甘草酸對膠質瘤患者血清PDGF、IL-17、MCP-1及SRF血清反應因子的影響研究

郭高飛，王仁芳，張偉

(湖北省浠水縣人民醫院 神經外科，湖北 浠水 438200)

?

甘草酸對膠質瘤患者血清PDGF、IL-17、MCP-1及SRF血清反應因子的影響研究

郭高飛Δ，王仁芳，張偉

(湖北省浠水縣人民醫院 神經外科，湖北 浠水 438200)

目的 探討甘草酸對膠質瘤患者血清中血小板源性生長因子(platelet derived growth factor，PDGF)、白細胞介素-17(interleukin 17，IL-17)、單核細胞趨化蛋白1(monocyte chemotactic protein 1，MCP-1)及血清應答因子(serum response factor，SRF)的影響。方法 收集湖北省浠水縣人民醫院收治的腦膠質瘤患者48例，隨機分為對照組和實驗組，每組24例，所有患者進行手術治療，術后對照組給予替莫唑胺膠囊(150 mg/m2)治療，1次/天，口服，28d為1個治療周期內連續服用5天；實驗組在對照組基礎上給予復方甘草酸單銨注射液40 mL，溶于250 mL 5%葡萄糖溶液中靜點，1次/天，4周為1個療程。2組患者均治療2個療程后，對所有患者的血清PDGF、IL-17、MCP-1及SRF進行檢測。結果 治療后，與對照組比較，實驗組患者的血清PDGF水平較低(P<0.05)；實驗組患者的血清IL-17水平較低(P<0.05)；實驗組患者的血清MCP-1水平較高(P<0.05)；實驗組患者的血清SRF水平較低(P<0.05)。結論 甘草酸能夠明顯降低膠質瘤患者血清PDGF、IL-17及血清SRF，升高MCP-1水平，對臨床有指導意義。

甘草酸；膠質瘤；血小板源性生長因子；白細胞介素-17；單核細胞趨化蛋白1；SRF

膠質瘤也稱為神經上皮性腫瘤，是最常見的原發性顱腦腫瘤，由于大腦和脊髓膠質細胞發生癌變所致。膠質瘤分類是2000年修訂的世界衛生組織分類，將浸潤性膠質瘤分為星形細胞瘤、少突膠質細胞瘤、少突星形細胞瘤[1]。膠質瘤約是最常見的神經上皮細胞腫瘤，占所有顱內腫瘤的51%，男性多于女性，男女比例為1.49︰1[2]，其中腦膠質瘤Ⅰ級：纖維型星形細胞瘤，好發年齡為8～13歲；Ⅱ級：彌漫生長的星形細胞瘤，平均生存期為68個月；Ⅲ級：分化不良的星形細胞瘤，平均生存期21個月[3]，因此早期診斷和合理的治療方法尤為重要。目前，對于膠質瘤的治療，主要采用手術、立體定向放療、新型化療等手段[4]，但膠質瘤解剖結構特殊，很難通過手術根治，且術后容易復發。尋找安全有效的治療方法是目前研究的熱點，中藥治療腫瘤在我國歷史悠久，尤其是近年來，隨著中藥提取技術的發展，人們從中藥中提取出許多具有抗腫瘤作用的成分，并在臨床上取得了療效。甘草酸是甘草中的黃酮類化合物，已有研究顯示，其在宮頸癌、肝癌、結直腸癌等治療中療效確切[5-6]；然而，目前關于甘草酸治療膠質瘤的相關臨床研究較少。因此，本研究通過觀察患者治療前后血清血小板源性生長因子(platelet derived growth factor，PDGF)、白細胞介素-17(interleukin 17，IL-17)、單核細胞趨化蛋白1(monocyte chemotactic protein 1，MCP-1)及血清應答因子(serum response factor，SRF)水平的變化，來研究甘草酸對膠質瘤患者的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集湖北省浠水縣人民醫院2014年5月～2015年5月的確診為腦膠質瘤的患者48例。其中男性27例，年齡在19～70歲，平均年齡(45.6±7.2)歲；女性21例，年齡在 18～73歲，平均年齡(47.5±7.5)歲。所有患者隨機分為實驗組和對照組，各24例。實驗組男性12例，女性12例，年齡在20～71歲，平均年齡(46.1±8.5)歲；對照組男性15例，女性9例，年齡在18～73歲，平均年齡(46.8±8.9)歲；2組患者的年齡分布、性別組成等資料比較差異無統計意義。根據2007年WHO中樞神經系統腫瘤分類標準：Ⅰ級5例、Ⅱ級10例、Ⅲ級17例、Ⅳ級16例。診斷及排除標準：(1)診斷依據根據2007年《臨床神經外科學》關于腦膠質瘤的診斷標準[7]，并經術后病理確診； (2)排除標準：①無法接受手術、放化療治療的患者；②近3月內有急性或慢性感染，服用抗生素或糖皮質激素的患者；③合并其他惡性腫瘤；④合并心腦血管疾病、嚴重的肝、腎功能衰竭；⑤妊娠或哺乳期婦女；⑥對研究中所涉及的藥物過敏的患者。

1.2 方法

1.2.1 治療方法：所有患者均給予手術治療，術后對照組給予替莫唑胺膠囊(江蘇天士力帝益藥業有限公司，國藥準字H20060880)150 mg/m2，1次/天，口服，28 d為1個治療周期內連續服用5 d；實驗組在對照組治療基礎上給予復方甘草酸單銨注射液(蚌埠豐原涂山制藥有限公司，國藥準字H34023729)40 mL，溶于250 mL 5%葡萄糖溶液中靜點，1次/天，4周為1個療程，2組患者均治療2個療程。

1.2.2 血清指標采集：治療前后，所有研究對象均采集空腹12 h后靜脈血5 mL，然后分離血清，采用臨床檢驗科全自動酶聯免疫分析儀(BIOBASE1000)，嚴格按照試劑盒說明書進行操作，通過雙抗體夾心法(ELISA)檢測血清中PDGF、MCP-1、IL-17及SRF的水平。

2 結果

2.1 治療前后2組患者血清PDGF水平比較 與治療前相比，對照組和實驗組患者的血清PDGF水平均顯著降低(t=23.91，t=33.05，P<0.05)；與對照組比較，實驗組患者的血清PDGF水平明顯較低(t=24.14，P<0.05)。見表1。

組別 例數時間PDGF(pg/mL)對照組24治療前163.75±19.53治療后62.74±6.84*實驗組24治療前164.54±20.43治療后24.51±3.66*#

*P<0.05，與同組治療前比較，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，治療后與對照組比較，compared with control group post-treatment

2.2 治療前后2組患者血清MCP-1水平比較 與治療前相比，對照組和實驗組患者的血清MCP-1水平均顯著升高(t=20.20，t=22.52，P<0.05)；與對照組比較，實驗組患者的血清MCP-1水平明顯較高(t=12.25，P<0.05)。見表2。

組別 例數時間MCP-1(pg/mL)對照組24治療前297.48±26.32治療后452.44±26.83*實驗組24治療前291.47±27.43治療后24.51±3.66*#

*P<0.05，與同組治療前比較，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，治療后與對照組比較，compared with control group post-treatment

2.3 治療前后2組患者血清IL-17水平比較 與治療前相比，對照組和實驗組患者的血清IL-17水平均顯著降低(t=6.46，t=15.79，P<0.05)；與治療后對照組相比，實驗組患者的血清IL-17水平明顯較低(t=12.47，P<0.05)。見表3。

組別例數時間IL-17(pg/mL)對照組24治療前103.84±8.65治療后89.45±6.66*實驗組24治療前103.26±9.63治療后24.51±3.66*#

*P<0.05，與同組治療前比較，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，治療后與對照組比較，compared with control group post-treatment

2.4 治療前后2組患者血清SRF水平比較 與治療前相比，對照組和實驗組患者的血清SRF水平均顯著降低(t=25.15，t=29.26，P<0.05)；與對照組比較，實驗組患者的血清SRF水平明顯較低 (t=11.17，P<0.05)。見表4。

組別 例數時間SRF(pg/mL)對照組24治療前148.61±17.72治療后51.84±6.43*實驗組24治療前147.48±18.47治療后24.51±3.66*#

*P<0.05，與同組治療前比較，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，治療后與對照組比較，compared with control group post-treatment

3 討論

膠質瘤是中樞神經系統中最常見的惡性腫瘤，其綜合年齡高峰處在30～40歲之外，尚有1個10～20歲的發病高峰。不同類型的膠質瘤其好發年齡段不同，例如：在0～10歲，髓母細胞瘤和室管膜瘤均有較高的發病率，而松果體腫瘤卻在10～20歲之間有著較高的發病水平，但同時也應該指出的是，膠質瘤的發病率在70歲以后降至最低水平[8]，手術治療很難完全清除病灶，極易引起復發，預后不良。放療、化療等輔助治療手段雖然有助于殺滅腫瘤細胞，但對正常組織也會造成不必要的損傷，引起機體免疫力低下，對死亡率的影響不大。中藥素來具有安全、作用靶點廣泛、副作用小等優點，從中藥中提取抗腫瘤成分成為了近年來研究的重點。藥理研究發現[9]，甘草酸有抗潰瘍、祛痰、抗病毒、抗炎、抗糖尿病、抗癌、神經保護和增強機體免疫力的功效。體外研究亦表明[10]，甘草酸能夠明顯抑制人膠質瘤細胞系U251增殖，并誘導其凋亡，其機制可能與抑制NF-KB活性有關。

本研究結果表明，治療后與對照組比較，實驗組患者的血清PDGF水平明顯較低(P<0.05)，證實了甘草酸能夠降低膠質瘤患者血清PDGF水平。曾有研究報道，PDGF在所有的腦部惡性腫瘤中存在高表達，且腫瘤惡性程度越高PDGF表達水平越高，可以作為評估膠質瘤預后的指標[11]。PDGF是血小板衍生生長因子，能夠與腫瘤細胞上的PDGF受體結合，促進腫瘤細胞的分裂和增殖；過高的PDGF水平，還能夠促進血管內皮生成因子和腫瘤轉化生長因子的分泌，刺激腫瘤組織新生血管的形成，促進腫瘤的生長、浸潤與轉移。

IL-17是由活化的CD4+T細胞分泌的一種細胞因子，能夠促進中性粒細胞聚集以及細胞因子的釋放，推動炎癥反應的過程，對細胞的增殖也有促進作用。有研究表明，IL-17在結腸癌、胃癌等多種腫瘤中表達水平升高[12]，提示IL-17參與惡性腫瘤的發展過程。本研究結果顯示，治療后與對照組比較，實驗組患者的血清IL-17水平明顯較低(P<0.05)，表明甘草酸能夠減少IL-17的含量，抑制腫瘤相關的炎癥反應，阻止腫瘤發展。

MCP-1屬于趨化因子的一種，來自于腫瘤細胞、單核細胞、內皮細胞等的分泌，能夠刺激細胞的趨化運動。MCP-1與腫瘤的發生發展關系密切，其能夠促進炎癥細胞浸潤腫瘤組織，誘導腫瘤細胞的遷徙，促進腫瘤組織生長，直接或間接的促進腫瘤組織周圍新生血管形成，為腫瘤組織提供充足的營養而使得腫瘤生長，還能夠抑制T淋巴細胞的活性，減少機體對于腫瘤細胞的免疫應答，使得腫瘤組織無限制的生長、侵襲和轉移。研究發現[13]，惡性腫瘤患者外周血中MCP-1較良性腫瘤或健康對照者表達較低，提示惡性腫瘤能夠抑制MCP-1的合成分泌，有利于腫瘤發展。本研究結果顯示，治療后與對照組比較，實驗組患者的血清MCP-1水平明顯較高(P<0.05)，表明甘草酸能夠促進MCP-1分泌，阻止其促腫瘤發展的作用。

SRF能夠調控上皮間質轉化(EMT)的過程，EMT與惡性腫瘤的侵襲和轉移關系密切，即SRF能夠調控腫瘤的進展。研究發現，轉錄因子SRF在EMT中發揮重要調控作用，能夠調控惡性腫瘤的進行性進展，破壞細胞連接，使腫瘤細胞松散獲得遷移可能，并能夠促進腫瘤細胞增殖，上調基質金屬蛋白酶MMP-2, MMP-9的表達，使腫瘤細胞更易浸潤和侵襲[14]。本研究結果顯示，治療后與對照組比較，實驗組患者的血清SRF水平明顯較低(P<0.05)，表明甘草酸能夠下調SRF的水平，從而抑制腫瘤發展。

本研究通過對48例腦膠質瘤患者血清PDGF、IL-17、MCP-1及SRF結果進行分析，證實了甘草酸能夠明顯降低膠質瘤患者血清PDGF、IL-17及SRF水平，升高MCP-1水平，對臨床有指導意義。下一步研究將擴大樣本量，對具體的臨床療效及不良反應進行深入研究，為甘草酸應用于臨床提供更全面的依據。

[1] 程序曲，黃強.膠質瘤新分類法的研究進展[J].國外醫學神經病學神經外科學分冊，2003，30(4)：349-351.

[2] 李亮，邊寰，張偉，等.中樞神經系統神經上皮細胞腫瘤的流行病學研究[J].中華神經外科疾病研究雜志，2013，12(5)：435-438.

[3] 程毅飛.神經膠質瘤術后預后的相關因素分析[D].安徽：安徽醫科大學，2014.

[4] 韓國慶.腦深部膠質瘤的綜合治療及預后分析[D].天津：南開大學，2014.

[5] 姜項福，劉文杰，白紅進.甘草酸和甘草黃酮與人肝癌細胞(Hep G2)作用的電化學研究[J].塔里木大學學報，2014，26(1)：17-23.

[6] 齊敏.甘草酸藥理作用及機制的研究進展[J].牡丹江醫學院學報，2009，30(3)：79-81.

[7] 朱新洪.臨床神經外科學[M].第1版.科學技術文獻出版社，2007.

[8] 高振山.膠質瘤臨床及病理學特點的回顧性分析[D].濟南：山東大學，2013.

[9] 李松.甘草酸對人膠質瘤U251細胞的作用及其機制的研究[D].廣州：南方醫科大學，2014.

[10] 李松，祝劍虹，孫青，等.甘草酸對人膠質瘤U251細胞和NF-κB的抑制作用[J].實用腫瘤雜志，2013，28(5)：476-480.

[11] 劉愛軍，王樹偉，徐翔，等.血小板源性生長因子(PDGF)、SRF(SRF)和波形蛋白在人腦膠質瘤中表達的臨床意義[J].復旦學報(醫學版)，2014，41(1)：111-114，132.

[12] 張冠華，牟永告，張湘衡，等.白介素-17與轉化生長因子-β1在人腦膠質瘤組織中的表達及臨床意義[J].中華行為醫學與腦科學雜志，2011，20(5)：407-409.

[13] 晏驂.腦膠質瘤患者血清MCP-1、IL-17水平測定及其臨床意義[D].濟南：山東大學，2012.

[14] 華海俠，董玉寶，王曉華，等.Snail 和 SRF 在人惡性腦膠質瘤中的表達及其與微血管密度的關系[J].中國實驗診斷學，2014，18(7)：1092-1093.

(編校：王冬梅)

Effect of glycyrrhizin on serum levels of PDGF, IL-17, MCP-1 and SRF in patients with glioma

GUO Gao-feiΔ, WANG Ren-fang, ZHANG Wei

(Department of Neurosurgery, Xishui People’s Hospital, Xishui 438200, China)

ObjectiveTo analyse effect of glycyrrhizin on serum levels of platelet derived growth factor (PDGF), interleukin 17 (IL-17), monocyte chemotactic protein 1 (MCP-1) and serum response factor (SRF) in patients with glioma.Methods48 patients who were diagnosed with glioma in our hospital were collected.All patients were randomly divided into experimental group and control group,24 cases in each group.All patients were treated with surgery,control group was treated with temozolomid capsule(150 mg/m2) orally, one times per day, 28 days for a treatment period of 5 days continuous administration.On the basis of control group, experimental group was treated with compound ammonium glycyrrhetate injection 40 mL, dissolved in 250 mL 5% glucose solution intravenously,one times per day,four weeks was a period of treatment.After two groups were treated two period of treatment,the serum levels of PDGF, IL-17,MCP-1and SRF were detected in all patients.ResultsAfter treatment, compared with control group, the serum PDGF level was lower than that of experimental group (P<0.05);the serum IL-17 level was lower than that of experimental group (P<0.05);the serum MCP-1 level was higher than that of experimental group (P<0.05);the serum SRF level was lower than that of experimental group(P<0.05).ConclusionGlycyrrhizin could significantly reduce the serum PDGF, IL-17 and SRF levels,increase MCP-1 levels, have guidance significance for clinic.

glycyrrhizin; glioma; platelet derived growth factor; interleukin 17; monocyte chemotactic protein 1; serum response factor

郭高飛，通訊作者，男，本科，主治醫師，研究方向：神經外科，E-mail：guogaofei2015@sina.com。

R651

A

1005-1678(2015)09-0094-03