黔東南州2015年“兩節”期間禽流感監測分析

趙孝木 汪忠榮莫興虎 楊先富 袁曉娟

廖 飛 吳通奎 姜 艷 楊 梅 黃功明

(黔東南州動物疫病預防控制中心,貴州凱里 556000)

黔東南州2015年“兩節”期間禽流感監測分析

趙孝木 汪忠榮*莫興虎 楊先富 袁曉娟

廖 飛 吳通奎 姜 艷 楊 梅 黃功明

(黔東南州動物疫病預防控制中心,貴州凱里 556000)

目的:了解禽流感病毒H5與H7亞型在不同場所外環境的分布狀況,切實做好“兩節”期間禽流感防控工作。方法:從養殖場、活禽交易市場、散養戶、環境采集樣品進行檢測。結果:熒光RT-PCR復核,764份樣品,H5亞型陽性數19份,陽性率為2.49%,H7亞型陽性數為零。H5亞型陽性分別來自交易市場和禽宰殺點。結論:黔東南州部分交易市場和禽宰殺點存在著H5亞型禽流感病毒,接觸禽類內臟及活禽交易市場和家禽屠宰點是感染禽流感的高危因素,應加強環境衛生整治,落實環境消毒,以減少H5亞型禽流感傳播至人的風險。

禽流感;血凝抑制試驗;熒光RT-PCR試驗

禽流感（AI）是由甲型禽流感病毒（AIV）任何一種血清亞型毒株引起各種家禽及野生禽類發生疫病的傳染性疾病，目前已知能感染人的有H5N1、H9N2、H7N7、H7N2、H7N3 亞型毒株。禽類作業環境可以增加感染禽流感病毒的危險性，禽類從業人群為感染禽流感的高危職業人群。為摸清黔東南州涉禽的不同場所免疫抗體合格率、H5和H7亞型病原污染情況，在全州開展禽流感免疫抗體和禽流感病原監測，努力確保2015年“兩節”期間不發生重大動物疫情，切實維護公共安全。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 診斷試劑

禽流感H5亞型血凝抑制抗原與陰、陽性血清（廠家：青島易邦生物工程有限公司，批號：2013002、2013002、2013002）；禽流感H7亞型血凝抑制抗原與陰、陽性血清（廠家：哈爾濱維科生物技術開發公司，批號：2014001、2014002、2014002）；禽流感H5亞型RT-PCR診斷試劑盒（廠家：北京世紀元亨動物防疫技術有限公司，批號AIVH520140807P），禽流感H7亞型RT-PCR診斷試劑盒（廠家：北京世紀元亨，批號AIVH720141007P），禽流感H7亞型抗原檢測卡（廠家：上海容暉生物科技有限公司，批號：GA14050404），以上試劑均由貴州省動物疫病預防控制中心提供。禽流感H5亞型抗原檢測卡（批號：20140104）購買于深圳康百得生物科技有限公司。

1.1.2 樣品采集

按照NY/T765-2004《高致病性禽流感樣品采集、保存及運輸技術規范》進行。2101份樣品分別采集自黔東南州轄區內養殖場、活禽交易市場、散養戶、禽宰殺點。

1.2 方法

1.2.1 禽流感抗體檢測

依據《高致病性禽流感防治技術規范》（GB19442－2004）用血凝抑制試驗（HI）對血清樣品進行H5和H7禽流感抗體檢測，嚴格按照診斷試劑說明書的要求進行操作，以完全抑制4個血凝單位抗原的血清最高稀釋倍數作為HI滴度。

1.2.2 禽流感快速檢測卡檢測

操作和結果判斷按試劑盒說明書進行。

1.2.3 禽流感核酸檢測

采用熒光定量RT-PCR試驗對快速檢測卡檢測出的陽性樣品和可疑樣品進行復核。操作參照試劑盒說明書進行，結果判定按《高致病性禽流感防治技術規范》執行。

2 結果

2.1 禽流感抗體檢測

來自不同采集點的樣品H5亞型抗體合格率不同（表1），養殖場的合格率最高91.67%，散養戶的合格率最低76.25%。

表1 禽流感血清樣本抗體檢測結果

2.2 禽流感快速檢測卡檢測

不同來源樣品H5亞型和H7亞型禽流感病原檢出率不同，其中禽宰殺點陽性率最高，陽性率為4.40%，詳見表2。

2.3 禽流感核酸檢測

用熒光定量RT-PCR對陽性樣品和可疑樣品進行復核，結果：H5亞型活禽交易市場3份陽性，禽宰殺點16份陽性；H7亞型全部為陰性，詳見表3。

3 分析與討論

禽流感免疫是防止禽流感發生和流行的主要方法，本次對黔東南州內多家種禽場、商品養禽場、活禽交易市場和散養家禽進行了免疫抗體檢測，對免疫抗體合格率不達標的及時進行補免，保證“兩節”期間在本轄區內不發生重大動物疫病。從檢測結果看，散養戶免疫合格率相對比較低76.25%。

禽流感病毒根據病毒表面血凝素（HA）抗原和神經氨酸酶（NA）抗原的不同，可分為不同血清型，感染人的禽流感病毒亞型主要為H5N1、H9N2、H7N7、H7N9，其中感染H5N1的患者病情重，病死率高。但目前人感染禽流感病例仍處于偶發、散發狀態，其感染來源的調查很難。2005年我國報告首例人禽流感病例，貴州省于2009年首次報告人禽流感病例，到2015年2月貴州省共報告7例人禽流感病例。本次調查通過對涉禽場所的監測，目的是進一步確定感染禽流感的高危因素，為確定感染來源與制定防控措施提供依據。監測結果顯示：19份禽流感H5亞型陽性樣品分別來自活禽交易市場和禽宰殺點，說明黔東南州部分交易市場和禽宰殺點被禽流感H5亞型病毒污染，應加強環境衛生整治，落實環境消毒，以減少H5亞型禽流感傳播至人的風險。

近年來，黔東南州雖然沒有發生禽類禽流感疫情和人感染禽流感病例，但黔東南州疾病預防控制中心和動物疫病預防控制中心在活禽交易市場和禽宰殺點先后都檢出禽流感H5亞型核酸陽性，此外相關報道在該州野鳥糞便中也檢測出禽流感H7亞型核酸陽性，說明該州在流通環節和野鳥棲息地存在禽流感疫情發生的風險。其相關部門要加強農貿市場規范化管理，嚴格執行衛生清潔、環境消毒和定期休市制度，加大綜合治理力度，改善家禽銷售和宰殺環境衛生狀況；動物衛生監督部門要按照禽流感防控相關規定，加強檢疫監管，嚴把市場準入關，堵住疫源；加強禽流感防控知識的宣傳，增強防護意識。從事家禽販運、交易、屠宰的從業人員以及經常購買禽類的群眾感染禽流感的風險較高，應加強對他們的健康教育宣傳，增強個人防護意識，盡可能減少感染機會；農業和衛生部門要建立和完善禽流感等重大疫病防控技術支撐體系，定期對流通環節進行監測，為禽流感防控工作決策提供科學依據。

表2 禽流感快速檢測卡檢測結果

表3 禽流感熒光RT-PCR檢測結果

[1] 韋小瓊.人禽流感研究進展及其對策策略[J].右江民族醫學院學報，2006，28（5）：860-862.

[2] 柳洋，王玉林，魯恩潔，等.2005年廣州市職業人群H5N1、H9N2血清學監測[J].華南預防醫學，2005，33（1）：27-28.

[3] 向妮娟，周蕾，懷揚，等. 2005-2009 年中國人禽流感（H5N1）病例流行病學特征分析[J].實用預防醫學，2010，17（6）：1070-1073.

[4] 鄧茂銘，王定明，周俊，等.1例人感染高致病性禽流感病例流行病學調查[J].預防醫學論壇，2010，16（4）：332-335.

[5] 楊金芝，梁永奎，李娜，等.貴陽市首例人禽流感病例的流行病學調查[J].現代預防醫學，2013，40（1）：13-15.

[6] 徐茂文，文明，熊朝麗，等.貴州省部分地區禽流感H7N9 型病毒核酸調查[A]. 中國畜牧獸醫學會家畜傳染病學分會第八屆全國會員代表大會暨第十五次學術研討會論文集[C].2013：751-754.

趙孝木（1966-），男，漢，貴州省正安縣人，本科，獸醫師，主要從事動物疫病防控研究。

汪忠榮（1978-），女，獸醫師，碩士，主要從事動物疫病診斷與防治研究。