高效液相色譜串聯質譜法測定韭菜中16種有機磷農藥殘留

招鈺娟　鄧曉華　甘沛明　梁雪琪　黎小鵬

摘 要：建立了韭菜中16種有機磷農藥殘留的液相色譜串聯質譜的分析方法，本實驗對2種前處理方法進行考察，線性范圍在 0.5～20 ng/mL，線性相關系數 0.991～0.999 之間。使用 Agilent Bond Elut QuEChERS 試劑盒以及 NY/T761-2008的前處理方法分別對韭菜進行前處理，QuEChERS 方法回收率在 71.23%～100.37% 之間，國標前處理方法回收率在 70.49%～108.32%。結果表明，QuEChERS 方法具有操作簡便快速、準確率高、重復性好等優點。

關鍵詞：有機磷；液質聯用；韭菜；QuEChERS

中圖分類號：O657.7 文獻標識碼：A DOI：10.11974/nyyjs.20161017001

1 前言

食品的質量安全近年來在我國引起了高度重視，隨著有機磷殺蟲劑的品種日益爭奪，造成了該農藥在環境、農作物中的殘留。蔬菜中基質復雜，農藥殘留量低，干擾因素多，主要殘留成分不易分離、富集和純化，因而相關農藥檢測不準確。[1、2]樣品前處理中目標物的提取、基質凈化方法的選擇與優化成為農藥多殘留檢測的關鍵。NY/T761-2008[3]的前處理方法是一個成熟的方法，但是前處理耗時長。而QuEChERS[4.5]（Quick、Easy、Cheap、Effective、Rugged、Safe）方法是近年來國際上最新發展起來的一種用于農產品農藥殘留檢測的快速樣品前處理技術，此方法快捷簡便。因此本次實驗采用基質復雜的韭菜為樣品以NY/T761-2008和QuEChERS的前處理方法進行比對，液相色譜串聯質譜快速檢測韭菜中有機磷農藥殘留。

2 實驗部分

2.1 儀器與試劑

Agilent 1200 液相色譜6410 QQQ（美國安捷倫公司）；搖床、T26 勻漿機（IKA 公司）；高速冷凍離心機 3K30（SIGMA 公司）；MUL-TIV APTM 氮吹儀（Organomation 公司）；Agilent Bond Elut QuEChERS 試劑盒（含PSA和GCB）；Agilent Florisil 500mg 6cc。

甲酸、乙腈均為色譜純，由德國 Merck 公司生產；乙腈、丙酮、正己烷、氯化鈉等均為分析純，由廣州分析化學試劑廠生產；實驗用水為屈臣氏。甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧樂果、久效磷、敵百蟲、樂果、敵敵畏、殺撲磷、亞胺硫磷、甲基對硫磷、馬拉硫磷、三唑磷、喹硫磷、倍硫磷、治螟磷、毒死蜱標準品（農業部環境保護監測所，濃度為 100 mg/L）。

2.2 液相條件

Agilent Poroshell 120 SB-C18 （2.1x100 mm， 2.7μm）；流動相組成及梯度如表 1 所示；柱溫 45℃；流速為 0.3 mL/min；進樣量 10 μL。按表1梯度洗脫。

2.3 質譜條件

電離方式：ESI+，檢測模式：多反應檢測 （MRM），毛細管電壓：4000V，干燥氣流量 10 L/min，干燥氣溫度：350℃，霧化器壓力 50 psi，定性離子對、定量離子對及碰撞能量見表 2。

2.4 樣品處理

2.4.1 NY/T761-2008前處理法

稱取 25g 的韭菜樣品，加入 25 mL 乙腈，勻質機勻漿，10000 rpm 4℃ 冷凍離心 5 min，吸取 10 mL 樣品50℃氮吹至盡干，2mL正己烷定容，旋渦震蕩，待凈化。

凈化：5 mL丙酮+正己烷（1：9）活化Florisil柱，下接10mL試管把待測樣品全部轉移至Florisil柱中，用5mL丙酮+正己烷（1：9）分2次洗滌試管并把溶劑倒入spe中，負壓抽干，50℃氮吹至近干。

2.5 mL 初始流動相定容，漩渦震蕩 1 min，10000 rmp/min 4 ℃離心 5 min，倒入樣品瓶中，上機檢測。

2.4.2 QuEChERS 前處理法

稱取 10 g 的韭菜樣品，加入 10 mL冰凍乙腈，勻質機勻漿，加入陶瓷均質子，加入 Agilent Bond Elut QuEChERS 提取鹽包，劇烈震蕩 3min，10000 rpm 4℃冷凍離心 5 min，全部上清液倒入有陶瓷均質子的分散固相萃取管中，劇烈震蕩 3min，漩渦 1min，10000 rpm 4℃冷凍離心 5min，吸取 0.2mL 樣品，初始流動相定容到 1mL，上機檢測。

3 結果與討論

3.1 液相色譜柱選擇

色譜條件優化分別使用 Poroshell 120 SB-C18 （2.1×

100 mm，2.7μm）色譜柱（圖1）、ZORBAX SB-C18（2.1×

150mm，3.5μm）（圖2）和 Atlantis T3（2.1x150mm，3.5μm）（圖3），由圖 1可知，采用 Poroshell 120 SB-C18 色譜柱對 16 種有機磷農藥進行分離時，色譜峰的分離效果最好，而且分離時間短。

3.2 樣品前處理方法

本次實驗使用2種前處理方法來對韭菜樣品進行檢測，韭菜樣品中雜質成分較為復雜，NY/T761-2008前處凈化效果（見圖4黑色基線），紅色基線則是QuEChERS（含PSA和GCB），由此證明，含有PSA和GCB的QuEChERS

比NY/T761-2008前處凈化效果要優。

3.3 線性范圍和相關系數

在該試驗條件下標準溶液的濃度在0.5ng/mL、1ng/mL、2ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL各取10uL進樣，記錄色譜圖，線性方程和相關系數見表3。

3.4 回收率和精密度

以各物質的特征離子色譜峰信噪比S/N>10算出定量限，空白樣品，分別加入濃度為10、20、40 ug/kg的混合標準品，做2平行實驗，詳見表4。

4 結論

本實驗建立了韭菜中16種有機磷農藥殘留的液相色譜串聯質譜檢測方法，采用2種前處理方法對加標樣品進行分析。結果表明QuEChERS 方法比國標方法的提取效率高，凈化效果好，靈敏度高、重現性好，適用于韭菜有機磷農藥殘留檢測的實際工作需要。

參考文獻

[1]張一賓，張懌.農藥[M].北京：中國物資出版社， 1997：

55 -60.

[2]達晶，王鋼力，曹進，張慶生.QuEChERS液相色譜-串聯質譜法測定植物性食品中30種氨基甲酸酯類農藥殘留[J].色譜（Chinese Journal of Chromatography），2015，8（33）：830-837.

[3]NY/T 761-2008，蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農藥多殘留的測定[S].

[4]Dimitra A L，Triantafyllos A A[J]. Anal Bioanal Chem，2007（389）：1663.

[5]Angelika B，Marek B. Food Chem[J].2008，108（2）：6694.