利妥昔單抗對惡性淋巴瘤患者血清hepcidin、sCD40L、PDGF-BB與LDH水平的影響

葉煌陽，呂曉君，張映紅，姚擁華

(廈門大學附屬第一醫院 腫瘤內科，福建 廈門 361003)

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利妥昔單抗對惡性淋巴瘤患者血清hepcidin、sCD40L、PDGF-BB與LDH水平的影響

葉煌陽，呂曉君，張映紅，姚擁華Δ

(廈門大學附屬第一醫院 腫瘤內科，福建 廈門 361003)

目的 探究利妥昔單抗對惡性淋巴瘤患者血清鐵調素(hepcidin，Hepc)、可溶性CD40配體(soluble CD40 ligands，CD40L)、血小板衍生生長因子-BB(platelet derived growth factor-BB，PDGF-BB)與乳酸脫氫酶(lactic dehydrogenase，LDH)水平影響。方法 選取廈門大學附屬第一醫院腫瘤科收取的惡性淋巴瘤患者52例，隨機分為對照組與實驗組，對照組予以環磷酰胺、吡柔比星、長春新堿及潑尼松治療，實驗組在對照組的基礎上加用利妥昔單抗，治療結束后比較2組患者的hepcidin、sCD40L、PDGF-BB及LDH水平。結果 治療后，2組患者血清hepcidin、PDGF-BB及LDH水平降低(P<0.05)，sCD40L水平升高(P<0.05)。與對照組相比，實驗組患者hepcidin、PDGF-BB及LDH水平較低(P<0.05)，sCD40L水平較高(P<0.05)。結論 利妥昔單抗對惡性淋巴瘤患者，具有降低血清hepcidin、PDGF-BB與LDH水平，增高sCD40L水平的作用。

利妥昔單抗；鐵調素；可溶性CD40配體；血小板衍生生長因子-BB；乳酸脫氫酶

惡性淋巴瘤(malignant lymphomas，ML)是一組起源于造血淋巴組織的惡性腫瘤，包括霍奇金淋巴瘤以及非霍奇金淋巴瘤2種[1]。最新調查表明，隨著病毒感染人群增多，引發惡性淋巴瘤發病率逐年增高[2]。貧血是淋巴瘤最易出現的并發癥之一，又稱慢性病性貧血(anemia of chronic disease，ACD)[3]。2003～2007年中國淋巴瘤發病粗率為6.54/10萬，占全部惡性腫瘤發病的2.46%，2003～2007年中國淋巴瘤死亡粗率為3.70/10萬，占全部惡性腫瘤死亡的2.15%[4]。本病發病機制是由于自身免疫細胞激活炎性反應的細胞因子，阻礙紅細胞的合成分泌，紅細胞生成率降低，成活率以及生存時間減少，機體內出現鐵穩態失衡，引發貧血[5]。故本研究從鐵調素(hepcidin，Hepc)、可溶性CD40配體(soluble CD40 ligands，CD40L)、血小板衍生生長因子-BB(platelet derived growth factor-BB，PDGF-BB)與乳酸脫氫酶(lactic dehydrogenase，LDH)水平層面探討利妥昔單抗治療惡性淋巴瘤機制。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2013年9月～2015年3月廈門大學附屬第一醫院腫瘤科惡性淋巴瘤患者52例，男性27例，女性25例；彌漫大B淋巴瘤患者29例，小細胞淋巴瘤患者23例。采用隨機數字分配法，隨機分為實驗組與對照組，其中實驗組26例，男性14例，女性12例，年齡18～76歲，平均年齡(49.24±8.24)歲，彌漫大B淋巴細胞瘤14例，小細胞淋巴瘤12例；對照組26例，男性13例，女性13例，年齡20～77歲，平均年齡(48.13±7.97)歲，彌漫大B淋巴細胞瘤15例，小細胞淋巴瘤11例。2組患者的一般資料相仿，差異無統計學意義。

納入標準：所有患者均符合以下條件：①診斷符合《NCCN 2009 版非霍奇金淋巴瘤診療指南評價》[6]具備以下臨床特點：無痛性的鎖骨或淋巴結腫大，全身疲乏、消瘦、盜汗、發熱等癥狀；②年齡大于18歲，有自主意識，檢查顯示白細胞以及血小板數量減少，縱膈淋巴結腫大，骨髓浸潤。本實驗獲得本院倫理協會批準并全程跟蹤隨訪。

排除標準：①患者存在藥物過敏史，與治療藥物產生過敏反應；②有嚴重心、肝、腎等多臟器官疾病出現功能障礙或衰竭；③癲癇等神志異常。

1.2 方法

1.2.1 治療方法：患者入院后,均進行血常規、生化常規、肝腎功能、骨髓穿刺以及病理學活檢、免疫酶標等全面檢查。對照組患者入院后第1天，注射750 mg/m2環磷酰胺(山西普德藥業股份有限公司，國藥準字H14023686)，第2天，注射40～45 mg/m2注射用鹽酸吡柔比星(深圳萬樂藥業有限公司，國藥準字H10930106)；第3天注射2 mg/m2長春新堿(廣州白云山明興制藥有限公司，國藥準字H44022399)，第4天注射60 mg/m2醋酸潑尼松龍注射液(山東新華制藥股份有限公司，國藥準字H37022910)，患者于治療前7 d口服 60 mg/d拉米夫定膠囊(北京萬生藥業有限責任公司，國藥準字H20110078)，進行抗病毒治療，每3周為1個療程，共進行6個療程，于治療結束后持續口服藥物拉米夫定半年以上。實驗組在對照組的基礎上于每5天第1天采用靜脈注射5～10 mg的地塞米松磷酸鈉注射液(山西天源制藥有限公司，國藥準字H14021323)或肌肉注射20 mg復方氨酚苯海拉明片(吉林省銀河制藥有限公司，國藥準字H22025258)，注射完成后30 min，實施375 mg/m2利妥昔單抗注射液(上海羅氏制藥有限公司，國藥準字J20080053)?；熃Y束后，定期進行肝腎功能檢查，出現損傷的患者及時運用護肝類藥物，靜脈點滴60 mg/d復方甘草酸苷溶液(日本Minophagen Pharmaceutical Co., Ltd，注冊證號：H20080264)，配合228 mg多烯磷脂酰膽堿注射液(深圳賽諾菲巴斯德生物制品有限公司，國藥準字H20113068)，3次/天。

1.2.2 血清 hepcidin、sCD40L、PDGF-BB及LDH水平檢測：患者入院后次日8時空腹采靜脈血10 mL，3 000 r/min離心3 min分離血清,保存于-80℃的冰箱待測。運用酶聯免疫吸附法(M600酶標儀，上海研卉生物科技有限公司)進行hepcidin、sCD40L及PDGF-BB檢測，其中hepcidin試劑盒、sCD40L試劑盒及PDGF-BB試劑盒購自武漢博士的生物技術有限公司，嚴格按照試劑盒說明書操作，繪制標準曲線并在450 nm波長處測定樣本吸光度(A值)，計算血清中hepcidin、sCD40L及PDGF-BB的濃度。運用D280全自動生化分析儀(上海富勒生物科技有限公司)進行速率法檢測血清LDH水平。

2 結果

2組患者治療前后血清hepcidin、sCD40L、PDGF-BB及LDH水平比較

治療后，2組患者hepcidin、PDGF-BB及LDH水平降低(P<0.05)，sCD40L水平升高(P<0.05)。與對照組相比，實驗組患者hepcidin、PDGF-BB及LDH水平較低(P<0.05)，sCD40L水平較高(P<0.05)。見表1。

表1 2組患者治療前后血清hepcidin、sCD40L、PDGF-BB及LDH水平比較Tab.1 Comparison of serum hepcidin, sCD40L, PDGF-BB and LDH levels pre-and post-treatment between two groups ±s)

*P<0.05，與同組治療前比較，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，與對照組治療后比較，compared with control group post-treatment

3 討論

惡性淋巴瘤是嚴重影響人類健康進而威脅人類生命的一種血液系統惡性腫瘤[7]。其發病機制是：與機體免疫機制有關，當機體內出現癌細胞對免疫具有抑制作用，機體不產生感染肝細胞的免疫反應，機體的免疫動能修復后，被感染的肝細胞再次啟動，引起肝細胞的壞死；機體內B淋巴細胞在其作用下含量明顯降低，作用時間縮短，出現體液免疫功能異常。

本研究結果顯示，治療后2組hepcidin水平均明顯降低(P<0.05)，實驗組與對照組相比，hepcidin水平降低顯著(P<0.05)。鐵調素(hepcidin)是一種控制鐵代謝副作用[8]，抑制腸道內鐵元素的吸收和單核巨噬細胞系統鐵進行釋放，于惡性淋巴瘤發病機制中尤為重要。白介素-6(IL-6)與hepcidin合成分泌具有重要影響的炎癥因子，貧血的發生與鐵代謝以及hepcidin合成分泌密切相關。Hepcidin主要參與肝臟合成、鐵代謝，抑制細胞內鐵釋放作用[9]，在巨噬細胞內聚集，于腸道內被吸收，紅細胞生成利用率降低。治療后2組sCD40L水平均明顯增高(P<0.05)，實驗組與對照組相比，sCD40L水平升高顯著(P<0.05)。sCD40L是一種位于胞質外區，具有刺激B淋巴細胞活化的跨膜糖蛋白[10]。sCD40L的有效成分是CD40L，生物活性強。sCD40L可以增加血管系統的生物學功能，水平增高提示機體內癌細胞數量減少。實驗組運用利妥昔單抗，sCD40L水平增高，提示淋巴癌細胞數量降低。2組PDGF-BB水平明顯降低(P<0.05)，實驗組與對照組相比，PDGF-BB水平明顯降低(P<0.05)。PDGF是一種與新生腫瘤生長發展以及轉移關系緊密的血管新生調控因子，正常人體內PDGF分泌被抑制，水平較低，但患有實體瘤患者體內表達水平高[11]。血管的新生成為惡性腫瘤發生發展的一個重要環節，血管的生長為腫瘤提供了氧以及營養物質，當腫瘤逐漸步入血管形成期，其生長速度無法被抑制。本文通過研究證實，實驗組使用利妥昔單抗，PDGF-BB水平降低，細胞壞死以及血管形成被抑制，癌細胞得到控制。LDH是一種存在于心、腎、肝臟以及骨骼肌等內的糖酵解酶以及糖異生酶系[12]。國際淋巴瘤預后指標中LDH具有重要的預后作用，對惡性淋巴癌的診斷較為標準。本研究結果顯示，實驗組較對照組LDH水平明顯降低(P<0.05)，證實利妥昔單抗具有緩解氧化還原反應，降低淋巴癌發生的作用。

本研究通過52例對惡性淋巴瘤患者血清hepcidin、sCD40L、PDGF-BB與LDH水平進行研究，證實了利妥昔單抗可以降低惡性淋巴瘤患者血清hepcidin、PDGF-BB與LDH水平，增高sCD40L水平的作用。

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(編校：王儼儼)

Effect of rituximab on serum hepcidin, sCD40L, PDGF-BB and LDH levels in patients with malignant lymphadenoma

YE Huang-yang, LV Xiao-jun, ZHANG Ying-hong, YAO Yong-huaΔ

(Department of Medical Oncology, The First Affiliated Hospital of Xiamen, Xiamen 361003,China)

ObjectiveTo explore the effect of rituximab on serum hepcidin (Hepc), soluble CD40 ligands (sCD40L), platelet derived growth factor-BB (PDGF-BB) and lactate dehydrogenase (LDH) in patients with malignant lymphadenoma.Methods52 patients with malignant lymphoma from the hospital were randomly divided into control group and experimental group. The control group were treated by cyclophosphamide, pirarubicin, vincristine and prednisone and the experiment group were treated on the basis of control group with rituximab. The serum hepcidin, sCD40L, PDGF-BB and LDH levels were compared after treatment.ResultsCompared with pre-treatment, the serum hepcidin, PDGF-BB and LDH levels were lower(P<0.05), the sCD40L level was higher(P<0.05) post-treatment. The serum hepcidin, PDGF-BB and LDH levels in experimental group post-treatment were lower, sCD40L level was higher than those in control group(P<0.05).ConclusionsThe rituximab could reduce serum hepcidin, PDGF-BB and LDH levels and elevate serum sCD40L level in patients with malignant lymphadenoma.

rituximab; soluble CD40 ligands; platelet derived growth factor-BB; lactic dehydrogenase

葉煌陽，男，本科，主任醫師，研究方向：惡性淋巴瘤，E-mail：yehuangyang@csco.org.cn；姚擁華，通訊作者，女，本科，主任醫師，研究方向：小兒惡性淋巴瘤，E-mail：1684907959@qq.com。

R733.4

A

1005-1678(2015)09-0136-03