硝碘酚腈注射液的初步安全性評價

林永樂　福建省漳州市動物疫病預防控制中心　363000

硝碘酚腈注射液的初步安全性評價

林永樂福建省漳州市動物疫病預防控制中心363000

為評價硝碘酚腈注射液的安全性，對硝碘酚腈注射液進行急性毒性試驗和蓄積毒性試驗，結果顯示硝碘酚腈注射液的LD50為68.37mg/kg，硝碘酚靜注射液為中等毒性并有明顯的蓄積毒性。

硝碘酚腈肝片吸蟲安全性

肝片吸蟲是一種能夠危害人和動物的寄生蟲，其中以牛、羊等反芻動物最為普遍，每年均引起重大的經濟損失。硝碘酚腈是由法國羅納梅里厄研究所研制開發的一種有效的、新型的驅除肝片吸蟲的合成藥物，其市場銷售類型為硝碘酚腈與甲基或乙基葡萄糖氨的滅菌水針劑。硝碘酚腈對牛羊肝片吸蟲、大盤吸蟲成蟲有100%驅殺效果，對牛羊捻轉血矛蟲、豬肝片吸蟲和犬鉤蟲也有一定的驅除作用，但對未成熟蟲體效果較差。硝碘酚腈與左旋咪唑聯合用藥對山羊肝片吸蟲和線蟲的驅除有理想效果。對牛羊皮下注射硝碘酚睛，30 min后可以達到血漿高峰濃度，藥物被迅速吸收。硝碘酚腈對大鼠肝細胞線粒體功能的影響研究中表明，硝碘酚腈是一種氧化磷酸化作用的解偶聯劑，它能夠阻斷蟲體的氧化碳酸化作用，降低ATP濃度，減少細胞分裂所需能量而導致蟲體死亡。本試驗通過急性毒性試驗和蓄積毒性試驗對硝碘酚腈注射液的安全性做一個初步評價。

1　材料與方法

1.1試驗動物昆明系小白鼠：雄性、體重20±2 g。

1.2試驗制劑硝碘酚腈注射液：暗黃色透明液體，濃度為340mg/mL，生產批號為130408，重慶方通動物藥業有限公司。

1.3試驗方法

1.3.2急性毒性試驗

1.3.2.1預試驗按1.3.1方法將硝碘酚腈注射液用純化水稀釋成 50 mg/kg、60 mg/kg、70 mg/kg、80mg/kg、90mg/kg 5個濃度梯度的溶液。取10只小鼠，隨機分成5組，按0.2 mL/10 g一次性腹腔注射給藥，給藥后連續飼養觀察7 d。觀察小白鼠中毒現象及時間順序，記錄每組小鼠死亡只數。并解剖死亡小白鼠，觀察內臟病變情況，并記錄其結果。

1.3.3蓄積毒性試驗采用20 d劑量遞增蓄積系數法，取20只雄性小白鼠，稱量，標記。同時腹腔注射給藥：一期按每只每天0.l*LD50的量給藥，連續給藥4 d。二、三、四期按順序遞增50%至動物死亡一半 （10只），或繼續給藥至累計劑量達 5.0*LD50（20 d）為止。觀察小鼠中毒現象，記錄小鼠死亡情況并解剖死亡小白鼠。

2　試驗結果

2.1預試驗預試驗分組與試驗結果見表1。

表1　預試驗分組與試驗結果

最小致死劑量a=50 mg/kg，最大致死劑量b= 80mg/kg。

2.2急性毒性試驗試驗組小白鼠在注射硝碘酚腈幾分鐘后活動量明顯減少，均出現呼吸次數增加，呼吸困難，出現不同程度的精神萎靡，反應遲鈍現象，注射濃度越高，反應越明顯。低濃度受試組在3 h后恢復正常。小白鼠開始死亡時間是給藥后5min，集中死亡時間是給藥后20～30min，最后死亡時間是給藥后4 h。小白鼠死亡前現象是亢奮并不斷游走，喜歡扎堆，出現抽搐后幾秒鐘內死亡，四肢拉直。解剖死亡的小鼠，腹腔被硝碘酚腈染成黃色，小鼠肝臟有淤血，呈暗黑色。見表2。

表2　急性毒性試驗小鼠死亡結果

計算：

LD5095%可信區間為61.94～75.47mg/kg。

2.3蓄積毒性試驗第一期試驗四次給藥都未出現小鼠死亡。第二期試驗第四次給藥后3號小鼠死亡。第三期試驗第一次給藥后4號小鼠死亡，第二次給藥后6、7號小鼠死亡，第三次給藥后8、9號小鼠死亡，第四次給藥后2、15、16號小鼠死亡。第四期第一次給藥后1、10、11號小鼠死亡。此時小鼠死亡超過一半（10只）。每次給藥前后稱量小白鼠重量，發現小鼠重量變化不明顯。每次給藥時小鼠都會出現呼吸困難、呼吸次數增加、精神萎靡等現象。但在一段時間后會恢復正常，隨著給藥次數的增加，每次恢復的時間也隨之增加。解剖死亡的小白鼠，發現腹腔黃染，肝臟呈暗黃色。結果見表3。

表3　蓄積毒性試驗小鼠死亡結果

計算蓄積系數：

K=LD50（n）/LD50（1）=2.6875。1＜K＜3，表明硝碘酚腈注射液有明顯蓄積毒性。

3　分析與討論

硝碘酚腈是目前臨床上有效的抗肝片吸蟲藥之一，具有作用劑量小（10～20 mg/kg）、使用方便、高效且安全等優點。硝碘酚腈注射液為硝碘酚腈與甲基或乙基葡萄糖氨的滅菌水溶液針劑，在試驗前應該排除其溶劑對試驗結果的影響。影響硝碘酚腈注射液的毒理作用的外界因素有氣候、光照、溫度和濕度。預試驗旨在確定硝碘酚腈注射液對小鼠的最小與最大致死量范圍，為后期準確測定硝碘酚腈注射液對小鼠的半數致死量提供數據。解剖死亡的小白鼠發現有些小鼠內臟無明顯病變現象，也有死亡小白鼠肝臟淤血，呈暗紅色，表明硝碘酚腈的主要作用靶器官是肝臟。有研究表明硝碘酚腈在血液中與血漿蛋白高度結合（結合率97%），具有緩釋作用，能在宿主體內存留很長時間，這使得硝碘酚腈具有很強的驅蟲效果，但也因此有較明顯的蓄積毒性，蓄積毒性強，藥物殘留在動物體內供給每組小鼠腹腔注射用的硝碘酚腈應按劑量比例稀釋成一系列濃度的溶液，小鼠腹腔注射給藥標準為0.2 mL/10 g，這樣給藥毫升數與按體重一致，避免給藥毫升數過大而導致小鼠非藥物致死性死亡，影響試驗結果。

4　結　論

硝碘酚腈注射液的急性毒性試驗測定的LD50為 68.37 mg/kg，LD5095%可 信 區 間 為 61.94～75.47mg/kg。按我國急性毒性分級硝碘酚腈毒性為中等毒性。其蓄積毒性試驗表明硝碘酚腈注射液有明顯蓄積毒性。

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A primary evaluation for the safety of nitroxynil injection

Lin Yongle
（Zhangzhou animal disease prevention and control center，Zhangzhou Fujian 363000）

To assess the safety of nitroxynil injection，test the acute toxicity and cumulation toxicity of nitroxynil injection，The results showed that the LD50is 68.37mg/kg，the Conclusion showed that the nitroxynil injection possessmoderate toxicity and obvious cumulation toxicity.

nitroxynil fasciola hepatica safety

A

1003-4331（2015）02-0032-03