三種小鼠實驗性高脂血癥模型效果的比較分析

哈建利 張明軍 夏濤

摘 要 目的：篩選出一種理想的小鼠高脂血癥動物模型造模方法。方法：參考相關文獻選取三種小鼠高脂血癥動物模型配方并略作調整，制成乳劑給小鼠灌胃，分別在2w、4w、6w時取尾靜脈血，測定血清中TG、TC、LDL和HDL含量。結果：三種高脂配方均可不同程度地導致小鼠血清中脂代謝紊亂，形成高血脂動物模型。結論：在20%三磷酸甘油酯和10%膽固醇的基礎上加入3%膽酸鈉，灌胃4w就可形成理想的小鼠高脂血癥動物模型。

關鍵詞 高脂血癥 小鼠 模型 分析

中圖分類號：R589 ? 文獻標識碼：A?? DOI：10.16400/j.cnki.kjdkz.2015.09.078

Comparative Analysis of Three Experimental Rats Hyperlipidemia Models

HA Jianli[1]， ZHANG Mingjun[1]， XIA Tao[2]

（[1]Nursing School， Hubei Polytechnic Institute， Xiaogan， Hubei 432000;

[2]Teaching & Research Section of Environmental Hygiene，

Tongji Medical School， Huazhong University of Science & Technology， Wuhan， Hubei 430030）

Abstract Objective： To choose an ideally modeling method of rats hyperlipidemia model. Methods： By referring to relevant documents， choose three experimental rats hyperlipidemia models， make into emulsions to perfuse rats' stomachs， and sample tail vein blood after 2 weeks， 4 weeks and 6 weeks separately， to measure TG， TC， LDL and HDL contents in blood serum. Results： The three models result in rat lipid metabolic disorder in different degrees， to form hyperlipidemia models. Conclusions： By adding 3% sodium cholate liquor into 20% triglycerol phosphate and 10% cholesterol， perfuse rats' stomachs for 4 weeks to form an ideal rats hyperlipidemia model.

Key words Hyperlipidemia; rat; model; analysis

隨著我國經濟的不斷發展，人們生活水平不斷提高，高脂血癥（hyperlipidemia）的發病率在我國已呈逐年上升趨勢。高脂血癥是機體脂代謝紊亂的重要標志，也是動脈粥樣硬化、心臟病、腦血管意外和脂肪肝的主要危害因素之一，①主要表現為血清中甘油三酯（triglyceride，TG）、總膽固醇（total cholesterol，TC）、低密度脂蛋白（low density lipoprotein，LDL）含量增高和高密度脂蛋白（high density lipoprotein，HDL）含量降低。目前尋找安全高效的降血脂藥物已成為廣大醫藥衛生工作者研究的熱點之一，而實驗動物模型是進行上述研究的必備材料。為篩選出效果理想的高脂血癥動物模型造模方法，在前人研究②③④⑤的基礎上，本研究擬用三種不同方法對小鼠進行高脂血癥造模，觀察不同時間小鼠血脂的變化情況，以期篩選出一種既經濟穩定又省時省力的高脂血癥小鼠動物模型的造模方法，為后續研究奠定基礎。

1 材料與方法

1.1 主要試劑與儀器

三磷酸甘油酯、膽固醇、膽酸鈉均為國產試劑（分析純）;甘油三酯、膽固醇和高密度脂蛋白試劑盒由中生北控生物試劑公司提供;AUl000 全自動生化分析儀為OLYMPUS 公司產品。

1.2 實驗動物

昆明種小鼠40只（湖北省實驗動物中心提供），雌雄各半，體重20～25g。

1.3 高脂飼料配方與制備

配方1： 20%三磷酸甘油酯+ 10%膽固醇;配方2：20%三磷酸甘油酯+10%膽固醇+1%膽酸鈉;配方3：20%三磷酸甘油酯+ 10%膽固醇+3%膽酸鈉。分別按上述配方、比例稱取相應的高脂試劑，用約50ml的熱生理鹽水攪拌成懸濁液，并定容至100ml備用。

1.4 動物模型制備

隨機將動物分為4組，分別為對照組、模型1組、模型2組和模型3組。對照組用生理鹽水灌胃，模型1、2、3組分別對應用配方1、配方2和配方3高脂飼料灌胃。各組小鼠均以0.4ml溶液灌胃，每天1次。所有小鼠均自由攝食與飲水，分別于灌胃2周、4周和6周后取尾靜脈血，測定其血清中TG、TC、LDL和HDL含量。

1.5 統計學處理

數據均以 眘 形式表示，用SPSS18.0統計軟件進行單因素方差分析（one-way-ANOVA），組間比較用LSD法。

2 結果

2.1 2周后小鼠血清中各指標變化

與對照組相比，模型1組中LDL含量明顯升高（P<0.05），模型2組TC和LDL含量明顯升高（P<0.01）;模型3組中TG、TC和LDL含量明顯升高（P<0.05或P<0.01）;各模型組中HDL含量與對照組差異無統計學意義（P>0.05）;模型2、3組中TC含量明顯高于模型1組（P<0.05），結果見表1。

2.2 4周后小鼠血清中各指標變化

從表2可以看出，與對照組相比，模型1組中LDL含量明顯升高（P<0.05），模型2組中TG、TC和LDL含量明顯升高（P<0.05或P<0.01），而模型3組不僅TG、TC和LDL含量明顯升高（P<0.05或P<0.01），而且HDL水平則明顯下降（P<0.05）;同時模型2、3組中TC含量明顯高于模型1組（P<0.01）。

2.3 6周后小鼠血清中各指標變化

與對照組相比，模型1組中TG、TC和LDL含量明顯升高（P<0.05或P<0.01）;模型2組中TG、TC和LDL含量也明顯高于對照組（P<0.01）;而模型3組不僅TG、TC和LDL含量明顯高于對照組（P<0.01），而且其HDL水平則明顯低于其他三組（P<0.05或P<0.01），具體結果見表3。

3 討論

高血脂癥動物模型主要來源于先天性、轉基因和化學物質誘導三個方面。前兩種獲取方式因其來源極為有限或價格過于昂貴，故其應用大為受限，而通過化學物質誘導獲得的實驗動物模型目前在國內被廣泛采用。⑥

本研究結果顯示，模型1組小鼠灌胃2w后僅LDL水平升高，模型2組TC和LDL水平明顯升高;而模型3組則是TG、TC和LDL三項指標的水平明顯升高;4w后模型1組依然是僅LDL水平升高，而模型2、3組則是TG、TC和LDL三項指標的水平進一步升高，同時模型3組的HDL水平明顯下降;隨著灌胃時間繼續延長至6w，各模型組的TG、TC和LDL的水平逐漸升高，但除模型3組的HDL水平明顯降低外，其余2個模型組的HDL水平未見明顯降低（P>0.05）。本實驗還發現，在實驗小鼠灌胃2、4W后，模型2、3組的TC含量上升較快，不僅高于對照組，而且還明顯高于模型1組;而灌胃6w后，模型3組的HDL水平下降明顯，已達到明顯低于模型1、2組的水平。綜合來看，模型1、2、3組均出現脂代謝紊亂，能形成高脂血癥，但從4項評價指標是否出現明顯變化及其變化幅度來看，模型3組優于另外2個模型組，這可能與適量的膽酸鈉能有效促進實驗動物吸收甘油三脂和膽固醇，并迅速形成穩定的高脂血癥模型有關。⑦

此外，通過對模型3組灌胃2、4、6w后各指標的變化幅度進行比較，發現2w即能形成高脂血癥模型，但HDL這項指標未見明顯下降;而4w后各項指標均繼續升高或降低，其中HDL含量已明顯低于對照組（P<0.05）;隨著灌胃時間繼續延長至6w，4項指標的變化幅度與第4w相比已無顯現變化，提示按配方3給小鼠灌胃4w即可獲得比較穩定的高脂血癥動物模型。

基金項目：湖北職業技術學院重點項目“魔芋發酵液對實驗性高脂血癥小鼠血脂的影響”（項目編號：2008 A13）的階段性研究成果之一

注釋

① 徐叔云，卞如濂，陳修.藥理實驗方法學（第3版）[M].北京：人民衛生出版社，2001：1201-1206.

② 趙水平，吳潔.非諾貝特對高脂血癥兔血清及脂肪細胞分泌腫瘤壞死因子a的影響[J].中國藥理學通報，2005.21（2）：157-161.

③ 倪鴻昌，李俊，金涌，等.小鼠實驗性高脂血癥和高脂血癥性脂肪肝模型研究[J].中國藥理學通報，2004.20（6）：703-706.

④ 張秋華，孫文靜.益氣活血方對小鼠的調脂作用與NO水平的影響[J].中國實驗方劑學雜志，2003.9（1）：19-21.

⑤ 王志勇，王玲，潘振偉，等.胺碘酮對大鼠心肌梗死后重構心肌細胞鉀電流的作用[J].中國藥理學通報，2005.21（12）：1451-1454.

⑥ 張東，武海軍，陳士萍，等.大鼠實驗性高脂血癥五種造模方法的比較[J].中國藥理學通報，2007.23（9）：1254-1256.

⑦ 張智，閃增郁，向麗華，等.大鼠實驗性高脂血癥兩種造模方法的比較[J].中國中醫基礎醫學雜志，2004.10（2）：33-34，24.