替比夫定輔助治療對乙型肝炎肝硬化患者血清IL-18、IL-12、IL-37及TNF-α水平的影響

劉建濤，張旭

(遷安市傳染病醫院 肝內科，河北 唐山 064400)

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替比夫定輔助治療對乙型肝炎肝硬化患者血清IL-18、IL-12、IL-37及TNF-α水平的影響

劉建濤Δ，張旭

(遷安市傳染病醫院 肝內科，河北 唐山 064400)

目的 探究替比夫定輔助治療對乙型肝炎肝硬化患者血清白介素-18(interleukin-18，IL-18)、IL-12、IL-37及腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)水平影響。方法 收集2013年10月～2015年6月遷安市傳染病醫院肝內科乙型肝炎肝硬化患者66例，根據治療方法不同分為對照組和治療組，其中治療組34例，對照組32例，2組均采用臨床乙型肝炎肝硬化常規治療方案，治療組在此基礎上加用替比夫定輔助治療，治療結束后對比分析血清IL-18、IL-12、IL-37、TNF-α水平以及不良反應。結果 治療后2組血清IL-18、IL-12、IL-37及TNF-α水平下降(P<0.05)。治療后與對照組相比，治療組患者血清上述指標水平較低(P<0.05)。結論 替比夫定輔助治療乙型肝炎肝硬化具有抑制病毒復制，改善肝功能以及免疫反應。

替比夫定；乙型肝炎肝硬化；白介素-18；白介素-12；白介素-37；腫瘤壞死因子α

世界范圍內超過3.5億人為慢性乙肝病毒(hepatitis B virus，HBV)攜帶者，其中約25%最終發生肝硬化[1]。據統計，每年死于慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B，CHB)包括它的并發病者約100萬[2]。HBV相關指標持續陽性，轉氨酶水平反復波動，嗜酒等因素使乙型肝炎肝硬化的發生率逐年升高，并且增加了肝癌的發生率。肝硬化患者通過使用抗病毒藥物抑制病毒的復制以及機體免疫清除反應，緩解病情，降低原發性肝癌的發生率，核苷類抗病毒藥物是治療的首選藥物[3]。替比夫定是新型的核苷類似物抗病毒藥物，具有強效抑制HBV- DNA的作用，調節免疫功能[4]。本實驗通過研究和分析替比夫定輔助治療對乙型肝炎肝硬化患者血清白介素-18(interleukin-18，IL-18)、IL-12、IL-37及腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)水平影響，探究替比夫定輔助治療的療效。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2013年10月～2015年6月遷安市傳染病醫院肝內科乙型肝炎肝硬化患者66例， 男性43例，女性23例，年齡40～59歲，平均年齡(45.74±5.27)歲，采用隨機數字分配法分為治療組與對照組，其中治療組34例，男性22例，女性12例，年齡43～59歲，平均年齡(46.45±5.02)歲，病程3～14個月，平均(7.85±2.06)月；對照組32例，男性21例，女性11例，年齡40～56歲，平均年齡(43.85±5.35)歲，病程3～15個月，平均(7.68±2.21)月，2組患者年齡、性別、病程等一般資料相仿，差異無統計學意義。

納入標準：所有患者均符合以下條件：①診斷符合2009年制定的《AASLD慢性乙型肝炎指南》[5]中乙型肝炎肝硬化的診斷標準，具備以下臨床特點：代償期顯示為輕微乏力、腹脹、肝脾腫大以及輕度黃疸；失代償期出現全身乏力、消瘦、尿少、下肢浮腫。胃腸功能紊亂、貧血以及低蛋白血癥等；②血常規顯示血紅蛋白、血小板以及白細胞水平降低；肝功能檢測顯示血清白蛋白降低，免疫球蛋白升高；病原學檢查HBV-M陽性；③X線顯示食管-胃底靜脈出現蚯蚓樣靜脈曲張；CT檢查肝臟各葉比例失常，肝門增寬變大，腹腔積液。患者均為自愿參與本實驗，并簽署知情協議書。本研究獲得遷安市傳染病醫院倫理委員會批準。

排除標準：①妊娠期或哺乳期婦女，近期接受化療藥物、免疫抑制劑或肝毒性藥物，藥物過敏史，合并其他肝臟疾病；②嚴重心、腎等多臟器功能障礙或衰竭；③糖尿病、惡性腫瘤、癲癇等神經系統疾病，肝外阻塞性黃疸；④年齡小于18歲或大于65歲。

1.2 方法

1.2.1 治療方法：患者進行常規保肝、對癥治療以及治療并發癥，采用注射用還原型谷胱甘肽(意大利 Biomedica Foscama Industria Chimico Farmaceutica S.p.A.，注冊證號：H20100204)1.8 g溶于250 mL 0.9%氯化鈉溶液中，靜脈滴注；肝水解肽注射液(吉林敖東洮南藥業股份有限公司，國藥準字H22025669)20 mg，溶于100 mL 0.9%氯化鈉溶液中，靜脈滴注；維生素K1注射液(國藥集團容生制藥有限公司，國藥準字H20043401)10 mg，溶于100 mL 0.9%氯化鈉溶液中，靜脈滴注。治療組患者在此基礎上給予替比夫定片(北京諾華制藥有限公司，國藥準字H20070028)600 mg口服，1次/天，中重度腎臟功能不全者或進行血液透析患者減少用量。7 d為1個周期，治療2個周期。

1.2.2 血清IL-18、IL-12和IL-37水平檢測：患者于治療前后，采空腹靜脈血5 mL，置于3500 r/min離心20 min，-20 ℃冰柜內冷凍保存，檢驗前取出置于室溫內30 min解凍，采用長春博特生物技術有限公司的試劑盒，以ELISA法在CLARIOstar多功能酶標儀(香港伯齊科技有限公司)上進行 IL-18、IL-12和IL-37檢測。

1.2.3 血清TNF-α水平檢測：患者于治療前后，空腹抽血，分離血清，采取雙單克隆抗體夾心法測定TNF-α水平，試劑盒購買于武漢博士的生物技術有限公司。

2 結果

2.1 2組患者血清IL-8、IL-12及IL-37水平比較 治療前2組血清IL-8、IL-12及IL-37水平比較差異無統計學意義。治療后2組IL-18、IL-12及IL-37水平下降(P<0.05)，與對照組相比，治療組IL-18、IL-12及IL-37水平較低(P<0.05)。見表1。

表1 2組患者血清IL-12、IL-18及IL-37水平比較Tab.1 Comparison of serum IL-8，IL-12 and IL-37 levels between

*P<0.05，與同組治療前比較，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，與對照組治療后比較，compared with control group post-treatment

2.2 2組血清TNF-α水平比較 治療前2組血清TNF-α水平比較差異無統計學意義。治療后2組TNF-α水平下降(P<0.05)，與對照組相比，治療組TNF-α水平較低(P<0.05)。見表2。

表2 2組患者血清TNF-α水平比較Tab.2 Comparison of serum TNF-α levels between two groups(±s，μg/L)

*P<0.05，與同組治療前比較，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，與對照組治療后比較，compared with control group post-treatment

2.3 2組患者不良反應發生情況比較 對照組患者出現惡心2例、頭疼2例、氣脹及消化不良3例、腹痛7例，治療組出現惡心1例、頭疼1例、氣脹及消化不良1例，治療組總不良反應率8.82%(3例)顯著低于對照組的43.75%(14例)，差異有統計學意義(χ2=10.52，P<0.05)。

3 討論

乙型肝炎病毒是一個嚴重的世界公共衛生問題，研究顯示全球約20億HBV感染者，每年約有100萬人死于肝炎病毒感染所致的肝硬化[6]。肝硬化晚期出現肝臟功能損害以及門靜脈高壓，表現為多器官受累，導致上消化道出血、繼發感染、腹水以及脾功能亢進等并發癥。在細胞激酶刺激下替比夫定被磷酸化為活性產物腺苷，通過HBV天然底物胸腺嘧啶的競爭作用，從而抑制HBV-DNA多聚酶，終止乙肝病毒DNA鏈延長，阻止乙肝病毒的復制[7]。臨床應用替比夫定治療乙型肝炎病毒復制并伴有血清氨基轉移酶升高或者肝臟組織病變肝功能代償等疾病的成年慢性乙型肝炎患者。

IL-18產生于巨噬細胞、枯否氏細胞以及上皮細胞的活化作用，具有誘導免疫細胞分泌γ干擾素(interferon-γ，IFN-γ)，刺激NK 細胞以及T細胞的增殖分化，使淋巴細胞毒性作用增加，刺激Th細胞分泌IFN-γ、IL-2以及粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony-stimulating factor，GM-CSF)等，黏附因子以及FasL表達作用增強，借助FasL依賴性肝細胞凋亡模式，最終造成肝臟受損。IL-12是具有與IL-18相同抗病毒感染作用的細胞因子[8]，有利于機體病毒清理，發生持續的炎癥反應。IL-12和IL-18協同作用，共同誘導CD4+T分化為Th1細胞，發揮特異性免疫反應，清除病毒并攻擊表面HBV抗原，損傷肝細胞。研究顯示，乙型肝炎肝硬化患者IL-12和IL-18水平較健康人明顯增高[9]，具有檢測疾病發展以及病毒復制狀態的應用價值。結果顯示，與對照組相比，替比夫定輔助治療組IL-18、IL-12水平降低顯著(P<0.05)，證實了替比夫定具有抑制病毒復制，緩解病情的作用。

IL-37是人體外周血單核細胞細胞因子，由血漿單核細胞以及肺上皮細胞過度表達產生，其過度表達引起體內炎癥發應，炎癥因子表達中斷，促炎因子的表達合成量降低，其表達降低樹突狀細胞、巨噬細胞、中性粒細胞、CD4+T、CD8+T、CD19+B等細胞，阻止IL-1β、TNF-α等促炎細胞因子分泌，在病原微生物清理過程中發揮重要作用，通過負反饋機制抑制過度的免疫反應。研究顯示，隨著肝功能損傷程度加重，IL-37水平增高[10]。結果顯示，與對照組相比，替比夫定輔助治療組IL-37水平降低顯著(P<0.05)，證實替比夫定改善肝功能以及免疫反應。

有研究顯示，乙型肝炎肝硬化患者TNF-α水平顯著高于健康人[11]。TNF-α是一種內源性細胞因子，主要產生于單核-巨噬細胞，正常人機體內TNF-α具有調節免疫調節、抗感染以及抗腫瘤的作用，過度分泌導致膿毒敗血癥、感染性休克以及多器官功能衰竭等癥狀的發生。乙型肝炎肝硬化患者機體內，TNF-α屬于細胞因子介導，對肝細胞造成損害。研究顯示，與對照組相比，替比夫定輔助治療TNF-α水平降低顯著(P<0.05)，證實替比夫定阻止肝臟受損，改善病情。

替比夫定臨床常見不良反應為虛弱、頭痛、惡心、腹瀉以及消化不良等，均為可逆[12]。本研究顯示，與對照組相比，替比夫定輔助治療組臨床不良反應發生率較低(P<0.05)。研究證實替比夫定不良反應發生率低，安全性高。

本研究通過對本院乙型肝炎肝硬化患者66例的血清IL-18、IL-12、IL-37、TNF-α水平以及不良反應進行研究，證實了替比夫定輔助治療乙型肝炎肝硬化具有抑制病毒復制，改善肝功能以及免疫反應，緩解病情的作用，藥物毒副作用小，適宜臨床推廣。在下一步研究中，本課題組將進行生物分子學研究，對本實驗過程中出現的現象做進一步研究。

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[5] 張學武，李旭.2009年AASLD慢性乙型肝炎指南(摘登)[J].國際流行病學傳染病學雜志，2010(1)：4-7.

[6] 王建麗，沈亞萍.乙型肝炎疫苗和乙型肝炎免疫球蛋白聯合應用阻斷乙型肝炎母嬰傳播的療效觀察[J].中國婦幼保健，2007，22(19)：2665-2666.

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[11] 陳銀蕓，霍繼榮.乙型肝炎肝硬化并發腹膜炎患者血清及腹腔積液TNF-α，IL-8，IL-18水平臨床意義的探討[J].中國當代醫藥，2010，17(14)：32-34.

[12] 張彥芳，胡玉紅.替比夫定阻斷乙型肝炎病毒母嬰傳播的療效和安全性[J].藥物不良反應雜志，2010，12(3)：157-159.

(編校：王儼儼)

Effect of telbivudine on serum IL-18,IL-12, IL-37 and TNF-α levels in patients with HBV-related hepatocirrhosis

LIU Jian-taoΔ, ZHANG Xu

(Department of Hepatopathy, Qian’an Infectious Disease Hospital, Tangshan 064400)

ObjectiveTo explore the effect of telbivudine on serum interleukin-18(IL-18),IL-12, IL-37 and tumor necrosis factor α(TNF-α) levels in patients with HBV-related hepatocirrhosis.Methods66 cases of patients with HBV-related hepatocirrhosis were collected and divided into treatment group and control group according to the different treatment method, 34 cases in control group were treated with routine treatment, 32 cases in treatment group were treated by telbivudine on the basis of routine treatment. The serum IL-18, IL-12, IL-37, TNF-α levels and adverse reactions were compared post-treatment.ResultsCompared with control group, the levels of IL-18, IL-12, IL-37 and TNF-α decreased significantly post-treatment(P<0.05). The above levels were significantly lower in treatment group post-treatment than that in control group(P<0.05).ConclusionTelbivudine adjuvant therapy could suppress viral replication, and improve liver function and immune response in patients with HBV-related hepatocirrhosis.

telbivudine; HBV-related hepatocirrhosis; interleukin-18; interleukin-12； interleukin-37; tumor necrosis factor α

劉建濤，通信作者，男，本科，主治醫師，研究方向：慢性乙型肝炎的抗病毒治療、重癥肝炎的搶救治療，E-mail：13933394586@139.com。

R575.2

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1005-1678(2015)11-0130-03