賴娜 王敏 余波 董星杏 王世鳳 胡志敏 林文毅
【摘要】抗酸染色是病理特殊染色的一個(gè)難點(diǎn),染色質(zhì)量的好壞很大程度影響了病理醫(yī)生能否做出正確的病理診斷,從而直接影響了臨床治療效果。為探討如何提高抗酸染色陽(yáng)性率,我們回顧性分析了我院近年來肉芽腫性炎癥抗酸染色切片的結(jié)果,對(duì)抗酸染色技術(shù)進(jìn)行一些改良,提高了抗酸染色的整體陽(yáng)性率,提高了病理診斷的準(zhǔn)確率。
【關(guān)鍵詞】抗酸染色;薄切片;肉芽腫性炎癥
【中圖分類號(hào)】R-1 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B 【文章編號(hào)】1671-8801(2015)04-0207-01
抗酸染色技術(shù)是利用一些細(xì)菌細(xì)胞壁脂質(zhì)含量高,菌體內(nèi)有分枝菌酸,被著色后而不易洗脫的原理來檢測(cè)該類細(xì)菌。抗酸染色陽(yáng)性桿菌涉及諸多菌種,會(huì)導(dǎo)致以肉芽腫形成為主要特征的慢性增生性炎癥,如結(jié)核、麻風(fēng)等,臨床主要用于檢測(cè)以結(jié)核桿菌,臨床上和流行病學(xué)中常用查見抗酸桿菌作為結(jié)核病診斷的依據(jù)[1]。目前抗酸染色是病理特殊染色的一個(gè)難點(diǎn),染色質(zhì)量的好壞很大程度影響了病理醫(yī)生能否做出正確的病理診斷,從而直接影響了臨床治療效果。為我們?cè)诜治隹顾崛旧奶攸c(diǎn)后,對(duì)抗酸染色進(jìn)行了一些改進(jìn),陽(yáng)性率得到了明顯提高,現(xiàn)將我們的做法介紹如下:
1.組織取材,常規(guī)10%福爾馬林液固定、脫水、透明。
2.切片。切1-2μm的薄片,而常規(guī)抗酸染色切片厚度約為4μm。
3.烤片及脫蠟。常規(guī)抗酸染色對(duì)烤片及脫蠟沒有特殊要求,烤片65℃,30分鐘,兩缸生物環(huán)保脫蠟液,各10分鐘。在淋巴結(jié)及乳腺組織抗酸染色中,我們烤片時(shí)間為65℃,2小時(shí),兩缸生物環(huán)保脫蠟溶液脫蠟,各20分鐘,這樣組織切片透明度好,切片不容易脫片。
4.初染 用玻片夾夾持涂片標(biāo)本,滴加石炭酸復(fù)紅2-3滴,在火焰高處徐徐加熱,切勿沸騰,出現(xiàn)蒸汽即暫時(shí)離開,若染液蒸發(fā)減少,應(yīng)再加染液復(fù)染,加熱3-5分鐘,待標(biāo)本冷卻后用水沖洗。
5.脫色3%鹽酸酒精脫色30秒-1分鐘;用水沖洗。
6.復(fù)染用堿性美蘭溶液復(fù)染30秒-1分鐘,水洗,用吸水紙吸干后用鏡下觀察。
討論
抗酸染色是一種組織化學(xué)顯示分枝桿菌的一種常用方法,抗酸染色陽(yáng)性的細(xì)菌,就是分枝桿菌屬的細(xì)菌,包括結(jié)核性分枝桿菌、麻風(fēng)分枝桿菌及非結(jié)核性分枝桿菌,廣泛存在于自然界,如土壤、空氣、動(dòng)物體表及體液中,是條件致病菌。這類分枝桿菌菌體壁上含有不等量的脂質(zhì)(蠟?zāi)ぃ灰字5悄芘c石炭酸堿性品紅染液結(jié)合成復(fù)合物,這種復(fù)合物著染后即可抵抗酸的脫色作用。抗酸染色查找分枝桿菌的陽(yáng)性率普遍偏低,對(duì)臨床的治療幫助不大。我們改良后的抗酸染色切片,組織透明度好,紅色的抗酸桿菌與藍(lán)色的背景對(duì)比明顯,在經(jīng)過三名高年資醫(yī)生仔細(xì)閱片,抗酸染色陽(yáng)性率顯著提高,臨床反饋這些病例在經(jīng)過抗結(jié)核治療后腫塊明顯縮小,為各種肉芽腫性炎癥的治療提供了依據(jù)。因此,規(guī)范操作抗酸染色技術(shù),掌握技術(shù)環(huán)節(jié)重點(diǎn),保證檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確,對(duì)于肉芽腫性炎癥,特別是結(jié)核病的診斷具有重要臨床意義。
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