榮俊冬,張迎輝,薛藝敏,王珍添,陳凌艷,鄭郁善,
(1.福建農(nóng)林大學(xué)林學(xué)院,福建 福州 350002; 2.福建農(nóng)林大學(xué)園林學(xué)院,福建 福州 350002 )
福建山櫻花總RNA提取方法比較分析
榮俊冬1,張迎輝2,薛藝敏2,王珍添2,陳凌艷2,鄭郁善1,2
(1.福建農(nóng)林大學(xué)林學(xué)院,福建 福州 350002; 2.福建農(nóng)林大學(xué)園林學(xué)院,福建 福州 350002 )
以福建山櫻花嫩葉為試驗(yàn)材料,采用Trizol法、CTAB法、CTAB-LiCl法、百泰克試劑盒法和天根試劑盒法5種方法提取福建山櫻花葉片RNA,用瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)總RNA的完整性,以微量紫外分光系統(tǒng)檢測(cè)總RNA的純度和濃度。結(jié)果表明:Trizol法和天根試劑盒法不適于福建山櫻花葉片RNA的提取;CTAB法和百泰克試劑盒法提取的RNA完整性好,純度及濃度高,但百泰克試劑盒法提取的RNA有DNA污染;CTAB-LiCl法提取的RNA濃度低,且含雜質(zhì)。RT-PCR試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)一步表明CTAB法提取的RNA能夠用于后續(xù)的分子生物學(xué)研究,是福建山櫻花葉片RNA提取的最佳方法。
福建山櫻花;總RNA;提取方法
福建山櫻花(PrunuscampanulataMaxim.)為薔薇科櫻屬落葉喬木,花呈鐘狀下垂開展,顏色濃艷,花期早,每年春節(jié)前后開花,花期長(zhǎng)達(dá)50 d,極具觀賞價(jià)值[1];且抗逆性強(qiáng),適應(yīng)性廣,為園林綠化中不可多得的優(yōu)良鄉(xiāng)土觀賞植物[2]。目前對(duì)福建山櫻花及其近緣種的研究多集中在群落學(xué)特征、開花生物學(xué)、種源遺傳多樣性,以及引種適應(yīng)區(qū)、繁殖技術(shù)、觀賞性評(píng)價(jià)等方面[3]。而關(guān)于福建山櫻花的分子生物學(xué)研究則鮮見報(bào)道。從分子水平研究基因變化,進(jìn)行基因調(diào)控和定向分子育種,繁殖和培育出符合人們要求的優(yōu)良品種,是福建山櫻花今后研究的重要內(nèi)容。……