血管性認(rèn)知障礙的載脂蛋白E基因多態(tài)性

陳雪梅

[摘 要] 目的：分析血管性認(rèn)知障礙的載脂蛋白E基因多態(tài)性，為臨床診斷提供參考。方法：選取2010年8月～2013年2月我院收治的血管性認(rèn)知障礙患者90例為研究對象，其中腦出血患者45例，腦梗死患者45例。使用基因特異性多重聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)進(jìn)行APOE基因多態(tài)性測定。結(jié)果：血管性認(rèn)知障礙的患者以ε3/3基因最常見，但在腦出血、腦梗死中檢出率無明顯差異；腦出血患者ε2出現(xiàn)頻率更高于腦梗死組，腦梗死患者ε4出現(xiàn)頻率高于腦出血組，兩組比較差異明顯，P<0.05。結(jié)論：血管性認(rèn)知障礙的患者有APOE基因亞型改變，且以ε3/3基因最常見，推測在腦血管疾病患者中，攜帶有ε4患者更容易發(fā)生腦梗死傾向，而攜帶有ε2患者有更高腦出血傾向。

[關(guān)鍵詞] 血管性認(rèn)知障礙；APOE基因多態(tài)性

中圖分類號：R 743 文獻(xiàn)標(biāo)識碼： B 文章編號：2095-5200（2015）04-100-02

血管性認(rèn)知障礙是一組由血管因素所導(dǎo)致的認(rèn)知功能損傷，為臨床引起認(rèn)知障礙主要形式，且伴隨執(zhí)行控制功能損傷和記憶力降低[1]。血管性認(rèn)知障礙包括多種腦血管病因，如大血管的病變、小血管的病變等[2]。流行病學(xué)調(diào)查研究顯示，4%65歲以上老年人罹患有血管性認(rèn)知障礙[3]。我們研究分析了APOE基因多態(tài)性在血管性認(rèn)知障礙患者中情況，為早期診斷提供參考，報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2010年8月～2013年2月我院收治腦出血、腦梗死導(dǎo)致血管性認(rèn)知障礙患者90例為研究對象。所有患者均經(jīng)MRI等影像學(xué)確診。排除感染性疾病，意識障礙，失語，精神障礙等患者。45例腦出血患者中男性24例，女性21例，年齡54～77歲，平均（63.78±5.64）歲；45例腦梗死患者中男性25例，女性20例，年齡在56～76歲，平均（63.14±5.97）歲；兩組患者一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。

1.2 方法

兩組患者均采集空腹肘靜脈血EDTA-Na2抗凝。取500uL血液樣本加入到離心管內(nèi)，加入ERL Buffer，充分振蕩離心管，使白細(xì)胞重懸，高速振蕩促進(jìn)細(xì)胞裂解，加入蛋白酶、RnaseA等，以洗脫DNA。隨后將洗脫液加入結(jié)合柱中，置于離心管內(nèi)，高速離心，以洗脫DNA。使用多重聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)方法（ARMS-PCR）對APOE基因多態(tài)性進(jìn)行檢查。根據(jù)電泳結(jié)果判定載脂蛋白E基因型。

1.3 數(shù)據(jù)處理

所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)均使用SPSS19.0軟件包處理，計(jì)數(shù)資料組間比較使用χ?檢驗(yàn)。當(dāng)P<0.05時(shí)，表示實(shí)驗(yàn)樣本差異明顯且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

血管性認(rèn)知障礙患者以ε3/3基因最常見，但在腦出血、腦梗死兩組中檢出率無明顯差異；腦出血患者ε2出現(xiàn)頻率高于腦梗死組，腦梗死患者ε4出現(xiàn)頻率高于腦出血組，兩組比較差異明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。詳細(xì)結(jié)果見表1。

3 討論

腦血管性認(rèn)知障礙導(dǎo)致神經(jīng)損傷包括大血管梗死、小血管梗死、腦出血、腦白質(zhì)疏松、神經(jīng)膠質(zhì)增生等[4]。引起血管性認(rèn)知障礙危險(xiǎn)因素較多，包括人口學(xué)因素、血管性危險(xiǎn)因素、遺傳因素等，其中遺傳因素、人口學(xué)因素為不可干預(yù)性因素[5]。在遺傳因素中，目前臨床研究較為明確的是Notch3基因，為CADASIL缺陷基因，此基因突變會導(dǎo)致血管平滑肌變形。

近年來臨床學(xué)者研究提示載脂蛋白E（APOE）基因具有多態(tài)性，會加速動脈粥樣硬化形成，增加腦血管疾病發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。載脂蛋白E為富含有精氨酸一種堿性蛋白質(zhì)，是從血漿內(nèi)分離出一種具有結(jié)合、轉(zhuǎn)運(yùn)脂質(zhì)功能蛋白，其定位在19號染色體，由多個(gè)氨基酸殘基組成，是單鏈多肽糖蛋白，分子量為34145D [6-8]。APOE作為一種功能性蛋白，其主要由肝細(xì)胞、巨噬細(xì)胞合成，其編碼三種異構(gòu)體，包括ε2、ε3、ε4三種等位基因。這主要是由于112位、159位半胱氨酸、精氨酸互換[9]。這種基因多態(tài)性，導(dǎo)致人群內(nèi)有不同基因表型，如純體ε2/2，ε3/3和ε4/4，雜合體中則有ε2/3、ε3/4、ε2/4。其中以ε3最為常見。而ε2、ε4目前被認(rèn)為是突變型基因，對血脂、動脈硬化均有較大影響[10-13]。

APOE是神經(jīng)系統(tǒng)代謝重要因子，且髓鞘磷脂代謝與神經(jīng)元損傷修復(fù)也存在有明顯關(guān)系。在發(fā)生缺血性疾病等導(dǎo)致神經(jīng)病變、再生后，會導(dǎo)致APOE含量增加，并促進(jìn)膽固醇酯化，以促進(jìn)軸突膜生長[14-15]。而這種作用是ε3單體特異性，ε4并無此作用。本實(shí)驗(yàn)提示血管性認(rèn)知障礙患者以ε3/3基因最常見，但在腦出血、腦梗死中檢出率無明顯差異，P>0.05，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；腦出血患者ε2出現(xiàn)頻率更高于腦梗死組，腦梗死患者ε4出現(xiàn)頻率高于腦出血組，兩組比較差異明顯，P<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而大量臨床研究還發(fā)現(xiàn)，ε4患者神經(jīng)缺損程度明顯更為嚴(yán)重，因此推測有ε4存在，會加重神經(jīng)變性，使腦損傷修復(fù)困難。

綜上所述，血管性認(rèn)知障礙患者有APOE基因亞型改變，推測在腦血管疾病患者中，攜帶有ε4患者更容易發(fā)生腦梗死傾向，而攜帶有ε2患者有更高腦出血傾向。

參 考 文 獻(xiàn)

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