整合素αvβ3抑制劑RGDfv對(duì)人骨肉瘤F5M2細(xì)胞系增殖及凋亡的影響

王民，馬照雨，王瑩，劉建新，韓學(xué)哲

·臨床論著·

整合素αvβ3抑制劑RGDfv對(duì)人骨肉瘤F5M2細(xì)胞系增殖及凋亡的影響

王民，馬照雨，王瑩，劉建新，韓學(xué)哲

（西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院骨外科，西安，710061）

目的 研究整合素αvβ3抑制劑RGDfv對(duì)骨肉瘤細(xì)胞增殖及凋亡的影響。方法 通過(guò)MTT法檢測(cè)不同濃度RGDfv序列肽對(duì)F5M2細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的抑制作用；通過(guò)Western blot方法觀察經(jīng)RGDfv誘導(dǎo)48 h的F5M2細(xì)胞中凋亡蛋白cleaved Caspase-3的表達(dá)。結(jié)果 MTT法檢測(cè)結(jié)果顯示經(jīng)不同濃度RGDfv序列肽處理的F5M2細(xì)胞增殖受到抑制，OD值明顯減少，并且呈濃度及時(shí)間依賴性（P<0.05 or 0.01）；RGDfv處理后的F5M2細(xì)胞中，隨著RGDfv濃度的升高，cleaved Caspase-3的表達(dá)量也較對(duì)照組明顯增加（P<0.05）。結(jié)論 RGDfv序列肽能抑制F5M2細(xì)胞的增殖，并通過(guò)依賴于Caspase-3的通路誘導(dǎo)骨肉瘤F5M2細(xì)胞凋亡。

骨肉瘤，整合素，細(xì)胞增殖，細(xì)胞凋亡

整合素是一類細(xì)胞膜表面的糖蛋白受體家族分子，介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的增殖、凋亡、侵襲、轉(zhuǎn)移以及腫瘤血管的形成[1]。整合素αvβ3在骨肉瘤中高表達(dá)，而在良性骨腫瘤及正常骨組織中不表達(dá)，抑制整合素αvβ3能否影響骨肉瘤細(xì)胞的增殖和凋亡還不清楚。

本試驗(yàn)研究整合素αvβ3抑制劑RGDfv序列肽對(duì)F5M2細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的抑制作用，并探索對(duì)骨肉瘤細(xì)胞中凋亡因子caspase-3的影響。

1 材料與方法

1.1 細(xì)胞系 成骨肉瘤細(xì)胞系F5M2由第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院全軍骨科中心暨全軍骨腫瘤研究所提供。

1.2 主要試劑及藥物 整合素αvβ3抑制劑RGDfv購(gòu)自Enzo life science公司；DMEM高糖培養(yǎng)基購(gòu)自Hyclone公司；胎牛血清購(gòu)自杭州四季青生物制品公司；胰蛋白酶購(gòu)自Hyclone公司；Western blot試劑盒購(gòu)自西安晶彩生物科技有限公司；Caspase-3免抗人多克隆抗體購(gòu)自武漢博士德生物工程有限公司。其它生化試劑：青鏈霉素混合液、Tris堿、疊氮鈉、二甲苯、瓊脂、瓊脂糖、甲醇及異丙醇等為進(jìn)口或國(guó)產(chǎn)分裝試劑。……