白介素6、白介素8與胃癌患者幽門螺桿菌關系研究

王競，楊春春，李鳳春

(河北醫科大學第一醫院 消化內科，河北 石家莊 050031)

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白介素6、白介素8與胃癌患者幽門螺桿菌關系研究

王競，楊春春，李鳳春

(河北醫科大學第一醫院 消化內科，河北 石家莊 050031)

目的 探討胃癌患者血清、胃液及組織中IL-6、IL-8水平變化與幽門螺桿菌感染關系。方法 選取河北醫科大學第一醫院消化科胃炎及胃癌患者264例，根據胃鏡組織活檢病理確診的結果分成3組，胃黏膜未見明顯病變者為對照組(80例)，胃黏膜癌前病變者為癌前病變組(84例)和胃黏膜癌病者為胃癌組(100例)，再通過12C呼吸實驗的檢測結果將以上3組分成對應的Hp陽性組及Hp陰性組。采用ELISA法檢測患者血清中、胃液中IL-6、IL-8水平，采用雙抗體夾心法檢測胃黏膜組織中IL-6、IL-8水平，比較各組Hp陽性組患者治療后Hp根除率。結果 與對照組比較，癌前病變組及胃癌組血清、胃液及粘膜組織IL-6、IL-8較高(P<0.05)，與癌前病變組比較，胃癌組血清、胃液及粘膜組織IL-6、IL-8較高(P<0.05)。與HP陰性組比較，HP陽性組患者血清、胃液及粘膜組織IL-6、IL-8較高(P<0.05)。三聯用藥抗幽門螺桿菌后，與胃癌組比較，癌前病變組與對照組Hp根除率較高(P<0.05)，對照組與癌前病變組Hp根除率比較差異無統計學意義。結論 胃癌患者血清、胃液和胃黏膜組織中IL-6、IL-8水平升高，Hp陽性患者IL-6、IL-8水平更高；IL-6、IL-8升高可能是胃癌形成的機制，對胃癌的診斷、評估具有重要意義。

胃癌；IL-6；IL-8；癌前病變；幽門螺桿菌

胃癌發病率占上消化道惡性腫瘤的95%以上，好發于中老男性，5年生存率較低。據調查統計，2000年全球新診斷胃癌有80萬例，2/3分布于發展中國家，早期臨床表現不典型，以惡心、嘔吐或類似于消化性潰瘍病的上消化道癥狀為主，易被忽略[1]。本病與生活飲食習慣、感染幽門螺桿菌(Helicobacterpylori，Hp)以及既往胃病病史等因素有關，其中Hp感染是引起胃癌的主要病因[2]。研究表明[3]白細胞介素6(IL-6)與白細胞介素8(IL-8)在胃癌形成過程中具有重要的意義，本研究通過分析患者血清、胃液和胃黏膜組織中IL-6、IL-8水平，探討胃癌患者IL-6、IL-8水平與幽門螺桿菌感染關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2010年1月～2013年12月收入河北醫科大學第一醫院消化科胃炎及胃癌患者264例，年齡16～60歲，根據胃鏡活檢組織病理確診的結果分成3組，胃黏膜未見明顯病變者為對照組(80例)；胃黏膜癌前病變者為癌前病變組(84例)和胃黏膜癌病者為胃癌組(100例)，再通過12C呼吸實驗的檢測結果將以上3組分成對應的Hp陽性對照組(40例)、Hp陽性癌前病變組(42例)、Hp陽性胃癌組(50例)、Hp陰性對照組(40例)、Hp陰性癌前病變組(42例)、Hp陰性胃癌組(50例)。本研究已獲得本醫院的倫理學相關機構批準授權。

1.2 診斷標準 根據慢性胃炎內鏡診斷標準[4]：①皺襞萎縮：主要表現在胃體部，根據萎縮程度可分為三度，皺襞變細為輕度，皺襞消失為重度，介于2者之間為中度；②血管顯露：初期可見到黏膜下小血管，重者可見到黏膜下的大血管如樹枝狀，暗紅色；③黏膜粗糙不平：萎縮、增生和腸上皮化生，黏膜常明顯粗糙不平或呈結節狀或鱗片狀凹凸不平。

胃腸道癌前病變和癌的WHO診斷新標準[5]：①早期患者有惡心、嘔吐或類似于消化性潰瘍病的上消化道癥狀；②食欲減退、消瘦、乏力、貧血；③胃部疼痛及體質量減輕；④X線鋇餐檢查有充盈缺損；⑤螺旋CT、MRI等影像學檢查能夠輔助診斷和臨床分期；⑥纖維胃鏡病理活檢是診斷胃癌的金標準。

1.3 納入標準 符合原發性胃癌的診斷標準；患者以及家屬對本研究具體情況了解知情并自愿參與和簽署知情同意書。

1.4 排除標準 ①精神、神志異常不能配合者；②患有嚴重心、肝、腎、肺、腦疾病者；③ 患有肺癌、肝癌、腎癌、腦癌等其他惡性腫瘤者；④患有艾滋病、梅毒、病毒性肝炎、結核等傳染病者；⑤患有再生障礙性貧血、白血病等血液性疾病者；⑥近3個月服用抗幽門螺桿菌及腫瘤治療患者。

1.5 方法

1.5.1 治療方法：對患者進行奧美拉唑+阿莫西林+克拉霉素三聯抗菌治療，奧美拉唑腸溶膠囊(成都華神集團股份有限公司制藥廠，國藥準字H20055788，生產批號：20100927)20 mg，tid po，阿莫西林膠囊(河南鳳凰制藥股份有限公司，國藥準字H41021944，生產批號：20110321)0.5，tid po，克拉霉素分散片(康美藥業股份有限公司，國藥準字H19990209，生產批號：20100930)0.25 g，tid po。1周為1個療程，治療2個療程，治療結束后進行12C實驗，檢測患者幽門螺桿菌情況。

1.5.2 樣本采集：樣本采集時間點在所有患者未進行任何介入、藥物和手術治療前。

①血液采集：于晨起空腹抽取肘靜脈血4 mL，加入含EDTA-K2 抗凝劑的真空管中混勻，并立即將樣本置于4 ℃的冰箱中2 h，3000 r/min離心20 min后，分離血清，將血清置于EP管中并放于-80 ℃冰箱中保存待檢。

②胃液采集：經患者及家屬同意，胃鏡活檢前，將10 mL注

射器連接到胃液采集管上，通過活檢通道抽取胃液5 mL，置于-80 ℃冰箱中保存待檢。

③胃黏膜采集：胃液收集后，胃鏡檢查胃黏膜，發現有活檢組織檢查的指癥后，通過胃鏡活檢通道利用活檢鉗切取病變胃黏膜組織，立即甲醛固定后，送病理科檢查。

1.5.3 指標檢測方法：①血清及胃液中IL-6 、IL-8檢測方法：將血清及胃液從冰箱取出，解凍后，采用ELISA方法檢測標本中IL-6 、IL-8水平。IL-6 、IL-8試劑盒由武漢優爾生科技股份有限公司提供，并且嚴格按照說明書操作。

②胃黏膜組織中IL-6 、IL-8檢測：將胃黏膜組織取出，剪碎，研磨，離心，提取上清液，采用雙抗體夾心法檢測上清中IL-6、IL-8水平，IL-6 、IL-8試劑盒由武漢優爾生科技股份有限公司提供，并且嚴格按照說明書操作。

2 結果

2.1 一般資料比較 各組患者年齡、性別比例、既往患胃病史等一般資料比較差異無統計學意義，具有可比性，見表1。

表1 患者一般資料比較Tab.1 Comparison of patients’ baseline

2.2 血清中IL-6、IL-8水平比較 與對照組比較，癌前病變組及胃癌組血清IL-6、IL-8較高(P<0.05)，與癌前病變組比較，胃癌組血清IL-6、IL-8較高(P<0.05)。與Hp陰性組比較，Hp陽性組患者血清IL-6、IL-8較高(P<0.05)，見表2。

表2 血清中IL-6 、IL-8水平比較情況Tab.

*P<0.05，與對照組比較，compared with control group；△P<0.05，與癌前病變組比較，compared with precancerous lesion group；#P<0.05，與Hp陽性組比較，compared with Hp positive group

2.3 胃液中IL-6 、IL-8水平比較 與對照組比較，癌前病變組及胃癌組胃液IL-6 、IL-8較高(P<0.05)，與癌前病變組比較，胃癌組胃液IL-6、IL-8較高(P<0.05)。與Hp陰性組比較，Hp陽性組患者胃液IL-6 、IL-8較高(P<0.05)，見表3。

表3 胃液中IL-6 、IL-8水平比較情況Tab.

*P<0.05，與對照組比較，compared with control group；△P<0.05，與癌前病變組比較，compared with precancerous lesion group；#P<0.05，與HP陽性組比較，compared with Hp positive group

2.4 胃黏膜組織中IL-6、IL-8水平比較 與對照組比較，癌前病變組及胃癌組胃黏膜組織IL-6、IL-8較高(P<0.05)，與癌前病變組比較，胃癌組胃黏膜組織IL-6 、IL-8較高(P<0.05)。與Hp陰性組比較，Hp陽性組患者胃黏膜組織IL-6、IL-8較高(P<0.05)，見表4。

表4 胃黏膜組織中IL-6 、IL-8水平比較情況Tab.

*P<0.05，與對照組比較，compared with control group；△P<0.05，與癌前病變組比較，compared with precancerous lesion group；#P<0.05，與HP陽性組比較，compared with Hp positive group

2.5 治療后幽門螺桿菌清除率比較 三聯用藥抗幽門螺桿菌后，對照組與癌前病變組Hp根除率比較差異無統計學意義(χ2=0.17，P>0.05)；與胃癌組比較，對照組Hp根除率較高(χ2=9.49，P<0.05)，與胃癌組比較，癌前病變組Hp根除率較高，見表5。

表5 患者用藥后Hp清除率比較Tab.5 Comparison of clearance rate of Hp

3 討論

胃癌是消化道常見的惡性腫瘤之一，在各類癌癥病死率中排列第2位，僅次于肺癌。早期胃癌臨床癥狀不明顯，沒有明確早期診斷和篩查方法成為胃癌死亡率居高不下的主要原因[6]。目前一些腫瘤標志物為胃癌的診斷和篩查提供了一些依據，但是這些腫瘤標志物敏感性不高，特異性較差，對于胃癌的早期診斷率降低，因此尋找一種敏感性高、特異性好的生化指標是提高胃癌早期診斷率的目前臨床亟需解決的問題[6-7]。目前已知幽門螺桿菌(Hp)感染與胃癌的發生有著明確的關系，Hp能夠通過多種途徑引起胃上皮細胞增生，進而發展為胃癌[8]。

本研究結果顯示，Hp陽性組中：胃癌患者血清、胃液及組織中IL-6、IL-8水平均明顯高于對照組和胃癌前病變組(P<0.05)；胃癌前病變組患者血清、胃液及組織中IL-6、IL-8水平均明顯高于對照組(P<0.05)；Hp陽性胃癌患者血清、胃液及組織中IL-6、IL-8水平均明顯高于Hp陰性同等級別病變患者(P<0.05)，提示IL-6和IL-8與Hp 2者互為協同作用，共同參與胃癌的發生、發展。腫瘤細胞分泌IL-6、IL-8，隨著體液循環進入血液，導致血清中IL-6、IL-8增高，機體對胃癌防御性炎性反應，導致IL-6、IL-8水平升高，Hp感染聯合患者血清中IL-6、IL-8水平能夠為胃癌早期診斷提供重要依據[8]。

白細胞介素6(IL-6)是一種具有多生物學功能的蛋白質，主要來源于單核巨噬細胞的分泌，但是T、B淋巴細胞、血管內皮細胞和成纖維細胞等也有分泌，另外在一些腫瘤細胞中也會分泌[3]。IL-6能夠直接控制腫瘤細胞的復制、增殖和轉移，并能通過機體免疫應答抑制腫瘤細胞的凋亡，促進細胞生長，調節內環境，促進新生血管的形成，加強腫瘤的生長，IL-6能夠與多種靶細胞結合，調控腫瘤的生長、病理進程和病情程度[9]。白細胞介素8(IL-8)是一種細胞趨化因子，能夠趨化腫瘤細胞，參與金屬蛋白酶的表達，促進血管內皮因子的分泌，加速腫瘤新生血管的生成，促使腫瘤的增殖、生長和轉移，在胃癌的發生、發展、浸潤和轉移過程中起著重要的生物學作用[10-11]。

胃癌細胞分泌產生的IL-6、IL-8直接進入胃液中，胃液IL-6、IL-8水平變化可以反映胃的病變程度和性質，能有效的辨別正常和病變胃黏膜。Hp長時間刺激胃黏膜上皮細胞，引起胃黏膜上皮炎性改變，進而惡性增殖，癌變，最終形成胃癌，并且與IL-6和IL-8相互協同作用，共同參與胃癌的發生、發展、浸潤和轉移[12]。Hp陽性患者治療后，對照組Hp根除率明顯高于癌前病變組和胃癌組；癌前病變組Hp根除率明顯高于胃癌組，說明不同程度的胃黏膜病變能夠影響Hp的根除，可能與惡性細胞分泌高水平的IL-6和IL-8有關，具體影響機制尚需進一步研究。

綜上所述，IL-6和IL-8參與胃癌的發生、發展和轉移，Hp感染聯合患者血清、胃液和胃黏膜組織中IL-6和IL-8的水平變化為胃癌的診斷、預后評估和指導臨床用藥提供可能，對臨床具有重要指導意義。

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(編校：王儼儼)

Study on relationship between IL-6, IL-8 andHelicobacterpyloriin patients with gastric cancer

WANG Jing, YANG Chun-chun, LI Feng-chun

(Department of Gastroenterology, The First Hospital of Hebei Medical University, Shijiazhuang 050031, China)

ObjectiveTo investigate relationship between IL-6, IL-8 andHelicobacterpyloriin patients with gastric cancer.Methods264 cases patients with gastric cancer and gastritis were selected, and divided into control group, precancerous lesion group and gastric cancer group according to the tissue biopsy, then each group were divided into positive group and negative group according to12C test. IL-6 and IL-8 in serum and gastric juice were detected by ELISA, while in gastric mucosa by double antibody sandwich method.ResultsCompared with control group, IL-6 and IL-8 in serum, gastric juiceand gastric mucosa were higher(P<0.05). Compared with precancerous lesion group, IL-6 and IL-8 in serum, gastric juice and gastric mucosa were higher(P<0.05).Compared with Hp negative group, IL-6 and IL-8 in serum, gastric juice and gastric mucosa were higher(P<0.05). Compared with gastric cancer group, Hp eradication rate of precancerous lesion group and control group was higher, respectively(P<0.05).ConclusionIL-6 and IL-8 in gastric cancer patients’ serum, gastric juice and gastric mucosa increased, which is higher in Hp positive group. The levels of IL-6, IL-8 maybe the key mechanism of the formation of gastric cancer, which has important sense of assessment and diagnosis of gastric cancer.

gastric cancer; IL-6; IL-8; precancerous lesion;Helicobacterpylori

河北省2014年度醫學科學研究重點課題計劃(ZL20140135)

王競，女，本科，主治醫師，研究方向：消化道腫瘤，E-mail：wangjingyidayi@163.com。

R735.2

A

1005-1678(2015)05-0143-04