胰腺局部腎素血管緊張素系統對胰腺炎早期微循環的作用

張勇 李旋 林德新 夏悅明

摘要： 目的：探討血管緊張素II（Angiotensin II ）的AT1受體拮抗劑奧美沙坦酯對大鼠重癥急性胰腺炎（Severe acute pancreatitis SAP）早期局部微循環的作用。方法：30只SD大鼠隨機分為假手術（SO）組、SAP組、奧美沙坦酯組（O組）三組，并分3h兩個時間段觀察取材。觀察胰腺組織病理變化、胰腺組織AngII 的水平、大鼠血清淀粉酶（AMY）。結果： SAP組胰腺組織病理損傷、AngII 的水平、血清MDA和AMY明顯高于其他2組（P<0.05），奧美沙坦酯組這些指標顯著低于SAP組（P<0.05），但均高于SO組（P<0.05）。結論：奧美沙坦酯能阻斷重癥急性胰腺炎微循環RAS，減輕胰腺組織損傷，對胰腺炎具有一定保護作用。

關鍵詞： 奧美沙坦酯；血管緊張素系統；胰腺炎；微循環

中圖分類號 R563.1 文獻標識碼 A

課題來源：福建醫科大學非直屬附屬醫院科學研究專項基金項目（NO：FZS13024Y）

Abstract：Objective ： To investigate the effect of Angiotensin II type 1 （AT1） receptor blocker Olmesartan MedoxomiI in pancreatitis microcirculation of Severe acute pancreatitis（SAP） in rats. Methods： thirty SD rats were randomized into sham operation （SO）group， SAP group and Olmesartan MedoxomiI treated group（O group）.All the animals were sacrificed in3h. The histopathological changes and the level of AngII of pancreatitis tissue ware evaluated. The levels of amylase （AMY）， rnalondialdehyde（ MDA） in serum . Results： The histopathological changes and the level of AngII of pancreatitis tissue ， The levels of amylase （AMY）， rnalondialdehyde（ MDA） in serum in SAP group were significantly increased compared with those in other two groups （P<0.05）. however， the indexes were significantly decreased after for useing Olmesartan MedoxomiI （P< 0.05）， but all were higher than SO group（P<0.05） . Conclusion： Olmesartan MedoxomiI can restrain renin-angiotensin system decrease the produce of the oxygen free radicals ， reducing pancreatitis injury. has a therapeutic effect on SAP.

Keywords ： Olmesartan MedoxomiI； renin-angiotensin system ； Severe acute pancreatitis ； microcirculation

胰腺炎是臨床上常見的危重疾病，病情發展快，病死率高。本實驗探討血管緊張素II（AngII）的AT1受體拮抗劑奧美沙坦酯在大鼠胰腺炎早期局部微循環的影響，以進一步認識SAP的發病機制，并為SAP的治療尋找新的有效靶點。

1.材料與方法

1.1 材料來源 取福建醫大動物實驗中心SPF級SD大鼠75只，體重200g-250g。牛磺膽酸鈉購自美國Sigma公司，AMY、MDA試劑盒AngII購自上海科敏生物科技有限公司，奧美沙坦酯購自上海三共制藥有限公司。

1.2 實驗分組和模型制備

SAP模型：SD大鼠腹腔注射6%的水合氯醛（0.35ml/100g）麻醉，開腹找到胰管，以0.1 ml/min的速度向胰膽管內逆行注入4%?；悄懰徕c（0.1 ml/100g），取胰腺組織病理檢查提示胰腺缺血壞死，即SAP模型建立成功。①假手術組（SO組，10只），腹腔注射6%的水合氯醛（0.35ml/100g）麻醉，開腹后僅翻動胰腺即關腹；②按上述方法制備SAP組；③O組：按上述方法造模前1h將奧美沙坦酯片（8mg/1kg）研粉后經灌胃針灌入SD大鼠胃內。各組動物于術后3h心臟采血，離心（3000轉/min，10min）后分離血清于-20℃保存備用，處死大鼠，取胰腺組織用于光鏡組織病理學檢查。

1.3 標本檢測方法

血管緊張素Ⅱ（AngII）采用酶聯免疫吸附試驗（ELISA） ；AMY采用碘—淀粉比色法；MDA采用硫代巴比妥酸（TBA）法。胰腺組織經4%的多聚甲醛固定24小時，石蠟包埋，HE染色后光鏡下觀察，并根據Schmidt J[1]等評分。

1.4.統計學方法：

應用SPSS 13.0統計軟件分析，數據以均數±標準差表示，各組間比較采用兩獨立樣本配對t檢驗。

2. 結果

3hSAP組AngII水平、血清MDA、AMY及病理損傷明顯高于其他2組（P<0.05），奧美沙坦酯組（O組）這些指標顯著低于SAP組（P<0.05），但均高于SO組（P<0.05）（見表）。

3.討論

大量研究已證實發現腎素血管緊張素系統（RAS）存在于胰腺局部組織。胰腺局部RAS激活，可能在調控胰腺微循環及誘導炎癥反應方面起重要作用[2]。奧美沙坦是AT1受體拮抗劑，主要改善循環及降壓作用，奧美沙坦酯經胃針灌入胃內后，轉化為奧美沙坦，約1.2h血藥濃度達峰，AngⅡ是主要通過其受體AT1受體拮抗劑發揮保護作用 [3]。

本實驗研究發現，SAP組血清淀粉酶、AngII 水平明顯偏高，胰腺組織明顯水腫、出血、壞死及周圍血管浸潤。經奧美沙坦酯干預動物組（O組）胰腺組織病理損傷、淀粉酶及AngII 水平均明顯較SAP組大鼠減輕（P<0.05），有統計學意義。急性胰腺炎發病機制中有一個顯著的共同特征，即存在自由基的作用，MDA為氧自由基產物，在SAP時血清MDA水平明顯升高，經奧美沙坦處理后血清MDA水平較前減少。奧美沙坦能抑制NAD（P）H氧化酶活性，進而減少了氧自由基生成[4]。

綜上所述，在急性胰腺炎發病早期，RAS受體拮抗劑（奧美沙坦）確實起一定的作用，可直接或間接改善胰腺組織局部血供，減少氧自由基、炎癥介質產生等。但隨著胰腺損傷加重，可能RAS的啟動也損害了細胞血供，加重缺血，加重胰腺炎[5]；具體機制和自身調控仍須進一步探明。對上述過程的進一步認識，將有助于我們更全面的了解急性胰腺炎的病理生理機制，為臨床治療該疾病提供一條新思路。

參考文獻：

[1]Schmidt J， Rattner DW， Lewandrowski K， et al. A better model of acute pancreatitis for evaluating therapy [J].Ann Surg，1992， 215（ 1）： 44-56.

[2]Skipworth JR1， Nijmeijer RM， van Santvoort HC， etal .The effect of renin angiotensin system genetic variants in acute pancreatitis[J]. Annals of Surgery，2015，261（1）：180-188.

[3]Vaziri ND1， Bai Y， Ni Z，etal.Intra-renal angiotensin II/AT1 receptor， oxidative stress， inflammation， and progressive injury in renal mass reduction[J].Pharmacol Exp Ther，2007，323（1）：85-93.

[4]Kadowaki D1， Anraku M， Sakaya M， etal.Olmesartan protects endothelial cells against oxidative stress-mediated cellular injury. Clinial and Experimental Nephrology[J]. 2015，23（1）：122-127.

[5]Can B1， Sali M， Batman A， etal. Valsartan-induced acute pancreatitis[J]. Internal Medicine， 2014，53（7）：703-705.