不同物質對唐菖蒲繼代培養試管苗芽增殖的影響

申蕓萍

(互助縣農業示范園區管委會，青海互助 810500）お

摘要

［目的］探討不同物質對唐菖蒲繼代培養試管苗芽增殖的影響。［方法］在唐菖蒲試管苗芽增殖過程中，添加不同植物生長調節劑、碳源、活性炭，考察不同物質對芽增殖影響。［結果］濃度0.5 mg/L奈乙酸與濃度1.0 mg/L的6-芐基腺嘌呤植物生長調節劑組合下，苗增殖效果好而且苗較壯，增殖倍數為5。0.2%的活性炭，在30 d內有利于試管苗株高的增加，但對芽的誘導無明顯作用。［結論］用50 g/L市售白糖代替40 g/L純蔗糖作為培養基的碳源是可行的，這樣降低了配制培養基的成本，而且對試管苗的增殖和質量無┯跋臁＊

關鍵詞唐菖蒲（獹ladiolus gandavensis 玍an Houtte）；繼代培養；芽增殖

中圖分類號 SB188文獻標識碼 A文章編號 0517-6611（2014）19-06172-02

お

Effects of Different Materials on Subculture Plantlet Bud Proliferation of 獹ladiolus gandavensis

SHEN Yun瞤ing

(Huzhu County Agricultural Demonstration Zone Administrative Committee, Huzhu, Qinghai 810500)

Abstract ［Objective］ To discuss effects of different materials on subculture plantlet bud proliferation of 獹ladiolus gandavensis. ［Method］ Adding different plant growth regulator, carbon source, active carbon in proliferation process of G. gandavensis tube seedlings, effects on bud proliferation were investigated. ［Result］ The proliferation effect is good andseedlings are strong under the plant growth regulators of 0.5 ﹎g/L NAA and 1.0 mg/L 6瞓enzyladenine, the proliferation times is 5. 0.2% active carbon is conductive for plant growth of tube seedlings, but it has no obvious effect on induction of bud. ［Conclusion］ 50 g/L sugar takes place of 40 g/L pure sucrose as carbon source of culture medium is feasible, which can reduce cost and have no effects on proliferation and quality of tube seedlings.

Key words獹ladiolus gandavensis; Subculture; Shoot proliferation

お

作者簡介

申蕓萍（1976-），女，土族，青海海東人，農藝師，從事農業技術推廣研究。

收稿日期 20140605

唐菖蒲（獹ladiolus gandavensis 玍an Houtte）原種產于南非。花有單色和復色共5種，花冠呈漏斗形，是“世界四大切花”之一。試驗通過對唐菖蒲繼代培養的研究，以利于唐菖蒲的進一步擴繁，獲得更多的種源。

1材料與方法

1.1 材料

供試材料為市售唐菖蒲“奧斯卡(Oscar)”的健壯植株莖尖。試驗地點設在青海大學組培實驗室。

1.2 方法

在無菌條件下，從健壯的唐菖蒲植株上，用鑷子取下莖尖進行第一代試管苗的培養。然后將新長出的苗剪成1.5 cm長的切段，要求每個切段都已分化出一個芽。 然后將供試材料分別接種于基礎MS培養基和生長調節劑6睟A、KT、NAA培養基中，每10 d記錄試管苗增殖生長情況，培養室溫度為24 ℃，濕度為78%，光照（1400~1600）lx，10~12 h/s，碳源和水質試驗以市售白糖代替化學純蔗糖作為培養基的碳源。

2 結果與分析

2.1不同生長調節劑對試管苗增殖的影響

2.1.1

不加生長調節劑對試管苗增殖的影響。由表1可知，試管苗在添加生長素的培養基上芽分化倍數均高于不添加任何物質的MS培養基，芽的長勢，個數和株高也高于不添加任何物質的MS培養基上的。在基礎培養基上，芽的增殖倍數僅為1.5，芽數為45個，苗高為5.3 cm。各項指標都遠遠低于添加了調節劑的培養基上所增加的值。

2.1.2

6-芐基腺嘌呤對試管苗增殖的影響。對添加生長調節劑的培養基上，不同生長調節劑的組合使用對芽增殖效果好于單一調節劑的使用。在添加一種生成素的情況下，添加6-芐基腺嘌呤的芽增殖數為2.4，苗高為6.4 cm，芽數為72個，而添加激動素的培養基芽增殖數為2.0，苗高為5.9 cm，芽數為60個；從數據可以看出，添加6-芐基腺嘌呤的芽增殖效果好于添加激動素的培養基。

2.1.3

不同生長調節劑組合對試管苗增殖的影響。生長調節劑組合使用的培養基上，不同的組合對芽增殖效果不同，NAA與6睟A的組合其增殖分別為5.4和5.1，苗高平均為9.0 cm，芽數平均為158個；而NAA與KT組合的培養基上芽增殖數為4.1和4.5，苗高分別為8.1和7.9 cm，芽數平均為129個；由此可以，知道NAA與6睟A的組合其效果均好于NAA與KT的組合效果。

相同的培養基組合中不同的濃度對芽的長勢也不同，NAA和6睟A的組合中，0.5 mg/L NAA 和1.0 mg/L BA組合下，苗較粗壯，株高也明顯高于0.5 mg/L NAA和0.5 mg/L BA組合下苗的長勢；NAA和KT的組合中，MS+0.1 mg/L NAA+0.5 mg/L KT組合下無論是苗高，芽數還是芽增殖數均優于MS+0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L KT組合。

通過試驗說明，最適合唐菖蒲試管苗生長的生長素組合為0.5 mg/L奈乙酸與1.0 mg/L 6睟A。

2.2 不同碳源對試管苗增殖的影響

由表2可知，40 g/L市售白糖為碳源對切段進行培養，芽的分化數及增殖倍數都明顯低于40 g/L的蔗糖，分化苗較長勢弱。原因在于白糖不純，碳源濃度不夠，滿足不了芽增殖生長的需要。以60 g/L的白糖作為碳源，芽增殖的個數，倍數及株高同樣存在顯著差異，原因在于給芽提供的碳源過多，反而抑制了芽的生長。但和40 g/L市售白糖相比，芽增殖倍數、個數、株高均有所增加;而以50 g/L的白糖作為碳源和40 g/L的蔗糖相比，芽增殖個數和倍數及株高均無顯著差異，苗也壯，芽勢也好，苗壯，可見唐菖蒲試管苗增殖培養基中，以50 g/L白糖作碳源是可行的。

表1 生長素對試管苗的影響

培養基組成 切段數じ 發芽な∥個 40天后增殖け妒∥倍 差異性ぃ0.5%） 苗高（CM）こな

MS∥mg/L 30 45 1.5A 5.3 最弱

MS+1.0∥mg/L KT30 60 2.0B 5.9 較弱

MS+0.5∥mg/L 30 72 2.4B 6.4 弱

6睟A

MS+NAA 0.5+ 30 162 5.4C 9.6 強

6睟A 1.0 mg/L

MS+NAA 0.5+ 30 153 5.1C 8.3 較強

6睟A 0.5 mg/L

MS+NAA 0.5+ 30 123 4.1D 7.9 中

KT 1.0 mg/L

MS+NAA 0.1+ 30 135 4.5C 8.1 中

KT 0.5 mg/L

注：試管苗長勢標準：長勢好的植株直徑大于2 mm，正常綠色；長勢中為植株直徑在2.0~2.5 mm，淺綠色；長勢差的植株直徑1~2 mm，顏色發黃。

表2 不同碳源對試管苗增殖的影響

糖種類g/L 切段數じ 發芽數じ 苗高cm 40 d后增殖け妒∥倍 0.5%げ鉅煨

蔗糖40 25 127 7.5 5.1 A

白糖40 25 90 5.6 3.6 B

白糖50 25 130 7.4 5.2 A

白糖60 25 99 6.5 4.0 B

表4活性炭對芽的影響

0.2%せ钚蘊 接種數じ 芽數じ 株高cm 增殖率け妒 差異顯著性ぃ0.1%）

有 20 30 11.0 1.5 A

無 20 100 9.7 5.0 B

注：培養基為0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L BA。

在培養基中加入0.2%活性炭和未加入活性炭相比較得知，當加入活性炭或芽增殖倍數明顯降低（表4）在20 d時才有芽的少量分化，經40 d的培養，芽增殖倍數僅為1.5，株高在接種后30 d內增加迅速，株高為11 cm，比未加活性炭的高出1.3 cm，主要表現在節間的增長上，并且長勢弱，苗細長，葉色發黃，在30 d后株高增加相對于前期下降，隨著時間的推移。加活性炭和不加活性炭的植株株高趨于相等。

從試驗結果看活性炭對唐菖蒲試管苗芽的分化有抑制作用，是因為活性炭對生長調節劑起來吸附作用，大量文獻表明活性炭可以抵消生長調節劑的作用，故苗長勢弱，分化強度非常小。在培養前唐菖蒲試管苗株高增加迅速，主要是活性炭吸附了瓊脂中的雜質及蔗糖在高溫滅菌過程中降解產生的5-羥甲糠醛等的雜質，從而造成苗的徒長，后期由于上述作用減弱，徒長消除，所以株高與未加入活性炭的培養基上的株高趨于相等。試驗說明0.2%的活性炭對芽增殖無作用。

3結論

唐菖蒲試管苗分化不僅時間長，而且量大，這是快繁的優勢所在，但在繼代培養過程中弱勢化苗的出現也不容┖鍪印＊

從市場效益分析，市售白糖可以替換化學蔗糖作培養基的碳源，替換的最佳組合為50 g白糖替換40 g蔗糖，這樣的話試管苗培育的成本降低90%以上，對唐菖蒲的快繁作用┖艽蟆＊

試驗中，對活性炭的作用只作初步的研究，其濃度為0.2%是從大量資料查得，至于濃度是否得當有待于以后的試驗研究。

參考文獻

［1］ 劉慧民,胡冰.花卉類植物組織培養技術發展概述［J］.北方園藝,2000(1):62.

［2］師素恩.唐菖蒲體細胞胚發生和植株再生［J］.北方園藝，1997（3）：61-62.

［3］ 劉文萍.脫毒唐菖蒲的微繁技術［J］.中國林副特產，1997（4）：32.

［4］趙秀梅，王紅梅.唐菖蒲利用花瓣組培快繁試驗初報［J］.甘肅農業科技，1999（6）：44-45.

［5］ 曾小龍.不同培養基對虎頭蘭原球莖器官分化的影響［J］.廣東農業科學，1998（5）：21-22.

［6］ 黃家平,戴思蘭.蘭花組織培養研究綜述［J］.廣東園林，1997（2）：28-31.