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蒙藥紅花中羥基紅花黃色素A 在大鼠體內含量變化的實驗研究△

2015-07-12 09:05:54娜仁滿都拉白梅榮烏日漢
中國民族醫藥雜志 2015年6期
關鍵詞:血清實驗

娜仁滿都拉 白梅榮 烏日漢 桂 榮

(內蒙古民族大學蒙醫藥學院,內蒙古 通遼 028000)

紅花Carthamus tinctorius L 是蒙藥臨床常用的藥材之一。2004年版《中華本草.蒙藥卷》中收載,具有涼血,鎖脈,調經,清肝,強身,止痛,消腫作用[1]。大量資料顯示[2-10],羥基紅花黃色素A 有良好的抗腦缺血、神經細胞保護作用,抗血小板和抗心肌缺血作用,抗凝血酶誘導的血小板聚集活性,抗炎活性,細胞保護活性,抗腫瘤活性。

本實驗通過紅花測定不同時間點大鼠血清和肝組織的羥基紅花黃色素A 含量,以期為紅花保肝作用的研究奠定基礎。

1 材 料

1.1 實驗儀器:LC-20AT日本島津高效液相儀,包括UV檢測器,二元梯度泵,LC soLusion 色譜工作站;TD4 -I 型離心機(長沙);BS 224S 型電子天平(北京賽多利斯儀器有限公司)。

1.2 試劑與藥品:甲醇(天津市科密歐化學試劑有限公司);磷酸(分析純,天津市天力化學試劑有限公司);紅花(由內蒙古民族大學提供)。

1.3 實驗動物:雄性SD 種大鼠40 只,體重為200 ±10g ,由長春市億斯實驗動物技術有限責任公司提供,SCKK(吉)-2011 -0004。

2 方 法

2.1 樣品采集:按體重將大鼠隨機分為10 組,每組6 只,實驗前禁食不禁水的條件下,按3.87g/kg 灌胃給予大鼠紅花溶液,分別于灌胃后10min,30min,45min,1h,1.5h,2h,3h,4h,8h 以10% 水合氯醛麻醉大鼠,腹主動脈取血,3000r/min 離心10min,分離血清,同時取出肝組織,用生理鹽水沖凈組織表面血跡及內容物,拭干,裝入自封袋中,-80℃保存,備測組織中指標性成分。

2.2 血清和組織樣品的處理及其供試品溶液的制備:準確稱取肝臟重量,按重量(g):體積(mL)=1:4 的比例加入4倍體積的生理鹽水,冰水浴條件機械勻漿,3000r/min,離心10 分鐘,取上清液,待測備用。

分別取空白及10min,30min,45min,1h,1.5h,2h,3h,4h,8h 的含藥血清和肝組織勻漿液各2mL,加甲醇4mL[11],渦旋混勻30s,10000r/min 的條件下離心10min,取上清液,吹干,殘渣以200μL 甲醇溶解,過0.22μm 微孔濾膜,25μL進樣分析。

2.3 色譜條件:色譜柱為VenusiL MP C18 (4.6mm ×300mm,5μm),柱溫為30℃,流速為1mL/min;進樣量25μL,流動相為甲醇(A)-0.7%磷酸水溶液(B),檢測波長為390nm。洗脫程序10% ~25%A(0 ~10min),25% ~40%A(10 ~15min),40% ~45% A(15 ~20min),45% ~50%A(20 ~30min),50% ~55% A(30 ~40min),55% ~70%A(40 ~60min),70% ~75% A(60 ~65min),75% ~85%A(65 ~70min),80% ~100%A(70 ~75)。

3 實驗結果

3.1 大鼠肝組織中羥基紅花黃色素A 含量分析:肝組織中已檢測到羥基紅花黃色A。10min 時最低,3h 時最高,8h時也能檢測到羥基紅花黃色素A,不同時間的峰面積詳見下表1。

10min 30min 45min 1h 2h 3h 4h 8h峰面積19052 20492 46655 49342 58966 154119 30873 15739時間

3.2 血清中羥基紅花黃色素A 含量變化分析:血清中已檢測到羥基紅花黃色A。10min 最低,1h 時最高,8h 檢測不到羥基紅花黃色素A,不同時間的峰面積詳見下表2。

10min 30min 45min 1h 2h 3h 4h 8h峰面積時間30617 42770 76174 344282 172378 74388 43382 -

4 結論與討論

紅花具有保肝作用的蒙藥材之一,蒙醫學是以三根學說(赫依、希拉、巴達干)(近似中醫的氣、熱、寒)解釋機體生理和病理現象,而蒙藥是蒙醫防治疾病的有力武器。大部分蒙藥材來源與中藥材相同。蒙藥主要以蒙醫基礎理論和蒙藥藥性理論為指導,在加工制作和用法上具備了蒙藥特色。即蒙藥以十七種效能來補偏救弊,調整機體內部的“三根”的偏盛和偏衰,可達到防病、治病和健身的目的。紅花雖然是中蒙藥通用的藥材,但在蒙藥藥性理論和蒙醫基礎理論的指導下,在肝臟疾病的治療中發揮著重要的作用。因而被譽為“肝臟之好”的美名。大量的臨床資料也均證實,紅花為君藥的蒙藥復方制劑是肝臟的急性和慢性疾病的首選藥物。

傳統藥多為口服給藥,給藥后藥物從給藥部位吸收進入血液后,有循環系統運送到體內各臟器及靶點而達到藥效目的。據文獻報道,羥基紅花黃色A 是保肝作用的主要成分之一,有效成分通過血液分布到各臟器或主要靶點,才能發揮作用并達到藥效作用。本實驗通過動態觀察羥基紅花黃色素A 在肝組織和血清中含量變化,為設計紅花保肝作用的給藥方案及臨床合理用藥提供參考,并為進一步系統研究紅花保肝作用藥效物質基礎奠定方法和思路。

[1]國家中醫藥管理局中華本草編委會.中華本草.蒙藥卷[M].上海:上海科學技術出版社,2004.

[2]王玉芹,楊樹東,李家實,等.紅花黃色素對血小板活化因子介導的中性粒細胞功能的影響[J].北京中醫藥大學學報,2001,23(4):21.

[3]臧寶霞,金鳴,司南,等.羥基紅花黃色素A 對血小板活化因子的拮抗作用[J].藥學學報,2002,37(9):696.

[4]田京偉,傅風華,蔣王林,等.羥基紅花黃色素A 對腦缺血所致大鼠腦線粒體損傷的保護作用[J].藥學學報,2004,39(10):774.

[5]梁輝,范金英,李愛華,等.羥基紅花黃色素A 對大鼠局灶性腦缺血再灌注NMDAR1 蛋白表達的影響[J].中華老年心腦血管病雜志,2004,6(3):194.

[6]金鳴,李金榮,蔡亞欣,等.紅花水溶性成分抗氧化作用的研究[J].心肺血管病雜志,1998,17(4):277.

[7]陳志強,王萬強,葉秀云,等.紅花注射液對腦缺血/再灌注損傷家兔血清白細胞介素IL8 的影響[J].中國急救醫學,2005,25(2):118.

[8]夏玉葉,閔,盛雨辰.羥基紅花黃色素A 對大鼠血栓形成和血小板聚集功能的影響[J].中國藥理學通報,2005,21(11):1400 -1401.

[9]王藝蓉,李雅娜,寧巍巍等.羥基紅花黃色素A 對四氯化碳致大鼠肝纖維化的干預作用[J].解剖學雜志,2011,34(4):454 -457.

[10]孫云帆,王皓晨,范偉強,等.羥基紅花黃色素A 對四氯化碳急性肝損傷的保護作用[J].山東大學學報,2009(8).

[11]王喜軍.中藥血清藥物化學[M].北京:科學出版社,2010:352 -353.

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