尼群地平雜質A的合成及結構確認①

許宏昌，張紅軍，王月娥

(大連弘豐制藥有限公司，遼寧 大連 116052)

尼群地平雜質A的合成及結構確認①

許宏昌，張紅軍，王月娥

(大連弘豐制藥有限公司，遼寧 大連 116052)

目的：合成尼群地平雜質A并確認結構。方法：尼群地平于冰醋酸和稀硫酸中與硫酸鈰反應得雜質A。結果：收率約70%。結論：所得產物經UV、IR、MS和HMR等確認其結構。

尼群地平；尼群地平雜質A；合成；結構確認

尼群地平(Nitrendipine)為第二代二氫吡啶類鈣拮抗劑，中國藥典二部2010年版[1]和歐洲藥典EP8.0版[2]均收載。2, 6-二甲基-4-(3-硝基苯基)吡啶-3, 5-二甲酸甲基乙基酯為尼群地平的有關物質之一，英國藥典2000版及歐洲藥典4.0版即開始將其作為關鍵控制雜質，稱之為雜質A(Nitredipine Impurity A)。為提高尼群地平藥品標準的需要，我們于2003年合成了雜質A并經UV、IR、MS和HMR等確認其結構。該物質經中國藥品生物制品檢定所岳志華等[3]復核，正式列入中國藥典二部2010年版作為國家對照品分發并稱之為雜質I。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

YRT-3熔點儀(天津大學精密儀器廠)，UV-2102OPCS型紫外可見分光光度計(尤尼柯(上海)儀器有限公司)，Avatar 360型紅外光譜儀(美國尼高力公司)，HP 110-MSD 型質譜儀(美國惠普公司)，Varian INOVA 400型核磁共振儀(美國瓦里安公司)。

1.2 試藥

尼群地平(大連弘豐制藥有限公司)，硫酸鈰(Ce(SO4)2)·4H2O(分析純)，雜質A歐洲對照品(EP)(購自英國)。

2 方法

2.1 雜質A的制備

尼群地平雜質A的合成路線如圖1。具體方法如下：尼群地平0.5g，溶于冰醋酸20mL和稀硫酸10mL中，加鄰二氮菲指示液2滴，攪拌下緩慢滴加0.1mol/L硫酸鈰溶液15.1mL至紅色消失；調pH近中性，放置析出沉淀，濾出沉淀，水洗，于40℃以下干燥，得白色結晶粉末0.35g，收率70%。

圖1 合成路線

2.2 測定方法2.2.1 熔點測定

取雜質A適量，研成細粉，按中國藥典2005版附錄熔點測定第一法測定熔點。

2.2.2 紫外測定

取雜質A適量，用無水乙醇制成每1mL中約含20μg的溶液。將溶液置1cm石英吸收池內，以無水乙醇為參比，在可見-紫外分光光度計上，于200～400nm掃描，記錄紫外吸收光譜及其數據。

2.2.3 紅外測定

取雜質A約1mg，按溴化鉀壓片法制備紅外掃描試樣，于紅外分光光度計上于400～4000cm-1區間掃描，記錄紅外光譜及主要光譜數據。

2.2.4 質譜測定

稱取雜質A適量，置于棕色容量瓶中，加入甲醇進行溶解并稀釋，配制濃度為0.1mg/mL的供試品溶液。設定離子源為ESI源，流動注射泵直接進樣的流速為5μL/min，毛細管電壓為4000V，毛細管溫度為325℃，鞘氣流速為10L/min，輔助氣流速為0.15L/min，碰撞氣為氦氣，鞘氣和輔助氣為氮氣，質荷比的掃描范圍為210～400m/z，在正離子模式下，進行一級離子全掃描，記錄雜質A的質譜圖及各離子的數據。

2.2.5 核磁共振譜測定

取雜質A適量，置于直徑5mm核磁共振樣品管中，加入適量的氘代三氯甲烷使其完全溶解。在測試溫度25℃，環境濕度35%下，調整儀器的觀察頻率、譜寬、脈沖寬度、采集時間、脈沖延遲時間、累加次數等參數，經鎖場、勻場后測定雜質A樣品的氫譜的質子化學位移值?；瘜W位移δ精確到±0.01ppm，偶合常數精確到±0.1Hz。另按照碳核磁共振波譜儀操作規程，調整儀器的參數，分別以適宜寬度的脈沖序列，測定雜質A樣品的碳化學位移值。

3 結果與討論

3.1 結果

3.1.1 熔點

毛細管法測得雜質A的熔點為mp 60.5～61.5℃，與歐洲對照品一致。

3.1.2 紫外光譜

尼群地平雜質A的紫外吸收圖譜沒有最大吸收峰，并與歐洲對照品完全一致。

3.1.3 紅外圖譜

尼群地平雜質A及其歐洲對照品(EP)的特征紅外吸收峰位置(cm-1)、透光率(T%)見來源見表1。

雜質A的紅外吸收圖譜與歐洲對照品(EP)所得圖譜完全一致。另與尼群地平的紅外圖譜比較，雜質A缺少一個3318cm-1γ(NH)峰，與其結構特征相符。

表1 雜質A與其歐洲對照品的特征紅外吸收峰

3.1.4 質譜測定

正離子掃描方式下，雜質同A的質譜圖見圖2。分析圖1得到，質荷比(m/z)359，相對強度12%的準分子離子峰為雜質A的加氫峰；質荷比381的基峰為雜質A的加鈉峰，分子離子峰的m/z與雜質A的計算分子量358符合。

圖2 雜質A質譜圖

3.1.5 核磁共振譜位移歸屬

雜質A的1H-NMR(CDCl3)和13C-NMR(CDCl3)核磁共振譜位移歸屬分別如下：

1H-NMR(CDCl3) 譜位移歸屬δ/ppm：1.08(3H,t,7.14,11-CH3)，2.63(3H, s, 2-CH3)，2.64(3H, s, 6-CH3)，3.59(3H,s,9-CH3)，4.06(2H, q, 7.14, 10-CH2)，7.57 (1H, m, 5′或6′-H)，7.68(1H, m, 6′或5′-H)，8.18 (1H, m, 2′-H)，8.27 (1H, m, 4′-H)。

13C-NMR(CDCl3)譜位移歸屬 δ/ppm：156.4(C-2)，126.7(C-3)，143.7(C-4)，126.5(C-5)， 156.3(C-6)，23.3(C-2-CH3)， 23.3(C-6-CH3)，52.6(C-9)，61.8(C-10)，13.9(C-11)， 167.9(C-7)，167.3(C-8), 150.0(C-1′)，123.6 (C-2′)，138.2(C-3′)，123.3 (C-4′)，129.4(C-5′)，134.4(C-6′)。

3.2 討論

雜質A的制備方法為典型的二氫吡啶環氧化脫氫反應，在所用條件下可瞬間精確定量完成。雜質A的熔點、紫外吸收圖譜及紅外吸收圖譜與歐洲對照品(EP)完全一致，并參照尼群地平的紅外圖譜作為旁證。結合質譜所得分子量與結構相符，可以確認其結構。1H-NMR(CDCl3)和13C-NMR(CDCl3)核磁共振譜位移歸屬完全支持結構特征。

[1]國家藥典委員會. 中國藥典2010年版二部[S]. 2010，232

[2]Council of Europe strasbourg. European Pharmacopoeia[S]. 8.0 Edition. 2859-2860

[3]岳志華, 牛秀華, 張啟明. 關于中國藥典與英國藥典(2005年版)尼群地平原料和片劑中有關物質檢查HPLC方法的比較與討論[J]. 中國藥品標準, 2007, 8(5):5-6

Synthesis and determination of Nitrendipine Impurity A

XUHong-chang,ZHANGHong-jun,WANGYue-e

(Dalian Hongfeng Pharmaceutical Co., Ltd,Dalian 116052, China)

Objective: To compound Nitrendipine Impurity A. Methods: Impurity A was obtained by Nitrendipine and cerous sulfate in a mixture of acetic acid and dilute sulfuric acid. Results: The yield was about 70%. Conclusion: The structure was determined by UV, IR, MS, 1H-NMR and 13C-NMR.

Nitrendipine; Nitrendipine Impurity A; synthesis; structure determined

許宏昌(1953～)男，遼寧丹東人，高級工程師。

R284.1

A

1008-0104(2015)01-0026-02

2014-05-11)