山茱萸納米制劑對衰老小鼠腦組織akt基因mRNA表達(dá)的影響①

劉鴻飛，王明富，梁立春，張 濤

(佳木斯大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，黑龍江 佳木斯 154007)

山茱萸納米制劑對衰老小鼠腦組織akt基因mRNA表達(dá)的影響①

劉鴻飛，王明富，梁立春，張 濤

(佳木斯大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，黑龍江 佳木斯 154007)

目的：探討山茱萸納米制劑對自然衰老小鼠腦組織akt基因mRNA表達(dá)的影響。方法：以衰老小鼠(11～12月齡)、青年小鼠(2～3月齡)為研究對象，灌服山茱萸納米制劑，采用 RT-PCR方法檢測 akt基因mRNA的表達(dá)。結(jié)果：衰老小鼠腦組織akt基因mRNA表達(dá)量較青年小鼠低，山茱萸納米制劑可以不同程度的提高衰老小鼠腦組織akt基因mRNA的表達(dá)。結(jié)論：山茱萸納米制劑顯著提高衰老小鼠腦組織akt基因mRNA的表達(dá)，使衰老小鼠腦組織akt基因 mRNA表達(dá)趨于年輕化。

山茱萸；衰老小鼠；akt基因

山茱萸具有補(bǔ)益肝腎、收斂固澀之功效，還具有抗菌、調(diào)節(jié)免疫、降血糖、降血脂、抗氧化、抗癌、抗衰老等功效[1～3]。akt基因表達(dá)為分子量60kDa絲/蘇氨酸蛋白激酶，后者具有多種生物學(xué)功能。前期我們實(shí)驗探討了山茱萸對衰老小鼠腦組織的p66shc表達(dá)及p-FoxO1蛋白表達(dá)的影響[6]，初步發(fā)現(xiàn)山茱萸抗腦衰老方面的作用及其機(jī)制。本實(shí)驗觀察山茱萸納米制劑對akt基因mRNA表達(dá)的影響，探討延緩腦衰老中akt基因的作用。

1 材料與方法

1.1 藥品和制劑

山茱萸購于佳木斯大學(xué)醫(yī)學(xué)院藥店，經(jīng)鑒定符合藥典標(biāo)準(zhǔn)。

1.2 實(shí)驗動物

1.2.1 人工飼養(yǎng)自然衰老小鼠(11～12月齡)90只，體重41～52g，隨機(jī)分成9組，每組10只，青年小鼠(2～3月齡)10只，體重20～25g，分1組，總計10組動物。同室分籠飼養(yǎng)，自由進(jìn)食(基礎(chǔ)飼料)和水，室溫(24±2)℃飼養(yǎng)，相對濕度50%～60%。

1.2.2 自然衰老小鼠基礎(chǔ)飼養(yǎng)5d后再次稱重給藥，1)青年對照組、衰老對照組自由進(jìn)食(基礎(chǔ)飼料)和水；2)給藥組：納米水提大劑量組、納米水提小劑量組、納米醇提大劑量組、納米醇提小劑量組、常藥水提大劑量組、常藥水提小劑量組、常藥醇提大劑量組、常藥醇提小劑量組 山茱萸大劑量組、小劑量組分別按照1.5g/kg·d、0.75g/kg·d體重劑量連續(xù)灌服30d。

1.3 實(shí)驗方法和指標(biāo)測定

各組小鼠于實(shí)驗結(jié)束時斷頭處死，4℃條件下立即取出全腦，DEPC配置的鹽水沖洗去除雜質(zhì)，錫紙包裹后置于液氮備用。RT-PCR試劑盒測定腦組織akt基因mRNA轉(zhuǎn)錄活性，操作步驟按照試劑盒說明進(jìn)行。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié)果

山茱萸及其納米制劑對小鼠腦組織akt基因mRNA表達(dá)的影響見圖1，見表1。

圖1 山茱萸對小鼠腦組織akt基因mRNA和β-actin表達(dá)的影響

注：與CONTROL比*P<0.05，**P<0.01；與YOUNG比

△P<0.05，△△P<0.01；與NMWL相比▲▲P<0.01，與NMWS比◇P<0.05，◇◇P<0.01；與CWL比☆P<0.05，☆☆P<0.01；與CWS相比★P<0.05，★★P<0.01。

圖2 壽命相關(guān)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的干路與支路

3 討論

本實(shí)驗小鼠腦組織akt基因mRNA表達(dá)因衰老而顯著降低，山茱萸可以提高akt基因mRNA轉(zhuǎn)錄活性。實(shí)驗研究顯示：衰老小鼠腦組織akt-mRNA表達(dá)較青年組表達(dá)明顯降低，其中納米水提液大劑量組、納米水提液小劑量組腦組織Akt-mRNA表達(dá)有明顯升高。結(jié)果提示山茱萸除對衰老小鼠腦組織的p66shc-p-FoxO1蛋白途徑影響達(dá)到延緩小鼠腦衰老外[4～7]，還有可能通過PI3K-AKT途徑發(fā)揮延緩腦衰老作用(見圖2)。我們還將探討山茱萸對PI3-K表達(dá)的影響，進(jìn)一步闡明山茱萸延緩腦衰老的作用機(jī)制。

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The effects of Cornus nano preparation on the expression of mRNA of akt gene in brian tissue of aging mouse

LIUHong-fei，WANGMing-fu，LIANGLi-chun，ZHANGTao

(The Basic Medical College of Jiamusi University,Jiamusi 154007，China)

Objective: To investigate the effects of Cornus nano preparation on the expression of mRNA of akt gene in brain tissue of aging mouse.Methods: Aging mice (11～12 months),young mice(2～3 months)was used as the research object, which were given Cornus nano preparation by gavage. Then the expression of mRNA of akt gene was examined by RT-PCR. Results: The expressions of mRNA of akt gene in brain tissue of aging mice were lower than those in young mice, but the expression of mRNA of akt gene was increased in various degrees in brian tissus of aging mice given Cornus nano preparation. Conclusion: Cornus nano preparation significantly increased the expression of mRNA of akt gene in brain tissue of aging mice, and it makes the expression level of mRNA of akt gene in brain tissue of aging mice close to that of the young mice.

Cornus; aging mouse; akt gene

佳木斯大學(xué)科研資助項目，編號：S2010-46。

劉鴻飛(1989～)男，河北邯鄲人，在讀碩士研究生。

張濤(1964～)女，黑龍江佳木斯人，博士，教授，碩士研究生導(dǎo)師。E-mail:jmstao@163.com。

R285.5

A

1008-0104(2015)01-0022-02

2014-09-13)