4種生物藥劑對藍莓櫟黃枯葉蛾幼蟲的室內毒力研究

[目的]尋找高效、低毒和安全的櫟黃枯葉蛾的生物防治藥劑。[方法]測定4種生物藥劑對櫟黃枯葉蛾幼蟲的室內毒力。[結果]經過4種藥劑的20個處理后，藥后14 d校正死亡率達到50%以上的有0.020 00 g/ml球孢白僵菌（78.48%）、0.020 00 g/ml綠僵菌（72.53%）、0.010 00 g/ml球孢白僵菌（60.24%）、0.004 00 g/ml藜蘆堿（58.74%）、0.010 00 g/ml綠僵菌（53.27%）和0.002 00 g/ml藜蘆堿（50.36%）。4種藥劑的毒力效果強弱依次為藜蘆堿、棉鈴蟲核型多角體病毒、綠僵菌、球孢白僵菌。[結論]試驗結果為櫟黃枯葉蛾的田間防治提供了參考。

關鍵詞櫟黃枯葉蛾；生物藥劑；毒力測定

中圖分類號S433.4文獻標識碼

A文章編號0517-6611（2015）05-144-02

基金項目貴州省農業攻關項目[黔科合NY（2013）3046號]。

作者簡介黃勝先（1984- ），男，貴州凱里人，農藝師，碩士，從事農業昆蟲與害蟲防治研究。*通訊作者，農藝師， 從事植物學研究。

收稿日期2014-12-29

2001年在南京植物研究所的技術支持下，貴州省黔東南州麻江縣利用獨特的氣候資源，發展山區農村經濟，改善荒山生態環境，在該地區建立了8 hm2土眼藍莓基地[1]。目前，黔東南州藍莓栽培已有14年，并成為貴州省藍莓主要產區，其中麻江縣種植區域已被認證為有機藍莓種植基地。隨著黔東南州藍莓產業的不斷發展，于2013年先后在藍莓種植地發現櫟黃枯葉蛾（Trabala viahnou gigantina Yang）的幼蟲為害藍莓，櫟黃枯葉蛾又名栗黃枯葉蛾、蓖麻黃枯葉蛾，屬于鱗翅目枯葉蛾科[2-3]，其幼蟲取食藍莓葉片的葉肉，殘留表皮，造成葉片缺刻或孔洞，殘留葉柄，造成樹勢下降，嚴重影響藍莓生產種植。有機藍莓是在“有機農業”規定下生產，拒絕任何人工合成的農藥，生物防治自然承擔了藍莓有機生產過程中病蟲害防治主要任務。為尋找高效、低毒和安全的櫟黃枯葉蛾的生物防治藥劑，筆者研究了4種生物藥劑對其室內毒力，以期為田間防治提供參考。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1供試害蟲。櫟黃枯葉蛾幼蟲通過人工采集方式采集于麻江縣藍莓種植園，飼養于規格為39 cm×32 cm×14 cm的整理盒內，蓋上紗網以防試蟲逃逸。在整理盒中放入新鮮的藍莓樹葉，飼養7 d后進行試驗。

1.1.2供試藥劑。球孢白僵菌（200億cfu/g，江蘇省鹽城市神微生物菌種科技有限公司）、綠僵菌（200億cfu/g，江蘇省鹽城市神微生物菌種科技有限公司）、藜蘆堿（0.5% SL，河北馥稷生物科技有限公司）、棉鈴蟲核型多角體病毒（20億PIB/ml，河南省禹州市百靈生物藥業有限責任公司）。

1.2試驗方法

參考市場藥劑有效成分的配比度， 將4種供試藥劑用適量清水溶解，分別配成系列濃度梯度藥液。參考李飛廣等的試驗方法[4-5]選用櫟黃枯葉蛾2～3齡幼蟲，每處理藥液量取50 ml放入200 ml燒杯中；選擇直徑為6.5 cm的玻璃飼養瓶，瓶底覆蓋2層定性濾紙，底用油性記號筆在瓶底標記試驗代號，用滴管加1 ml純凈水于濾紙上，以保持皿內的濕度；將鮮藍莓嫩葉片用清潔醫用紗布輕輕去除葉片表面的蠟質，置于裝有處理藥劑燒杯中內充分浸潤5 s，每個燒杯內放入20片經處理后的嫩葉片。然后用鑷子將葉片取出放回培養皿，在通風陰涼處放置2～3 h后，最后把葉片放入到玻璃飼養瓶中，并用毛筆每皿接30頭健康櫟黃枯葉蛾幼蟲，在瓶口上蓋罩1層紗網以防幼蟲逃逸。先處理空白對照，然后按試驗設計濃度從低到高的順序重復上述操作，每處理3次重復。調查期間，及時給濾紙加水，保持濕度，并更換新鮮的嫩葉。處理后每隔5 d調查一次，分別記載各處理的死蟲數，活蟲與死蟲的鑒別以觸動蟲體能否正常爬行為準，非正常的即爬行不自然、半死、全死等個體均算為死亡個體。計算櫟黃枯葉蛾幼蟲死亡率、校正死亡率，并通過DPS數據分析軟件計算毒力回歸方程、LC50。

死亡率=死亡蟲數/供試蟲數×100%

校正死亡率=（處理組死亡率-對照組死亡率）/（100-對照組死亡率）×100%

2結果與分析

2.1幾種藥劑對櫟黃枯葉蛾幼蟲感染癥狀

櫟黃枯葉蛾幼蟲被球孢白僵菌和綠僵菌感染后，幼蟲取食減少，蟲體反應遲鈍，蟲體逐漸縮小，出現僵化現象，特色變褐色，幼蟲開始死亡，經25 ℃保濕培養4～7 d后，蟲體長出白色菌絲，繼續保濕培養，蟲體長出白色菌絲，最后蟲體分別被白色和綠色分生孢子覆蓋，分生孢子最后均變成黑褐色；櫟黃枯葉蛾幼蟲被取食經藜蘆堿處理的葉片后，幼蟲取食量減少，幼蟲身體來回翻滾扭曲，反應興奮，最后出現僵化死亡現象；幼蟲被棉鈴蟲核型多角體病毒感染后，蟲體全身僵化而亡。

2.2幾種藥劑對櫟黃枯葉蛾幼蟲校正死亡率的影響

從表1可知，球孢白僵菌、綠僵菌、藜蘆堿和棉鈴蟲核型多角體病毒4種生物藥劑對櫟黃枯葉蛾幼蟲均有一定的殺蟲活性。通過DPS數據庫Duncan新復極差法分析，藥后2 d，0.004 00 g/ml藜蘆堿、0.020 00 g/ml綠僵菌和0.004 00 g/ml棉鈴蟲核型多角體病毒處理對幼蟲的校正死亡率最高，分別為7.12%、7.11%和6.74%，3個處理與其他處理呈極顯著差異；藥后8 d，校正死亡率達到50%以上的僅有0.020 00 g/ml球孢白僵菌，為51.11%，該處理與其他處理呈極顯著差異；藥后14 d，校正死亡率達到50%以上的有0.020 00 g/ml球孢白僵菌、0.020 00 g/ml綠僵菌、0.010 00 g/ml球孢白僵菌、0.004 00 g/ml藜蘆堿、0.010 00 g/ml綠僵菌和0.002 00 g/ml藜蘆堿，其校正死亡率分別為78.48%、72.53%、60.24%、58.74%、53.27%和50.36%。20個處理生物制劑對櫟黃枯葉蛾幼蟲的毒力大小為：0.020 00 g/ml球孢白僵菌>0.02 000 g/ml綠僵菌>0.010 00 g/ml球孢白僵菌>0.004 00 g/ml藜蘆堿>0.010 00 g/ml綠僵菌>0.002 00 g/ml藜蘆堿>0.004 00 g/ml棉鈴蟲核型多角體病毒>0.005 00 g/ml綠僵菌>0.002 00 g/ml棉鈴蟲核型多角體病毒>0.001 00 g/ml藜蘆堿>0.001 00 g/ml棉鈴蟲核型多角體病毒>0.002 50 g/ml綠僵菌>0.005 00 g/ml球孢白僵菌>0.000 50 g/ml藜蘆堿>0.000 50 g/ml棉鈴蟲核型多角體病毒>0.001 25 g/ml綠僵菌>0.002 50 g/ml球孢白僵菌>0.000 25 g/ml藜蘆堿>0.000 25 g/ml棉鈴蟲核型多角體病毒>0.001 25 g/ml球孢白僵菌。

表2表明，4種藥劑的LD50值表現為藜蘆堿（0.002 60 g/ml）﹤棉鈴蟲核型多角體病毒（0.004 60 g/ml） ﹤綠僵菌（0.008 30 g/ml） ﹤球孢白僵菌（0.008 50 g/ml）。其中，球孢白僵菌的LD50值是藜蘆堿的3.3倍。在所選試藥劑中，藜蘆堿對櫟黃枯葉蛾幼蟲的毒力最高，球孢白僵菌和綠僵菌最低。

3結論與討論

試驗結果表明，經過20個藥劑處理，生物藥劑對櫟黃枯葉蛾幼蟲作用緩慢，但作用時間長。藥后14 d的校正死亡率達到50%以上的只有0.020 00 g/ml球孢白僵菌、0.020 00 g/ml綠僵菌、0.010 00 g/ml球孢白僵菌、0.004 00 g/ml藜蘆堿、0.010 00 g/ml綠僵菌和0.002 00 g/ml藜蘆堿，其中最高為0.020 00 g/ml球孢白僵菌（78.48%）和0.020 00 g/ml綠僵菌（72.53%），在藥后2～6 d內0.004 00 g/ml藜蘆堿和0.004 00 g/ml棉鈴蟲核型多角體病毒校正死亡率與其他處理呈顯著差異。可見，藜蘆堿和棉鈴蟲核型多角體病毒在短時間內就可以產生一定的毒力，而球孢白僵菌和綠僵菌可以長時間對害蟲作用。而且同種藥劑不同處理的櫟黃枯葉蛾幼蟲校正死亡率基本隨著藥劑使用量的升高而上升，隨著處理時間的增加，其校正死亡率也上升。

LD50值的大小反映昆蟲對藥劑的敏感程度，LD50值越小，說明昆蟲對藥劑越敏感，即藥劑的毒力越大[5]。該研究表明，4種藥劑的毒力大小表現為藜蘆堿>棉鈴蟲核型多角體病毒>綠僵菌>球孢白僵菌。通過換算，球孢白僵菌、綠僵菌、棉鈴蟲核型多角體病毒和藜蘆堿的LD50值分別為1.7×108cfu/ml、1.66×108cfu/ml、9.2×106 PIB/ml和1.3×10-5 g/ml。由于外界生態系統結構復雜，與室內生態系統存在顯著差異，因而探索適合櫟黃枯葉蛾幼蟲防治的生物藥劑仍需進一步田間防效研究，根據室內毒力測定結果，選擇4種生物藥劑均進行田間藥效試驗。在進行田間噴藥時要注意噴灑均勻才能起到良好效果，宜在害蟲低齡幼蟲期使用，使用時要隨配隨用，配好的農藥要一次用完，而且不能和殺菌劑混用，貯藏的地點要求陰涼、干燥，避免受潮[6-7]。

參考文獻

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[7] 少華. 施用生物農藥有講究[J]. 農村實用技術，2010（10）：52.

責任編輯喬利利責任校對李巖