。取上清液 2 ml 于已加入 400 mg 無(wú)水 MgSO4、50 mg PSA和 60 mg多壁碳納米管的離心管中，渦旋2 min，以10 000 r/min 離心5 min；取上清液過(guò)0.22 μm 有機(jī)濾膜；取濾液于進(jìn)樣小瓶中，待測(cè)。

2結(jié)果與分析

2.1色譜行為六六六的標(biāo)準(zhǔn)色譜見圖1。

2.2提取溶劑的選擇

水果基質(zhì)復(fù)雜，試驗(yàn)選擇乙腈、乙酸乙酯、正己烷、丙酮4種提取劑進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果表明，丙酮、乙酸乙酯對(duì)枸杞中的雜質(zhì)提取較多，在色譜圖上雜質(zhì)峰干擾嚴(yán)重、基線較差，無(wú)法滿足分析檢測(cè)需求；正己烷和乙腈提取的樣品雜質(zhì)較少，但正己烷回收率較差；乙腈極性大、穿透性強(qiáng)，適合多農(nóng)藥殘留的提取。因此，選擇乙腈作為提取劑。

2.3QuEChERS方法的優(yōu)化

對(duì)葡萄等水果樣品的乙腈提取液用多壁碳納米管替代 PSA 進(jìn)行分散固相凈化，其效果優(yōu)于 PSA 凈化的效果（圖2）。對(duì)多壁碳納米管用量進(jìn)行考察，發(fā)現(xiàn)用量為60 mg時(shí)均能得到較好的凈化效果和回收率（圖3）。

PSA有2個(gè)氨基，比NH2柱有更強(qiáng)的離子交換能力，能有效去除有機(jī)酸、金屬離子和酚類等。試驗(yàn)進(jìn)一步研究了50 mg PSA 和60 mg 多壁碳納米管聯(lián)合凈化的效果，結(jié)果表明二者聯(lián)合使用優(yōu)于兩者單獨(dú)使用。故試驗(yàn)最終采用50 mg PSA 和60 mg 多壁碳納米管聯(lián)合凈化的方法處理水果樣品。

2.4工作曲線、線性范圍與檢出限

用空白樣品提取液配成不同濃度的基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，用于作標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，按“1.2.2”氣相色譜條件對(duì)4種農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)溶液系列進(jìn)行測(cè)定，4種農(nóng)藥的質(zhì)量濃度在一定范圍內(nèi)與其峰面積比成線性關(guān)系，線性回歸方程、相關(guān)系數(shù)（n=6）、線性范圍、檢出限結(jié)果見表1。

2.5方法的回收率

將3個(gè)不同質(zhì)量濃度水平的標(biāo)樣添加到空白樣品中（n=6），進(jìn)行樣品前處理和氣相色譜分析，測(cè)定添加回收率。由表2可知，回收率在80%～110%，平均回收率大于89%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）小于6%，說(shuō)明該方法準(zhǔn)確可靠。

2.6實(shí)際樣品檢測(cè)

采用該研究所建立的方法對(duì)從市場(chǎng)上采購(gòu)的葡萄、蘋果、梨、桃、杏、柑橘等水果進(jìn)行了分析檢測(cè)，方法適用于大多數(shù)水果的分析，可應(yīng)用于實(shí)際的監(jiān)測(cè)分析。

3結(jié)論

通過(guò)對(duì)QuEChERS方法的改良，以多壁碳納米管和 PSA 混合使用進(jìn)行樣品凈化，能有效去除水果中的基質(zhì)干擾物，

提高了六六六提取效率和檢測(cè)靈敏度，建立了一個(gè)便捷的凈化處理方法，采用氣相色譜電子捕獲檢測(cè)器測(cè)定，取得了較好的效果，實(shí)現(xiàn)了水果中六六六的殘留量分析檢測(cè)。方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，可用于實(shí)際樣品分析。

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責(zé)任編輯張彩麗責(zé)任校對(duì)李巖