在清潔驗證中不同材質(zhì)容器回收率對比分析

謝娜娜

摘要：清潔驗證是進行遺留物質(zhì)清除，較小交叉污染的一項驗證性活動。清潔驗證對于有效減小內(nèi)毒素以及微生物等方面的風險具有重要的意義。對于玻璃、不銹鋼以及塑料等不同材質(zhì)容器采用不同菌種進行回收率對比分析，論述了在清潔驗證中不同材質(zhì)容器回收率之間的關系，為提升清潔驗證工作的效果以及方法科學化提供了重要的參考。結(jié)論表明，無細胞百白破聯(lián)合疫苗及傷寒Vi多糖疫苗生產(chǎn)過程中對與產(chǎn)品相接觸的塑料、玻璃、硅膠、不銹鋼表面進行取樣采用的取樣方法是有效的。

關鍵詞：清潔驗證；不同材質(zhì)；容器；回收率

中圖分類號：TQ460文獻標識碼：A 文章編號：1672-3791（2015）06（a）-0000-00

清潔驗證活動要以可是實行較強的文件作為證據(jù)的一項驗證活動，其主要目的是對去除生產(chǎn)過程中遺留物質(zhì)的方法的有效性進行證明，并能夠最大程度減少微生物以及內(nèi)毒素交叉污染。回收率的驗證則主要是針對不同的清潔驗證對象對清潔中所采用的取樣方案進行的驗證活動。實踐過程中，驗證不同材質(zhì)的容器對于相同物質(zhì)取樣的有效性。文中主要是驗證了卡介苗等不同產(chǎn)品生產(chǎn)過程中與容器表明接觸取樣時，所應用取樣方案的科學性與有效性。

1.基本概念界定

1.1 清潔驗證

驗證方案是為了能夠得到相應的數(shù)據(jù)，在實施過程中以操作性文件為基本依據(jù)，對清除容器上的殘留物所使用的方法的有效性進行證明的實驗過程。其主要目的是盡量減少交叉污染的風險，在驗證過程中一般都采用不同的容器，針對特定的驗證對象進行對比分析，找出最優(yōu)的方案以及相應的流程。

1.2 回收率

容器使用后，會受到一定的污染，因此進行取樣方式有效性的考察方案驗證要對回收率進行必要的統(tǒng)計與研究。本例子主要考核在不同容器中回收率的數(shù)據(jù)對比。

1.3 其他概念

被測物，在清潔驗證活動中主要指的是最難清潔的殘留物；檢測限（LOD），樣品濃度分析過程中，可以被檢測到但不需要量化到精確值的最低量。定量限一般認為是在樣品濃度檢測過程中，檢測結(jié)果的精確性以及準確度要能夠有最低的保證（或者成為保證的最低量）；產(chǎn)品接觸表面，在清潔驗證活動中，與產(chǎn)品生產(chǎn)直接相關、與工藝過程直接相關等具有接觸的任何生產(chǎn)設備、容器等都屬于產(chǎn)品接觸表面的范疇（文章主要分析的是容器表面）；線性指的是在一定的檢測范圍內(nèi)，驗證過程獲取數(shù)據(jù)的能力。基本概念厘清后，對于驗證過程方案的確定以及驗證過程的準確實施以及效果評價具有重要的意義。

2 驗證方案的確定

2.1 驗證方案的期間準備階段

首先是目標殘留物的確定，根據(jù)選擇的基本依據(jù)，一般而言都是采用在生產(chǎn)過程中最難以清潔的物質(zhì)或者化學活性最強物質(zhì)作為待檢測的目標殘留物；其次要正確選擇合理的取樣方案，目前業(yè)內(nèi)通常的取樣方案有最終淋洗水取樣以及擦拭取樣兩種方案，在本次驗證中采用測定被測物的TOC濃度。制備被測物的稀釋液，并提交用于做TOC濃度檢測，測出稀釋液的TOC濃度。根據(jù)這些檢測結(jié)果，可以計算出未稀釋被測物的TOC濃度，并可用于之后回收率研究的TOC濃度計算；最后對檢測的數(shù)據(jù)與實際的規(guī)定值進行對比分析，確定取樣方案的有效性與科學性。

2.2 驗證方案的技術要求

明確的驗證方案對于整體的驗證過程具有重要的指導意義，在驗證方案起草中，要能夠包含以下幾個方面的內(nèi)容。驗證方案要符合驗證的技術需求，驗證必須符合科學、合理的檢驗要求，能夠為清潔驗證中殘留物的檢驗方法提供必要的依據(jù)；同時要根據(jù)殘留物的種類以及技術需求確定驗證的閾值大小，最后要能夠形成驗證小組，有效實施對于項目的驗證，并申請項目編碼。

3 不同材質(zhì)容器回收率分析

3.1 驗證過程中的原則要求

在驗證過程中，要能夠嚴格遵守以下的原則性要求，保證驗證的科學與準確性。所有的數(shù)據(jù)均需填入對應表格中，并簽署姓名和日期；實施本方案的人員均需在附件1的簽名頁簽名；在執(zhí)行本方案過程中遇到的所有不符合性或異常情況均需記錄到附件12不符合性描述中。所有的不符合項均需經(jīng)由QMS.MA8.3.0-S001《不符合性控制指南》處理；方案實施結(jié)束后，制作一份總結(jié)報告和數(shù)據(jù)分析，內(nèi)容包括測試數(shù)據(jù)或結(jié)果的總結(jié)、數(shù)據(jù)分析和驗證方案的結(jié)論；完成方案執(zhí)行可能需要復印方案的數(shù)據(jù)頁。 按實際需要復印并在每頁附件右上角注明頁碼，書寫方式為“X of Y”，X代表第幾頁，Y代表總頁數(shù)。標注頁碼號的人員必須在頁碼號后面簽名并寫上日期；接受此驗證要求，在實施過程中實施結(jié)果應符合本方案中所有部分的可接受標準，所有不符合項及糾正措施均有記錄。驗證“通過”或“失敗”取決于本方案中指定的可接受標準。

3.2 驗證過程

首先進行被測物信息的等級，以進行數(shù)據(jù)處理，其次進行被測物TOC濃度測定，在此過程中需要完成的工作主要由以下幾個方面，首先是被測物稀釋液的制備，用WFI作稀釋劑，制備一組被測物稀釋液（如，1：100， 1：10，000， 1：100，000，共3份樣品），盡量使被測物稀釋液的TOC濃度在TOC分析儀的線性操作范圍內(nèi)。在一個潔凈的TOC采樣瓶中加入約40 ml的WFI，并做相應編號，作為空白對照，同時將已編號的TOC采樣瓶送去做TOC濃度檢測，最后進行最大倍數(shù)稀釋液的檢測，如果檢測結(jié)果大于1 ppm C，應考慮是否放 棄檢測其它被測物稀釋液，以避免其它倍數(shù)稀釋液超出TOC分析儀的檢測限度，造成儀器損壞進行最大倍數(shù)稀釋液的檢測，如果檢測結(jié)果大于1 ppm C，應考慮是否放 棄檢測其它被測物稀釋液，以避免其它倍數(shù)稀釋液超出TOC分析儀的檢測限度，造成儀器損壞進行最大倍數(shù)稀釋液的檢測，如果檢測結(jié)果大于1 ppm C，應考慮是否放 棄檢測其它被測物稀釋液，以避免其它倍數(shù)稀釋液超出TOC分析儀的檢測限度，造成儀器損壞。

同時要進行被測物TOC濃度分析，收集的數(shù)據(jù)并記錄，如果沒有一個樣品的TOC濃度在分析儀的線性操作范圍內(nèi)，則重復操作，直至制備的被測物稀釋液TOC濃度在分析儀的線性操作范圍內(nèi)。用各個樣品的TOC濃度減掉空白對照TOC濃度，校正所有檢測值。

3.3 回收率檢測

使用微量移液器，吸取制備的被測物稀釋液1ml，均勻滴在設備樣板上，每種濃度滴三塊樣板。將樣板置于超凈工作臺中，使其過夜干燥（最少12小時但不超過36小時）。稀釋液應均勻分布于樣板上。均勻滴加稀釋液的方法。如圖1所示

圖1 均勻滴加稀釋液法示意圖

取與樣板數(shù)量等量的TOC采樣瓶，取制備的被測物稀釋液1ml加入到TOC采樣瓶中，用注射用水補充TOC采樣瓶內(nèi)溶液量至40ml。標記樣品做為被測物稀釋液陽性對照。 按照檢驗方法，對于濃度為10、20及40 ppm C的每份被測物稀釋液，都應獲取3份陽性對照樣品（總共9份）將所有樣品渦旋30秒以確保溶液混勻；提交陽性對照樣品進行TOC濃度檢測；獲取陽性對照結(jié)果并填至數(shù)據(jù)表。

4 數(shù)據(jù)處理及分析

質(zhì)量檢定室使用提供的樣品進行本試驗。試驗結(jié)果記錄在附件上，并反饋給驗證組。結(jié)果由驗證組進行評估。未符合可接受標準的試驗結(jié)果應標明“失敗”，并進行調(diào)查確定失敗原因。調(diào)查，根本原因，糾正和預防措施，以及結(jié)論應在不符合性記錄中進行概述。在達到以下驗收標準的情況下，該方案可以被認為已完成：已經(jīng)附上所有支持測試結(jié)果的數(shù)據(jù)。所有產(chǎn)生失敗步驟的偏差已經(jīng)得到解決和批準，并且已經(jīng)附在文件中。所有參與執(zhí)行此方案的人員都在簽名欄中簽名。對于可接受標準進行計算，分析在不銹鋼、玻璃等不同材質(zhì)下的回收率。通過統(tǒng)計分析得知，不同材質(zhì)的清潔驗證回收率在50-120%之間，符合驗證的目的。不同材質(zhì)回收率測定表格如圖2所示。

圖2不同材質(zhì)回收率測定表

5 結(jié)論

為了證明在生產(chǎn)過程中對與產(chǎn)品相接觸的塑料、玻璃、硅膠、不銹鋼表面進行取樣采用的取樣方法是有效的。采用了熟料、玻璃、不銹鋼扥各不同容器對卡介苗等生產(chǎn)過程中最難清除的殘留物進行了清潔驗證分析。驗證過程中，首先需要取確定最難清潔殘留物，在此基礎上根據(jù)驗證方案進行溶液的制備以及濃度的檢測，根據(jù)驗證工藝要求，與可接受標準進行比較，結(jié)論表明，不銹鋼等幾種不同材質(zhì)的容器回收率都符合驗證要求。

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