蒙藥小白蒿的炮制工藝及炮制品的藥理研究△

珠娜，薩茹拉，那生桑*

(1.內蒙古醫科大學，內蒙古 呼和浩特 010110； 2.內蒙古國際蒙醫醫院，內蒙古 呼和浩特 010065)

·基礎研究·

蒙藥小白蒿的炮制工藝及炮制品的藥理研究△

珠娜1，薩茹拉2，那生桑1*

(1.內蒙古醫科大學，內蒙古 呼和浩特 010110； 2.內蒙古國際蒙醫醫院，內蒙古 呼和浩特 010065)

目的：優選小白蒿蒙醫炮制工藝，并觀察其飲片安全有效性。方法：以炮制品綠原酸含量為主要指標并參考槲皮素含量進行正交試驗，以考察炒制溫度、時間和藥材粒度的影響，確定最佳工藝；采用小白鼠急性毒性實驗，斷尾實驗測定出血時間，眼眶靜脈叢取血測定凝血時間，斷頭采全血計數血小板總數，評價安全有效性。結果：本品在270 ℃溫度下翻動炒制20 min效果最佳，經方差分析證明炒制溫度、時間和粒度因素對所監測的兩種成分的含量均沒有顯著影響；小白蒿炮制后可縮短小白鼠的出血時間，顯著增高血小板計數。結論：小白蒿經過合理的炒制后，可提高其安全性和止血藥效，為驗證傳統蒙藥小白蒿用藥理論，提供了參考依據。

蒙藥；小白蒿；炮制；藥理

小白蒿是菊科多年生植物冷蒿ArtemisiafrigidaWilld.的地上部分，其植物資源豐富，北半球寒帶、亞熱帶幾乎有分布。秋季花盛開時采集，陰干[1]。小白蒿是古老而最常用的一種蒙藥[2]，蒙藥本草《蒙藥正典》中有其藥用記載。現代蒙醫學文獻則更詳細描述了其功效，止血、消腫，主治各種出血、腎熱、月經不調、瘡痛[3]。關于小白蒿的炮制，《認藥白晶藥鑒》[4]、《四部甘露》[5]等多個蒙醫藥經典文獻記載基本一致，配入止血方劑時炒制。其炮制目的在于提高止血作用，《蒙藥炮制學》已予肯定[6]。此外，據報道小白蒿中的與止血功效有關系的鈣、鎂、鉀、鐵等含量炮制后呈現不同程度的增加[7]，支持了止血功能增加的論斷。有人也研究了小白蒿炒炭炮制工藝與藥效后提出：與凝血機制有關的無機元素含量增加，炮制使止血作用有增強的趨勢[8]，但未提及對血小板計數有何影響。至于炮制法有二，一為炒焦，二為燜煅至碳。故炒制程度是要探討的問題。在蒙醫古代文獻中表述火制(用火處理)程度沒有明顯的界限之分，凡炒或煅制使藥材變化后統稱為碳(或碳灰)，不能夠用中醫炒黃、炒焦或炒碳來衡量。故本文照蒙醫理論對小白蒿炒制程度以飲片性狀(炒至藥材表面深棕色，斷面見呈淺褐色)為標準優選炮制工藝，并評價其飲片安全有效性。

1 材料

1.1 藥物與試劑

小白蒿：采集于呼和浩特大青山，由內蒙古藥檢所康雙龍蒙藥主任藥師鑒定為正品，標本號：NM-MP20130701；三七粉(批號：20120801，亳州市京皖中藥飲片廠)。以上藥物用于動物實驗時制成一定年度的混懸液；綠原酸對照品(中國食品藥品檢定研究院，批號：110753-201213)、槲皮素對照品(中國食品藥品檢定研究院，批號：100081-201207)；鐵氰化鉀、三氯化鐵、十二烷基硫酸鈉等試劑均為分析純或色譜純。

1.2 動物

昆明品系小白鼠(內蒙古大學動物實驗中心)，雌雄各半，體重(20±2) g。

1.3 儀器

HH-S數顯恒溫油浴鍋(金壇市雙佳實驗儀器廠)；TU-1901雙光束紫外可見分光光度計(北京普析通用儀器有限責任公司)；AC910EO型血球儀計數器(瑞典)。

2 方法與結果

2.1 炮制工藝優選

2.1.1 小白蒿藥材 新鮮采集藥材，除去雜質，洗凈，切1～5 mm段，陰干。

2.1.2 炒制方法 根據藥材炒制通則，取凈小白蒿藥材置恒溫炒藥鍋，用武火(220～300 ℃)不斷翻動炒至噴發香味，停止冒白煙，外表面呈棕黃色時取出，出現火星時噴以清水滅盡，炒干取出，放涼。

2.1.3 炮制工藝優選正交試驗設計 以炮制品綠原酸含量為指標并參考槲皮素含量，對影響因素進行正交優選。具體選炒制溫度(A)、時間(B)及藥材粒度(C)3個因素，每因素設3個水平，選用正交表L9(34)進行正交試驗[9]。結果見表1。

表1 小白蒿炮制工藝因素水平表

2.1.4指標檢測 取綠原酸和槲皮素對照品，用紫外分光光度計依法測定分別繪制標準曲線，得回歸方程式依次為Y綠=2.905 68X+0.003 64(r=0.999 6)和Y槲=5.566 99X-0.034 3(r=0.999 6)。據不同被測物質采用相應的溶劑和方法提取小白蒿樣品，制備兩種供試品溶液，依法測定。

2.1.5 正交試驗結果 按綠原酸或槲皮素含量為指標排序，各因素影響主次結果為A2﹥B1﹥C3；即藥材切5 mm段，270 ℃溫度下翻動炒制20 min效果最佳。經方差分析證明設定的溫度、時間對檢測成分均沒有顯著影響(P>0.05)。見表2、3。

表2 小白蒿炮制工藝正交試驗方案及結果

表3 方差分析表

注：F0.05(2，1)=18.5.00；F0.01(2，1)=98.50。

2.2 藥理實驗

2.2.1急性毒性實驗 據預試了解到小白蒿飲片毒性很低，測不出LD50，故將小白蒿飲片制成適宜濃度的的混懸液，常規測定小鼠最大口服耐受量。結果每次給藥量達9.4 g·kg-1，超過了臨床有效量的340倍而無死亡，未見異常反應，14 d小鼠增長與對照組間無差異[10]。說明小白蒿飲片毒性很小。

2.2.2 對昆明小鼠出、凝血時間及血小板總數的影響 取小白鼠80只，雌雄各半，隨機分為4組，每組20只，分別為賦形劑(空白)組、三七粉(陽性)組、藥材組和飲片組。小白蒿藥材細粉制成混懸液，按13.8 mg·(10g)-1劑量連續灌胃給藥5 d，末次給藥1 h后，小鼠固定，剪于尾尖0.5 cm處橫斷，待血液自行流出開始計時，測出血時間(BT)；同時自眼眶靜脈叢取血測定凝血時間(CT)；最后斷頭采全血，用血球儀計數血小板總數。

小白蒿經炮制可縮短正常小白鼠出凝血時間，炮制前后相比具有統計學意義(P﹤0.05)，小白蒿可顯著增加血小板計數(P﹤0.05)，經炮制可提高該作用強度(P﹤0.05)，見表4。證明小白蒿經炮制，可增強其止血作用，其機制可能與血小板計數增加等有關。

表4 小白蒿對小白鼠出血、凝血時間及血小板總數的影響

注：與空白組比，▲P﹤0.05，▲▲P﹤0.01；與陽性組比，△P﹤0.05，△△P﹤0.01；與藥材組比，★P﹤0.05。

3 討論

小白蒿是古老而最常用的一種蒙藥[11]，多用于出血性或血液病證的治療。配入止血方或治療血液病的方劑中，需要炮制，以提高其止血作用。本文研究炮制工藝，以綠原酸和槲皮素含量為檢測指標優選了炒制工藝，結果藥材切成小段，在270 ℃下翻動炒制20 min效果最佳；藥理實驗顯示小白蒿具有縮短出血時間和凝血時間、提高血小板計數作用，經炮制后可提上述作用的強度，炮制前后比較具有統計學意義，有力地證明了傳統蒙醫藥的有效性和科學性。

[1] 羅布桑.蒙藥學[M].呼和浩特：內蒙古人民出版社，2006：138.

[2] 德力格瑪.蒙藥小白蒿的功效及使用方法[S].中國醫學，2013，12(3)：87

[3] 王青虎，烏仁蘇布德，布和巴特爾，等.蒙藥小白蒿的歷史沿革與現代研究概述[J].中國現代應用藥學，2010，27(10)：897-900，915.

[4] 伊希巴拉珠爾.認藥白晶藥鑒[M].呼和浩特：內蒙古科技出版社，1998：559

[5] 伊希巴拉珠爾.甘露四部[M].呼和浩特：內蒙古科技出版社，1998：178

[6] 羅布桑.蒙藥炮制學[M].呼和浩特：內蒙古人民出版社，1989：234.

[7] 張婉，謝坤，樓彩霞，等.蒙藥阿給(冷蒿)炒炭前后無機元素含量及溶出率的變化[J].中國藥物與臨床，2008，8(11)：852-854.

[8] 張婉.蒙藥阿給(小白蒿)炮制前后化學成分變化及止血作用機制研究[D].北京：中央民族大學，2009.

[9] 李永輝，譚銀豐，張俊清，等.正交試驗法優選咖啡渣中脂肪酸的提取工藝[J].中國現代中藥，2014，16(1)：41-44.

[10] 李清，劉姣，曹秀蓮，等.垂盆草不同提取物急性毒性實驗[J].中國現代中藥，2010，12(11)：36-38.

[11] 姜保平，許利嘉，王秋玲，等.菊花的傳統使用及化學成分和藥理活性研究進展[J].中國現代中藥，2013，15(6)：523-530.

ProcessingTechnologyofMongolianArtemisiafrigidaWilldandPharmacologicalStudiesonProcessedProduct

ZHUNa1，SARula2，NAShengsang3*

(1.InnerMongoliaMedicalUniversity，InnerMongolia，Hohhot010110，China； 2.InternationalMongolianHospitalofInnerMongoliaAutonomousRegion，InnerMongolia，Hohhot010065，China)

Objective：To optimize the Mongolian processing technology ofArtemisiafrigidaWilld and observe the safety and effectiveness of processed product.Methods：The orthogonal test was conducted with the content of chlorogenic acid in processed products and quercetin as the main indicator and reference factors.The impact of frying temperature and time and medicinal material granularity were examined to determine the optimum.The safety and effectiveness by adopting acute toxicity test in mice were evaluated，and the bleeding time was determined by tail docking experiments，the blood coagulation time was determined with orbital venous plexus，the total number of platelet was counted with whole blood.Results：When the product was flipped fryed at a temperature of 270 ℃ 20 min，the best effect was achieved.By analysis of variance，it proved that the frying temperature and the time and granularity had not significant effect on the content of the two monitored components.After processingA.frigida，it can shorten the bleeding time of mouse，significantly increased the platelet count.Conclusion：After reasonable frying，it can improve theA.frigidasafety and hemostatic efficacy.The study provided a reference basis to verify the theory of traditional Mongolian medicine onA.frigida.

Mongolian medicine；ArtemisiafrigidaWilld；processing；pharmacology

10.13313/j.issn.1673-4890.2015.11.012

2015-02-06)

內蒙古政府重大項目(2013-006)

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那生桑，教授，研究方向：蒙藥現代化研究；E-mail：nasang56@sina.com