不同包衣維C銀翹片中對乙酰氨基酚體外溶出度比較研究

安斯揚，胡芳，蔣坤，李星，陽璘魁，潘玉杰，

1.貴州百靈企業集團制藥股份有限公司，貴州 安順 561000；2.貴州大學生命科學學院，貴州 貴陽 550025

維C銀翹片是由金銀花、連翹、對乙酰氨基酚、馬來酸氯苯那敏、維生素C等13味藥組成的中西復方制劑，具有疏風解表、清熱解毒的功效[1]?，F將維C銀翹片糖衣片改薄膜衣片后，為了確保藥品的一致性，針對它們同為固體口服制劑的共性，擬通過藥物的體外溶出度來預測其體內的行為[4]。本文以本公司已上市銷售的維C銀翹片糖衣片為參照，對糖衣片、薄膜衣片進行體外溶出度曲線考察，以對乙酰氨基酚為其中一項考察指標，考察產品在溶出時間內的累積溶出情況，進而計算比較維C銀翹片薄膜衣片和已上市的維C銀翹片糖衣片藥品質量的一致性。

1 儀器與試樣

1.1 儀器 Agilent Technologies 1260 In f i nity高效液相色譜儀(G1314F 1260VWD檢測器)，ZRS-8G溶出試驗儀(天津市天大天發科技有限公司)。

1.2 對照品 對乙酰氨基酚化學對照品(購自中國食品藥品檢定研究院，純度：100.0%，批號10018-200408)；

1.3 供試品 維C銀翹片糖衣片供試品(批號：20120219、20120220、20120221)、維C銀翹片薄膜衣片供試品(批號：101101、101102、101201)、維C銀翹片糖衣片陰性樣品(不含對乙酰氨基酚)、維C銀翹片薄膜衣片陰性樣品(不含對乙酰氨基酚)，均為貴州百靈企業集團制藥股份有限公司生產。

1.4 試劑 甲醇(HPLC，TEDIA)；純凈水(娃哈哈)；冰醋酸(AR 500m L/瓶，上海申博化工有限公司)；鹽酸(AR 500m L/瓶，重慶川東化工(集團)有限公司化學試劑廠)

2 方法與結果

2.1 樣品含量測定 參照中國藥典[1]方法，并對1.3項中的供試品的含量先進行測定，結果表明，維C銀翹片糖衣片每片含對乙酰氨基酚(C8H9NO2)95.4～95.9m g，維C銀翹片薄膜衣片每片含對乙酰氨基酚102.8～103.5mg，均符合規定 [即每片含對乙酰氨基酚(105mg)應為標示量的90%～110%]。

2.2 溶出條件 以0.1m o l/L的500m L HCL為溶出介質，溫度控制在37℃±0.5℃，轉速75r/m in[2-3]，供試品進入釋放池瞬間開始記時，糖衣片在127m in、薄膜衣在120m in時取樣3m L，立即過濾，取續濾液10μL進樣，通過HPLC測定其峰面積及其含量。

2.3 溶出度測定方法的建立

2.3.1 對照品的制備 取對乙酰氨基酚對照品適量，加0.1mol/L的HCL溶液溶解并稀釋成每m L含對乙酰氨基酚86.8 μg的溶液。

2.3.2 測定波長的選擇 取2.3.1項下對乙酰氨基酚對照品溶液在190～900nm下進行全波段的掃描，最大吸收波長是249nm。

2.3.3 色譜條件 Agilent Technologies 1200 series高效液相色譜儀(G1315D DAD檢測器)，色譜柱為Dikma C18柱(250mm×4.6mm，5μm)；流動相為甲醇-0.5%冰醋酸溶液(20:80)；檢測波長249nm；柱溫為25℃；流速為1m L/m in；進樣量10μL。理論塔板數按對乙酰氨基酚計算應不低于1500。在此色譜條件下測定對乙酰氨基酚對照品、樣品、空白樣品。

2.3.4 專屬性試驗 取維C銀翹片糖衣片供試品、維C銀翹片薄膜衣片供試品、維C銀翹片糖衣片陰性樣品、維C銀翹片薄膜衣片陰性樣品各一片，按照2.2項溶出條件制備溶出供試品溶液，以對乙酰氨基酚對照品溶液為參照，通過HPLC測定。在相同的保留時間下，維C銀翹片糖衣片和薄膜衣片的供試品溶液可檢出對照品對應的色譜峰，陰性溶液檢不出對照品相應的色譜峰，說明專屬性良好，見圖1。

圖1 對乙酰氨基酚對照品Fig1 The HPLC chromatogram chart

2.3.5 線性關系考察 精密稱取對乙酰氨基酚對照品適量，制成316μg/m L的對照品儲備液W 1；精密量取W 1適量，制成濃度為0.32，6.32，15.80，31.60，94.80，158.00，252.80，316.00μg/m L的溶液，經HPLC測定，以對乙酰氨基酚的濃度C(μg/m L)為橫坐標(x)，以相應的峰面積A為縱坐標(y)，進行線性回歸?；貧w方程為y=36.876x+6.8619，r=0.9999，其線性范圍為0.0032 μg～3.1600 μg。

2.3.6 準確度試驗 取維C銀翹片糖衣片陰性樣品、維C銀翹片薄膜衣片陰性樣品各6份，每份一片，并精密稱取對乙酰氨基酚對照品12份，每份105m g，待用。按照2.2項溶出條件，將一片陰性樣片和一份對乙酰氨基酚對照品同時放入釋放池，并同時開始記時，糖衣片在127m in、薄膜衣在120m in時取樣3m L，立即過濾，取續濾液10μL進樣，通過HPLC測定其峰面積及其含量，糖衣片、薄膜衣片加樣回收率平均值分別為100.7%、100.8%，RSD分別為0.20%、0.26%，可知供試品在該色譜條件進行測定的準確度高。

2.3.7 精密度試驗

2.3.7.1 儀器精密度試驗 取2.3.1項下制備的對乙酰氨基酚對照品溶液，將其連續進樣6次，測定對乙酰氨基酚的峰面積平均值為3403.8±3.69，RSD=0.1%，表明本儀器的精密度良好。

2.3.7.2 方法精密度試驗 取維C銀翹片糖衣片和薄膜衣片的供試品各一片，按照2.2項溶出條件制備溶出供試品溶液，取同一供試品溶液連續進樣6次。結果表明，在溶出介質中，維C銀翹片糖衣片中的對乙酰氨基酚峰面積平均值為8235.5±5.95，RSD=0.07%，維C銀翹片薄膜衣片中的對乙酰氨基酚峰面積平均值為8545.6±5.12，RSD=0.06%，表明本試驗方法的精密度良好。

2.3.8 重復性試驗 取同一批號的維C銀翹片糖衣片和薄膜衣片樣品各5份，每份一片，按照2.2項溶出條件制備溶出供試品溶液。結果表明，在溶出介質中，維C銀翹片糖衣片中的對乙酰氨基酚峰面積平均值為8197.2±29.2，RSD=0.36%，其平均溶出量104.4～105.1m g/片；維C銀翹片薄膜衣片中的對乙酰氨基酚峰面積平均值為8596.7±29.9，RSD=0.35%，其平均溶出量109.5～110.2m g/片，表明本試驗重復性良好。

2.3.9 穩定性試驗 取維C銀翹片糖衣片和薄膜衣片的供試品各一片，按照2.2項溶出條件制備溶出供試品溶液，取同一供試品溶液，分別在0，2，4，8，12，18，24h進樣。結果表明，在溶出介質中，維C銀翹片糖衣片中的對乙酰氨基酚峰面積平均值為7756.4±59.45，RSD=0.77%，維C銀翹片薄膜衣片中的對乙酰氨基酚峰面積平均值為8186.8±53.71，RSD=0.65%，表明本試驗條件下的供試品溶液在24 h內穩定。

2.3.10 耐用性試驗 取同一批號的維C銀翹片糖衣片和薄膜衣片供試品各一片，按照2.2項溶出條件制備溶出供試品溶液，通過對其進行耐用性試驗的考察，結果得知：其在不同流速、不同流動相比例、不同柱溫、不同檢測波長、不同色譜柱、不同檢測設備條件下，經HPLC含量測定結果穩定。

2.3.11 濾膜干擾試驗 取2.3.1項下制備的同一對乙酰氨基酚對照品溶液，考察經0.45μm濾膜過濾前后，峰面積的變化情況。結果表明，使用濾膜過濾不會對對乙酰氨基酚的含量測定造成干擾。

2.4 溶出度實驗

2.4.1 溶出曲線均一性的考察 取同批次的維C銀翹片糖衣片、薄膜衣片供試品各6片，以2.2項為溶出條件，分別在設定的采集時間(見2.4.2)取溶液3m L(不補液)，立即過濾，取濾液10μL進樣，在2.3.2項下通過HPLC測定峰面積，計算各樣品中對乙酰氨基酚在各個時間點的累積溶出量(m g)及其相應的累積溶出率(%)、同批次供試品的平均累積溶出率(%)。

2.4.2 時間點采集 自樣品進入釋放池瞬間開始記時，以包衣層脫落作為取樣時間點，為取樣采集時間點的第0m in。薄膜衣片溶出2m in后，其包衣層基本脫落，選取溶出1m in、2m in、3m in測定其對乙酰氨基酚百分含量：1m in時溶出0.78%、2m in溶出1.16%、3m in溶出7.56%；糖衣片溶出約9m in后，其包衣層基本脫落，選取5m in、8m in、9m in測定其對乙酰氨基酚百分含量：5m in時溶出0、8m in溶出0.20%、9m in溶出5.23%。因此糖衣片從9m in、薄膜衣片從2m in起分別記作相似性考察的采集時間點第0分鐘，考察兩者第0，3，6，8，10，13，18，23，28，38，48，58，73，88，118分鐘所采集樣品的情況。

2.4.3 溶出曲線的批間差異 統計各取3批維C銀翹片糖衣片、薄膜衣片供試品，按照2.4.1項下溶出曲線均一性的考察，進行樣品制備及測定，結果見表1和圖2。

2.4.4 不同規格的體外溶出曲線 相似性考察將上述

2.4.3項下所得的維C銀翹片糖衣片的平均累積溶出率Rti作為參照，將維C銀翹片薄膜衣片的平均累積溶出率Tti作為考察對象，分別對三個批次的供試品進行考察，根據FDA判定溶出度曲線相似性的相似因子比較法——計算差異因子f1和相似因子f2，考察兩種規格間化藥成分對乙酰氨基酚的平均累積溶出曲線的相似性[5-6]，見表2。

其中n為時間點個數，R t為參照批次(改變前)藥品在時間t的溶出度值，T t為試驗批次(改變后)藥品在時間t的溶出度值。

表2 維C銀翹片糖衣片、薄膜衣片對應采樣時間點對乙酰氨基酚平均累積溶出率曲線相似性比較結果Tab2 The average cumulative solubility curve sim ilarity of acetaminophen between the sugar-coated tablets and film-coated tablets of Vitamin C Yinqiao Tablet

圖2 三批次維C銀翹片糖衣片、薄膜衣片對應采樣時間點對乙酰氨基酚的平均累積溶出率曲線相似性比較圖Fig2 The average cumulative dissolution curve similarity comparison chart of acetam inophen in three batches of sugar-coated tablets and film-coated tablets of Vitam in C Yinqiao Tablet

3 結論

本文是為了模擬維C銀翹片在人體的溶出條件，因此采用0.1m o l/LHCL溶液作為溶出介質?？紤]到溶出曲線繪制需要從0m in開始采樣的特點，開始時濃度較小，為利于含量測定，故采用溶出介質的體積為500m L。經試驗500m L介質滿足漏槽條件。通過數據得知：以供試品進入釋放池瞬間開始記時，維C銀翹片糖衣片、薄膜衣片在60m in內對乙酰氨基酚的溶出率均在85%左右；糖衣片在97m in、薄膜衣片在90m in的溶出率趨于99%，鑒于對乙酰氨基酚的含量比較穩定，試驗組將總溶出時間設定為糖衣片127m in、薄膜衣片120m in。此外，漿法轉速一般為50～75r/m in，通過對比，發現50r/m in時片劑有堆積現象，而采用75r/m in時則沒有，因此采用75r/min。

本公司的維C銀翹片薄膜衣生產工藝與已上市的維C銀翹片糖衣片的片芯生產工藝基本一致，但由于包衣材料的不同，薄膜衣片的溶出在開始階段略快于糖衣片。但通過比較糖衣片和薄膜衣片中對乙酰氨基酚的溶出曲線，其體外溶出行為相似，沒有顯著差異。

試驗結果表明，本試驗提供的體外溶出曲線的采集方法穩定性好；經過三批次驗證，該方法可行性、重現性良好。

[1] 國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典(2010年版一部)[S]. 北京: 中國醫藥科技出版社, 2010. 1139-1141.

[2] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(2010年版二部)[S].北京: 中國醫藥科技出版社, 2010.附錄85-88.

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