氣相色譜法測定混合型飼料添加劑薄荷素油中薄荷腦含量

林章秀　廈門惠盈動物科技有限公司　福建廈門　361008

氣相色譜法測定混合型飼料添加劑薄荷素油中薄荷腦含量

林章秀廈門惠盈動物科技有限公司福建廈門361008

目的建立氣相色譜測定混合型飼料添加劑薄荷素油中薄荷腦含量的方法。方法樣品采用乙醇提取，以毛細(xì)管色譜柱分離，采用氫火焰離子化檢測器檢測。結(jié)果 薄荷腦在0.0356～1.780 mg/m L范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系，線性方程為Y= 139 286×X-3 452，相關(guān)系數(shù)R為0.9998，方法的定量限（LOQ）為0.1 g/kg。樣品添加回收試驗的平均回收率在98.2.8%～99.2%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為1.06%～1.96%（n=6）。結(jié)論 本方法簡便、快速，結(jié)果準(zhǔn)確、可靠，適用于混合型飼料添加劑薄荷素油中薄荷腦含量的測定。

薄荷腦薄荷素油氣相色譜法無水乙醇

薄荷素油（薄荷油）為唇形科植物薄荷（Menthahaplocalyx Briq.）的新鮮莖和葉經(jīng)水蒸汽蒸餾、冷凍、部分洗腦加工提取的揮發(fā)油。薄荷素油為無色或淡黃色的澄清液體，有一種特有的薄荷樣香氣，香氣新鮮、強烈透發(fā)，有清涼、醒腦作用，是芳香藥、調(diào)味藥及驅(qū)風(fēng)藥。在雞上應(yīng)用具有緩解呼吸道黏膜腫脹的問題，對雞只因飲水不足、飼料積存嗉囊、接種疫苗后出現(xiàn)呼吸問題等誘發(fā)的呼吸道積痰癥狀有特效，通過刺激呼吸道絨毛活動來化痰；也可作為調(diào)味劑和香味劑在飼料添加劑中使用。目前薄荷素油的測定依據(jù)方法：GB/T 12652-2002亞洲薄荷素油、GB 8319-2003食品添加劑亞洲薄荷素油，《中華人民共和國藥典》一部，以上檢測方法均不適合檢測混合型飼料添加劑薄荷素油，因此，建立一種測定混合型飼料添加劑薄荷素油中薄荷腦含量快速、可靠、靈敏的分析方法具有重要的實際意義［1-3］。

1　材料與方法

1.1儀器與試劑Shimadzu GC-2010氣相色譜儀（配氫火焰離子化檢測器：日本島津公司，KYOTO）；渦旋混合器（江蘇健康醫(yī)藥公司）；分析天平（感量為0.1mg，德國賽多利斯公司）；微量進(jìn)樣器：10μL（瑞士Hamilton公司）；無水乙醇 （分析純，國藥集團(tuán)）；薄荷腦標(biāo)準(zhǔn)品（純度≥98.0%，美國Supelco公司）。

1.2試驗方法

1.2.1標(biāo)準(zhǔn)溶液配制薄荷腦標(biāo)準(zhǔn)儲備液：準(zhǔn)確稱取薄荷腦標(biāo)準(zhǔn)品0.1000 g于25mL容量瓶中，用無水乙醇溶解、定容，搖勻。

標(biāo)準(zhǔn)工作液配制：分別移取標(biāo)準(zhǔn)儲備液0.10mL、1.00 mL、2.00 mL、3.00 mL、4.00 mL、5.00 mL置于6個10 mL容量瓶中，用無水乙醇定容，搖勻備用。或根據(jù)樣品實際含量配制適當(dāng)濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作液。

1.2.2樣品預(yù)處理稱取試樣1 g（精確至0.0 001 g），置于25mL容量瓶中，用無水乙醇溶解定容，搖勻。供氣相色譜分析。

1.2.3色譜條件柱箱溫度：100℃，保持10min，以20℃/min速率升到220℃，保持4min；進(jìn)樣口溫度：230℃；檢測器溫度：260℃；氣體：載氣，氮氣（純度不小于 99.999%）；燃?xì)猓瑲錃?（純度不小于99.99%）；空氣 （壓縮空氣）；氣體流量：柱流量，1.85 mL/min；氫氣46 mL/min；空氣480 mL/min；尾吹氣，30mL/min；進(jìn)樣量：1μL；分流比為30:1。薄荷腦標(biāo)準(zhǔn)品、樣品的氣相色譜圖見圖1-圖2。

2　結(jié)果與討論

2.1線性及線性范圍用無水乙醇對標(biāo)準(zhǔn)儲備液逐步稀釋，配制標(biāo)準(zhǔn)系列濃度，進(jìn)樣測定，繪制工作曲線，并計算相關(guān)系數(shù)。薄荷腦的線性范圍和線性相關(guān)系數(shù)結(jié)果如表1所示，結(jié)果表明，在線性范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，符合標(biāo)準(zhǔn)定量要求。

圖1　薄荷腦標(biāo)樣色譜圖

圖2　薄荷腦樣品色譜圖

2.2方法定量限于混合型飼料添加劑薄荷素油樣品基質(zhì)中加入一定量的薄荷腦標(biāo)準(zhǔn)溶液，按前處理方法處理后，用10倍信噪比（S/N）計算出定量限（LOQ），結(jié)果見表1。

2.3方法回收率和精密度對混合型飼料添加劑薄荷素油樣品中分別進(jìn)行高、低加標(biāo)回收率試驗，每種加標(biāo)樣品平行制備6份，按照本方法建立的樣品預(yù)處理方法處理，經(jīng)GC分析檢測，計算加標(biāo)回收率和RSD值，結(jié)果如表2所示。結(jié)果表明，混合型飼料添加劑薄荷素油樣品中薄荷腦加標(biāo)回收率在98.2% ～99.2%之間，多次平行測定結(jié)果RSD在1.06%～1.96%；結(jié)果表明該方法具有良好的精密度和準(zhǔn)確度。

2.4供試品含量測定準(zhǔn)確稱取3批試樣1 g（精確至0.0001 g），分別置于25 mL容量瓶中，用無水乙醇溶解定容，搖勻。分別量取上述溶液各1μL，注入氣相色譜儀，記錄峰面積，計算混合型飼料添加劑薄荷素油中薄荷腦含量，見表3。

表1　薄荷腦樣品標(biāo)準(zhǔn)曲線和線性范圍

表2　混合型飼料添加劑薄荷素油樣品中薄荷腦加標(biāo)回收率和精密度（n=6）

表3　混合型飼料添加劑薄荷素油中薄荷腦含量

4　結(jié)　論

混合型飼料添加劑薄荷素油中薄荷腦含量測定方法為毛細(xì)管氣相色譜法，以無水乙醇溶解定容，采用外標(biāo)法計算含量，結(jié)果準(zhǔn)確、可靠，方法簡便、快速，該方法經(jīng)過方法學(xué)驗證，適合于混合型飼料添加劑薄荷素油中薄荷腦的質(zhì)量控制。

［1］程愛平，沈春燕，章展煌.毛細(xì)管氣相色譜法測定薄荷素油中（-）-薄荷酮和薄荷腦含量［J］.西北藥學(xué)雜志，2010，25（1）：11-12.

［2］胡青，張甦，王柯，等.氣相色譜法測定薄荷藥材及飲片中的薄荷腦［J］.中國衛(wèi)生檢驗雜志，2011（7）：1624-1625.

［3］陳碩.氣相色譜法測定薄荷素油中薄荷腦、薄荷酮、薄荷腦乙酸脂、檸檬稀的含量［J］.海峽藥學(xué)，2012，24（12）：41-42.

Determ ination ofmenthol in feed additive blender pepperm int oil by gas chromatography

Lin Zhangxiu
（Ximen Huiying Animal Science Tech.Co.，Ltd，Xiamen 361008）

Objective A method for the determination ofmenthol in feed additive blender Peppermint oil by gas chromatography was established.Methods The sample was firstly extracted by alcohol，and then was separated by capillary chromatogram column，and finally was determinate by flame ionization detector.Results The linear relation ofmenthol in 0.0356 to 1.780mg/mL showed good linearity（R=0.9998）.The linear equation was Y=139 286×X-3 452.The limit of quantization（LOQ）was 0.1 g/kg.The average recovery rate of recovery testwas 98.8%to 99.2%.The relative standard deviation（RSD）was 1.06%to 1.96%（n=6）.Conclusion Thismethod was simple，rapid and accurate.It can be used as amethod for the determination ofmenthol in feed additive blender PeppermintOil.

Menthol Peppermintoil Gas chromatography Dehydrated alcohol

A

1003-4331（2015）03-0001-02