牛磺酸對(duì)順鉑所致H22荷瘤小鼠免疫器官及淋巴細(xì)胞損傷的保護(hù)作用

郭杰，王蓓*，戎瑞雪，曹志然*

（河北大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，河北保定071000）

牛磺酸對(duì)順鉑所致H22荷瘤小鼠免疫器官及淋巴細(xì)胞損傷的保護(hù)作用

郭杰，王蓓*，戎瑞雪，曹志然*

（河北大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，河北保定071000）

目的：研究牛磺酸對(duì)順鉑化療荷瘤小鼠免疫器官和淋巴細(xì)胞損傷的保護(hù)作用。方法：H22荷瘤小鼠隨機(jī)分為5組：模型對(duì)照組、順鉑（1.5mg/（kg·d））化療組、順鉑+高劑量（640mg/（kg·d））牛磺酸組、順鉑+中劑量（320mg/（kg·d））牛磺酸組和順鉑+低劑量（160mg/（kg·d））牛磺酸組，末次用藥24h后眼球放血處死小鼠，測(cè)定小鼠體質(zhì)量、瘤質(zhì)量、脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)以及血清白細(xì)胞介素-2（interleukin-2，IL-2）、腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、干擾素-γ（interferon-γ，IFN-γ）水平，胸腺依賴性淋巴細(xì)胞（thymus dependent lymphocyte，T細(xì)胞）、骨髓依賴性淋巴細(xì)胞（bone marrow dependent lymphocyte，B細(xì)胞）增殖能力的變化情況。結(jié)果：順鉑化療組小鼠體質(zhì)量和瘤質(zhì)量均明顯低于模型對(duì)照組，抑瘤率為36%，順鉑+中、高劑量牛磺酸組小鼠的體質(zhì)量顯著高于順鉑化療組，抑瘤率分別達(dá)到51%和68%；順鉑化療組小鼠的脾臟質(zhì)量和脾臟指數(shù)明顯低于模型對(duì)照組，而順鉑+各劑量牛磺酸組小鼠的脾臟質(zhì)量和脾臟指數(shù)均高于順鉑化療組；順鉑化療組小鼠的胸腺質(zhì)量和胸腺指數(shù)明顯低于模型對(duì)照組，順鉑+高劑量牛磺酸組小鼠的胸腺質(zhì)量和胸腺指數(shù)明顯高于順鉑化療組；順鉑化療組小鼠血清IL-2、IFN-γ和TNF-α的分泌水平明顯低于模型對(duì)照組（P＜0.01）；而順鉑+各劑量牛磺酸組血清IL-2、IFN-γ和TNF-α的水平均高于順鉑化療組；順鉑可明顯抑制荷瘤小鼠對(duì)絲裂原刺激的T細(xì)胞和B細(xì)胞的增殖，順鉑+高劑量牛磺酸組小鼠的T細(xì)胞刺激指數(shù)明顯高于順鉑化療組（P＜0.05）；而順鉑+低、中劑量牛磺酸組小鼠的B細(xì)胞刺激指數(shù)則高于順鉑化療組。結(jié)論：牛磺酸可協(xié)同順鉑發(fā)揮抑制腫瘤的作用，其機(jī)制與保護(hù)順鉑導(dǎo)致的動(dòng)物免疫器官和淋巴細(xì)胞功能損傷有關(guān)。

牛磺酸；腫瘤；化療；免疫功能

牛磺酸又名牛膽酸、膽素、牛膽堿，化學(xué)名為2-氨基乙磺酸，是體內(nèi)含量最豐富的含磺酸基β-氨基酸，以游離形式存在于人體各組織中，但不參與蛋白質(zhì)的合成［1］。牛磺酸參與機(jī)體的多種生物學(xué)功能，具有抗炎、抗氧化、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)等作用［2-4］。有大量研究表明牛磺酸可通過(guò)促進(jìn)胎兒的發(fā)育，促進(jìn)人腦細(xì)胞的生長(zhǎng)發(fā)育、增殖分化及延緩衰老，促進(jìn)超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）和谷胱甘肽過(guò)氧物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）的活性、增強(qiáng)清除自由基的功能，穩(wěn)定細(xì)胞膜等多種機(jī)制發(fā)揮對(duì)細(xì)胞的保護(hù)作用［5-9］。順鉑（cisplatin）是目前臨床運(yùn)用廣泛、療效可靠的抗腫瘤藥物之一，但是其在抗腫瘤的同時(shí)會(huì)造成機(jī)體免疫功能的損傷，從而影響腫瘤的治療效果［10］。鑒于牛磺酸對(duì)細(xì)胞具有保護(hù)功能，因此本實(shí)驗(yàn)采用H22荷瘤小鼠模型，應(yīng)用牛磺酸聯(lián)合順鉑，觀察牛磺酸對(duì)順鉑化療小鼠的腫瘤抑制及免疫功能的影響，為牛磺酸在腫瘤輔助治療方面的應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1　材料與方法

1.1動(dòng)物與瘤株

昆明種小鼠40只，5周齡，體質(zhì)量（22±2）g，雌雄兼用，購(gòu)自河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物合格證號(hào)：901027，使用許可證號(hào)：SCXK（G2008-1-003）；H22小鼠肝癌腫瘤細(xì)胞株由河北醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院免疫教研室惠贈(zèng)，本實(shí)驗(yàn)室傳代保存。

1.2試劑與儀器

牛磺酸、二甲基亞砜（dimethyl sulfoxide，DMSO）北京Solarbio公司；RPMI1640培養(yǎng)基美國(guó)Gibco公司；胎牛血清杭州四季青生物工程材料有限公司；四甲基偶氮唑鹽（3-（4，5-dimethylthiazol-2-yl）-2，5-diphenyltetrazolium bromide，MTT）美國(guó)Amresco公司；伴刀豆凝集素A（concanavalin A，Con A）、細(xì)菌脂多糖（lipopolysaccharides，LPS）美國(guó)Sigma公司；青霉素鈉華北藥業(yè)股份有限公司；硫酸鏈霉素深圳華藥南方制藥有限公司；順鉑南京制藥廠有限公司；小鼠白細(xì)胞介素-2（interleukin-2，IL-2）酶聯(lián)免疫吸附（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）檢測(cè)試劑盒、腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）ELISA檢測(cè)試劑盒、干擾素-γ（interferon-γ，IFN-γ）ELISA檢測(cè)試劑盒深圳達(dá)科為生物技術(shù)公司。

CKX41SF倒置顯微鏡日本Olympus公司；HF90二氧化碳培養(yǎng)箱上海力申科學(xué)儀器有限公司。

1.3方法

1.3.1荷瘤小鼠模型的制備

常規(guī)復(fù)蘇凍存的H22細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞濃度為2×106個(gè)/mL，取1mL接種在小鼠腹腔內(nèi)，10d后無(wú)菌操作取小鼠腹水，臺(tái)盼藍(lán)染色，光學(xué)顯微鏡下記數(shù)，活細(xì)胞比例為93%，調(diào)整細(xì)胞濃度為1×107個(gè)/mL，取0.2mL接種于小鼠右前肢外側(cè)皮下，建立實(shí)體型荷瘤鼠模型。

1.3.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組和處理

小鼠接種腫瘤細(xì)胞后24h隨機(jī)分為5組，每組8只：模型對(duì)照組、順鉑化療組、順鉑+低劑量牛磺酸組、順鉑+中劑量牛磺酸組、順鉑+高劑量牛磺酸組。除模型對(duì)照組外，其余4組給予順鉑1.5mg/kg（以體質(zhì)量計(jì)，下同）腹腔注射，1次/d，共7d；順鉑+牛磺酸低、中、高劑量組組同時(shí)分別給予160、320、640mg/kg牛磺酸溫水溶液灌胃，1次/d，共10d。模型對(duì)照組小鼠給予相同體積的生理鹽水腹腔注射和溫蒸餾水灌胃。在末次給藥24h后，稱量小鼠體質(zhì)量后眼球放血處死小鼠，進(jìn)行指標(biāo)檢測(cè)。

1.3.3小鼠血清細(xì)胞因子分泌水平的測(cè)定

分離小鼠血清，采用ELISA法測(cè)定小鼠血清中IL-2、TNF-α、IFN-γ水平，按試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作。

1.3.4抑瘤率測(cè)定

剝離荷瘤小鼠的腫瘤組織，拭去表面血跡和組織液，電子天平稱質(zhì)量，按照公式（1）計(jì)算抑瘤率。

1.3.5脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)測(cè)定

無(wú)菌操作剝離小鼠脾臟和胸腺，電子天平稱質(zhì)量后，按照公式（2）、（3）計(jì)算脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)。

1.3.6荷瘤小鼠脾臟T細(xì)胞、B細(xì)胞增殖能力測(cè)定

無(wú)菌操作制備脾臟細(xì)胞懸液，用RPMI1640完全培養(yǎng)液調(diào)整細(xì)胞濃度為5×106個(gè)/mL，以90μL/孔加入96孔培養(yǎng)板中，每組均設(shè)Con A組（T細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)，終質(zhì)量濃度為5μg/mL）、LPS組（B細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)，終質(zhì)量濃度為10μg/mL）和無(wú)血清培養(yǎng)液對(duì)照組，每組3個(gè)復(fù)孔。將96孔板置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)68h后，換為無(wú)血清培養(yǎng)液，加入5mg/mL的MTT15μL，繼續(xù)培養(yǎng)4h，培養(yǎng)結(jié)束后棄去上清液，每孔加DMSO150μL，振蕩5min，酶標(biāo)儀490nm波長(zhǎng)處讀取光密度（OD490nm）值，按照公式（4）、（5）計(jì)算T細(xì)胞和B細(xì)胞的刺激指數(shù)（stimulation index，SI）。

1.4數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

所有數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)均使用SPSS16.0軟件包進(jìn)行。采用單因素方差分析和t檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水平α=0.05，P＜0.05表示有顯著性差異；檢驗(yàn)水平α=0.01，P＜0.01表示有極顯著性差異。

2　結(jié)果與分析

2.1牛磺酸對(duì)順鉑化療荷瘤小鼠體質(zhì)量和抑瘤率的影響

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型建立后，荷瘤率為100%。由表1可知，順鉑化療組小鼠體質(zhì)量和瘤質(zhì)量均極顯著低于模型對(duì)照組（P＜0.01），抑瘤率為36%，提示順鉑在抑制腫瘤生長(zhǎng)的同時(shí)可降低小鼠的體質(zhì)量。順鉑+中、高劑量牛磺酸組小鼠的體質(zhì)量明顯高于順鉑化療組，且瘤質(zhì)量顯著低于順鉑化療組（P＜0.05），抑瘤率分別達(dá)到51%和68%，表明牛磺酸可改善順鉑化療荷瘤動(dòng)物的一般狀況，并可協(xié)同順鉑抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。

表1　牛磺酸聯(lián)合順鉑對(duì)荷瘤小鼠體質(zhì)量和抑制腫瘤作用的影響Table1Effect of taurine combined with cisplatin on body mass and tumor growth inhibition in tumor-bearing miiccee

表1　牛磺酸聯(lián)合順鉑對(duì)荷瘤小鼠體質(zhì)量和抑制腫瘤作用的影響Table1Effect of taurine combined with cisplatin on body mass and tumor growth inhibition in tumor-bearing miiccee

注：*.與模型對(duì)照組相比，差異極顯著（P＜0.01）；#.與順鉑化療組相比，差異顯著（P＜0.05）。下同。

組別體質(zhì)量/g瘤質(zhì)量/g抑瘤率/%模型對(duì)照組順鉑化療組順鉑+低劑量牛磺酸組順鉑+中劑量牛磺酸組順鉑+高劑量牛磺酸組31.15±1.93 25.09±2.11* 24.99±1.56* 26.31±1.52* 28.53±1.42*#1.46±0.13 0.94±0.11* 0.92±0.06* 0.72±0.10*#0.47±0.12*#36 37 51 68

2.2牛磺酸對(duì)順鉑化療荷瘤小鼠脾臟質(zhì)量和脾臟指數(shù)的影響

表2牛磺酸聯(lián)合順鉑對(duì)荷瘤小鼠脾臟質(zhì)量和脾臟指數(shù)的影響Table2Effect of taurine combined with cisplatin on spleen mass and spleen index of tumor-bear

表2牛磺酸聯(lián)合順鉑對(duì)荷瘤小鼠脾臟質(zhì)量和脾臟指數(shù)的影響Table2Effect of taurine combined with cisplatin on spleen mass and spleen index of tumor-bear

組別脾臟質(zhì)量/mg脾臟指數(shù)/（mg/g）模型對(duì)照組順鉑化療組順鉑+低劑量牛磺酸組順鉑+中劑量牛磺酸組順鉑+高劑量牛磺酸組153.52±20.17 79.68±15.13* 93.44±8.14*#97.38±15.21*#109.02±11.34*#4.93±0.89 3.18±0.76* 3.74±0.59*#3.70±0.87*#3.82±0.81*#

由表2可知，順鉑化療組小鼠的脾臟質(zhì)量和脾臟指數(shù)極顯著低于模型對(duì)照組（P＜0.01），而順鉑+各劑量牛磺酸組小鼠的脾臟質(zhì)量和脾臟指數(shù)均高于順鉑化療組（P＜0.05），但仍低于模型對(duì)照組（P＜0.01），表明順鉑可損傷小鼠的脾臟，而牛磺酸對(duì)順鉑導(dǎo)致的小鼠脾臟損傷有一定保護(hù)作用。

2.3牛磺酸對(duì)順鉑化療荷瘤小鼠胸腺質(zhì)量和胸腺指數(shù)的影響

表3牛磺酸聯(lián)合順鉑對(duì)荷瘤小鼠胸腺質(zhì)量和胸腺指數(shù)的影響Table3Effect of taurine combined with cisplatin on thymus mass and thymus index of tumor-bear

表3牛磺酸聯(lián)合順鉑對(duì)荷瘤小鼠胸腺質(zhì)量和胸腺指數(shù)的影響Table3Effect of taurine combined with cisplatin on thymus mass and thymus index of tumor-bear

組別胸腺質(zhì)量/mg胸腺指數(shù)/（mg/g）模型對(duì)照組順鉑化療組順鉑+低劑量牛磺酸組順鉑+中劑量牛磺酸組順鉑+高劑量牛磺酸組94.73±17.04 42.39±14.03* 40.04±9.59* 39.33±9.87* 53.4±14.96*#3.04±0.76 1.69±0.87* 1.60±0.68* 1.59±0.66* 1.87±0.98*#

由表3可知，順鉑化療組小鼠的胸腺質(zhì)量和胸腺指數(shù)極顯著低于模型對(duì)照組（P＜0.01），順鉑+高劑量牛磺酸組小鼠的胸腺質(zhì)量和胸腺指數(shù)明顯高于順鉑化療組（P＜0.05），表明高劑量牛磺酸可拮抗順鉑對(duì)小鼠胸腺的損傷作用。

2.4牛磺酸對(duì)順鉑化療荷瘤小鼠血清細(xì)胞因子分泌水平的影響

表 4 牛磺酸聯(lián)合順鉑對(duì)荷瘤小鼠血清中IL-2、IFN- 、TNF- 分泌水平的影響Table 4 Effect of taurine combined with cisplatin on the secretio n of IL-2， IFN- and TNF- in serum of tumor-bear

表 4 牛磺酸聯(lián)合順鉑對(duì)荷瘤小鼠血清中IL-2、IFN- 、TNF- 分泌水平的影響Table 4 Effect of taurine combined with cisplatin on the secretio n of IL-2， IFN- and TNF- in serum of tumor-bear

組別IL-2含量/（pg/mL）IFN-γ含量/（pg/mL）TNF-α含量/（pg/mL）模型對(duì)照組順鉑化療組順鉑+低劑量牛磺酸組順鉑+中劑量牛磺酸組順鉑+高劑量牛磺酸組294.33±5.51 7.11±5.40* 34.23±5.45*#39.67±5.45*#152.33±5.51*#68.86±3.12 39.62±3.34* 48.31±3.01*#56.12±3.31*#62.04±3.34#618.82±7.33 307.66±6.98* 379.43±7.02*#421.89±6.87*#498.76±7.32*#

由表4可知，順鉑化療組小鼠血清IL-2、IFN-γ和

TNF-α的分泌水平極顯著低于模型對(duì)照組（P＜0.01）；而順鉑+各劑量牛磺酸組小鼠血清IL-2、IFN-γ和TNF-α

的水平均高于順鉑化療組（P＜0.05），其中以順鉑+高劑量牛磺酸組作用最明顯，但順鉑+各劑量牛磺酸組的這幾種細(xì)胞因子水平仍低于模型對(duì)照組，提示牛磺酸可部分拮抗順鉑導(dǎo)致的細(xì)胞因子分泌水平下降。

2.5牛磺酸對(duì)順鉑化療荷瘤小鼠脾臟T細(xì)胞和B細(xì)胞增殖能力的影響

表5牛磺酸聯(lián)合順鉑對(duì)荷瘤小鼠T細(xì)胞、B細(xì)胞增殖能力的影響（Table　5　Effect of taurine combined with cisplatin on the proliferation of 　cells and B cells in tumor-be

表5牛磺酸聯(lián)合順鉑對(duì)荷瘤小鼠T細(xì)胞、B細(xì)胞增殖能力的影響（Table　5　Effect of taurine combined with cisplatin on the proliferation of 　cells and B cells in tumor-be

組別T細(xì)胞刺激指數(shù)B細(xì)胞刺激指數(shù)模型對(duì)照組順鉑化療組順鉑+低劑量牛磺酸組順鉑+中劑量牛磺酸組順鉑+高劑量牛磺酸組1.76±0.17 1.02±0.06* 1.08±0.06* 1.07±0.08* 1.19±0.27*#1.20±0.09 0.66±0.06* 0.86±0.08*#0.82±0.07*#0.71±0.09*

由表5可知，順鉑可明顯抑制荷瘤小鼠對(duì)絲裂原刺激的T細(xì)胞和B細(xì)胞的增殖，順鉑化療組小鼠的T細(xì)胞、B細(xì)胞刺激指數(shù)極顯著低于模型對(duì)照組（P＜0.01），順鉑+高劑量牛磺酸組小鼠T細(xì)胞刺激指數(shù)明顯高于順鉑化療組（P＜0.05）；而順鉑+低、中劑量牛磺酸組小鼠的B細(xì)胞刺激指數(shù)則高于順鉑化療組（P＜0.05），而順鉑+高劑量牛磺酸組B細(xì)胞刺激指數(shù)又有所下降，表明牛磺酸可拮抗順鉑對(duì)T細(xì)胞和B細(xì)胞功能的損傷作用，但T細(xì)胞和B細(xì)胞所需的有效劑量不同。

3討論

牛磺酸廣泛存在于機(jī)體的多種組織和細(xì)胞中，其中以眼睛、心肌、中樞神經(jīng)系統(tǒng)及免疫系統(tǒng)中含量豐富。研究表明牛磺酸對(duì)機(jī)體的多種生理功能均具有重要的調(diào)節(jié)作用。近年來(lái)其在腫瘤輔助治療方面的應(yīng)用引起研究者的廣泛關(guān)注［11-13］。

惡性腫瘤是目前危害人類健康的重大疾病，化療是目前常用的治療手段之一。順鉑是臨床運(yùn)用廣泛、療效可靠的治療實(shí)體瘤的抗腫瘤藥物之一。有研究表明，順鉑有免疫抑制效應(yīng)，可導(dǎo)致小鼠淋巴器官萎縮，NK細(xì)胞活性明顯下降，T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞減少，損傷機(jī)體的免疫功能，從而影響到腫瘤的治療效果［14］。順鉑的毒副作用主要與其在細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生大量的反應(yīng)性氧中間產(chǎn)物（超氧陰離子自由基、羥自由基等）消耗氧化型谷胱甘肽和影響抗氧化酶活性等有關(guān)，使細(xì)胞內(nèi)的氧化功能失衡，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)過(guò)氧化脂質(zhì)堆積、線粒體功能障礙和脫氧核糖核酸（deoxyribonucleic acid，DNA）損傷［15-16］，具有廣泛的細(xì)胞毒性，故在殺死腫瘤細(xì)胞的同時(shí)往往造成腎臟、骨骼肌、免疫器官及免疫細(xì)胞的損傷，從而降低對(duì)腫瘤的治療效果。

機(jī)體免疫系統(tǒng)的監(jiān)視功能在腫瘤發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要作用。在抗腫瘤免疫中以T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫為主，T細(xì)胞活化后大量增殖并分化為效應(yīng)性T細(xì)胞，CD4+T細(xì)胞分化為Th1輔助細(xì)胞（T helper type1cell），通過(guò)分泌IL-2、TNF-α、IFN-γ等細(xì)胞因子作用于其他免疫細(xì)胞發(fā)揮抗腫瘤作用；CD8+T細(xì)胞分化為細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞（cytotoxic lymphocyte，CTL）來(lái)特異性殺傷腫瘤細(xì)胞。而B細(xì)胞介導(dǎo)的體液免疫不是抗腫瘤免疫的重要效應(yīng)因素，相反在某些情況下，腫瘤特異性抗體反而會(huì)干擾特異性T細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷作用，這種具有促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)的抗體被稱為“增強(qiáng)性抗體”，此外，抗體還可使腫瘤的黏附特性改變或喪失，從而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移［17-18］。機(jī)體的免疫功能和腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，當(dāng)機(jī)體免疫功能低下或缺陷時(shí)易患腫瘤，同時(shí)腫瘤也會(huì)產(chǎn)生很多物質(zhì)以抑制和削弱機(jī)體的抗腫瘤免疫功能，建造適合腫瘤自身發(fā)展的微環(huán)境，因此免疫功能的強(qiáng)弱與腫瘤的發(fā)生發(fā)展互為因果，腫瘤患者往往存在免疫功能的異常［19-20］。因此提高腫瘤患者的免疫功能是腫瘤治療的一個(gè)重要方面［21］。牛磺酸是淋巴細(xì)胞中含量最高的游離氨基酸，占淋巴細(xì)胞中自由氨基酸的50%。但淋巴細(xì)胞本身不能合成牛磺酸，主要由細(xì)胞外攝入到細(xì)胞內(nèi)，因此細(xì)胞外的牛磺酸濃度對(duì)于細(xì)胞的保護(hù)起到重要作用。牛磺酸對(duì)細(xì)胞的保護(hù)作用機(jī)制主要是作為過(guò)氧化物清除劑，清除細(xì)胞內(nèi)的自由基，從而減輕順鉑等化療藥物對(duì)細(xì)胞的氧化損傷作用。本研究的結(jié)果表明順鉑可明顯降低荷瘤小鼠的脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)、T細(xì)胞和B細(xì)胞的增殖能力以及IL-2、IFN-γ和TNF-α的分泌水平，而順鉑聯(lián)合不同劑量的牛磺酸后可明顯改善順鉑對(duì)荷瘤動(dòng)物免疫功能的損傷作用。值得注意的是，中、高劑量的牛磺酸對(duì)免疫器官指數(shù)、T細(xì)胞增殖能力以及IL-2、IFN-γ和TNF-α分泌水平的作用最顯著，但高劑量的牛磺酸對(duì)B細(xì)胞增殖能力反而起一定抑制作用，與石友斐等［22］的報(bào)道基本一致，至于牛磺酸是否通過(guò)抑制“增強(qiáng)性抗體”的產(chǎn)生而發(fā)揮抗腫瘤作用還有待進(jìn)一步研究證實(shí)。

此外，有研究表明牛磺酸還可直接抑制腫瘤細(xì)胞的增殖。薛美蘭等［23］研究表明牛磺酸可抑制二甲基苯蒽誘發(fā)的大鼠乳腺癌，其作用機(jī)制與增強(qiáng)機(jī)體免疫、抗氧化、促進(jìn)DNA損傷修復(fù)和抑制腫瘤細(xì)胞增殖等有關(guān)。Luckert等［24］研究表明來(lái)源于牛磺酸的衍生物——牛磺羅定在體外選擇性地抑制人神經(jīng)母細(xì)胞瘤SK-N-BE（2）-M17和SK-N-SH細(xì)胞系的增殖，而對(duì)正常臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞則沒(méi)有抑制作用。Zhang Xiali等［25］研究表明牛磺酸可誘導(dǎo)人結(jié)腸癌細(xì)胞系凋亡，其作用機(jī)制與調(diào)節(jié)p53正向凋亡調(diào)節(jié)因子基因PUMA（p53-upregulated modulator of apoptosis）有關(guān)。本研究結(jié)果表明，順鉑聯(lián)合牛磺酸在小鼠體內(nèi)可明顯抑制腫瘤的生長(zhǎng)，其機(jī)制是否與其直接抑制腫瘤細(xì)胞的增殖有關(guān)還有待進(jìn)一步研究。

綜上所述，牛磺酸可改善順鉑對(duì)機(jī)體免疫功能的損傷作用，并具有一定的直接抗腫瘤作用，可以考慮用作腫瘤病人的飲食添加劑，可作為腫瘤輔助治療的手段。

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Protection of Taurine against Cisplatin-Induced Damage of Immune Organs and Lymphocytes in H22Tumor-Bearing Mice

GUO Jie，WANG Bei*，RONG Ruixue，CAO Zhiran*
（School of Basic Medicine，Hebei University，Baoding071000，China）

Objective：To determine the protective effect of taurine on immune function of tumor-bearing mice subjected to cisplatin chemotherapy.Methods：The H22tumor-bearing mice were randomly divided into five groups：tumor model group，cisplatin chemotherapy group（1.5mg/（kg·d），cisplatin plus high-dose taurine（640mg/（kg·d）group，cisplatin plus middle-dose taurine（320mg/（kg·d）group，and cisplatin plus low-dose taurine（160mg/（kg·d）group.At24hours after the last administration，all the mice were killed by eye bleeding.Then we observed the changes in body weight，tumor mass，spleen index，thymus index，serum interleukin-2（IL-2）level，tumor necrosis factor-α（TNF-α），interferon-γ（IFN-γ），and the proliferation of thymus dependent lymphocytes（T cells）and bone marrow dependent lymphocytes（B cells）.Results：The body weights and tumor mass of the mice from cisplatin chemotherapy group were significantly lower than those from tumor model group，and the tumor inhibition rate of cisplatin chemotherapy group was36%.While the body weights of the mice from cisplatin plus middle-dose taurine group and cisplatin plus high-dose taurine group were both significantly higher than those from cisplatin chemotherapy group，and the tumor inhibition rate were51%and68%，respectively.Moreover，the spleen mass and spleen index of the mice from cisplatin group were significantly lower than those from tumor model group，while the spleen mass and spleen index of the mice from cisplatin plus various dosage taurine groups were significantlyhigher than those from cisplatin treatment group.The thymus mass and thymus index of the mice from cisplatin treatment group were significantly lower than those from tumor model group，and the thymus mass and thymus index of the mice from cisplatin plus high-dose taurine group were significantly higher than those from cisplatin treatment group.The serum interleukin-2，IFN-γand TNF-αlevels of the mice from cisplatin treatment group were significantly lower than those from tumor model group（P <0.01）.In addition，compared with the cisplatin treatment group，the serum interleukin-2，IFN-γand TNF-αlevel of the mice from cisplatin plus various dosage taurine groups were higher.What’s more，cisplatin treatment could obviously inhibit the proliferation of T cells and B cells.The stimulation index of T cells from cisplatin plus highdose taurine group was obviously higher than that from cisplatin chemotherapy group（P <0.05），while the stimulation index of B cells from both cisplatin plus low-dose and middle-dose taurine groups were obviously higher than that from cisplatin chemotherapy group.Conclusion：Taurine could exert a synergistic effect with cisplatin to inhibit tumor growth，which was achieved by protecting the damage of immune organs and lymphocytes caused by cisplatin chemotherapy.

taurine；tumor；chemotherapy；immune function

2014-07-17

保定市科技局資助項(xiàng)目（11ZF010）；河北大學(xué)青年基金項(xiàng)目（2008Q069）

郭杰（1983—），男，講師，學(xué)士，研究方向?yàn)槊庖咚幚怼-mail：g_man@qq.com

王蓓（1978—），女，講師，碩士，研究方向?yàn)槊庖咚幚怼-mail：wp780203@163.com曹志然（1963—），女，教授，碩士，研究方向?yàn)槊庖咚幚怼-mail：13933220632@163.com

R392.5；R977.4

A

1002-6630（2015）05-0200-05

10.7506/spkx1002-6630-201505038