柱溫對膽固醇鍵合固定相分離黃酮苷的影響及其熱力學分離機理研究

韓疏影　俞慧敏　譚力　王勇　裴玉瓊　池玉梅

摘 要 柱溫屬于高效液相色譜（HPLC）的可調參數之一，但在實際操作過程中，柱溫對溶質保留行為的影響通常被忽略，不作為色譜條件優化參數。本研究分別以甲醇0.02 mol/L乙酸（30∶70， V/V）及甲醇0.02 mol/L乙酸（25∶75， V/V）為流動相，討論了柱溫對6種黃酮苷在一種新型色譜固定相膽固醇鍵合固定相以及C18鍵合固定相上分離的影響。結果表明，隨著柱溫升高，不同于十八烷基鍵合固定相，黃酮苷在膽固醇鍵合固定相上的分離效果得到改善，且峰形變好。同時，擬合了25℃～55℃溫度范圍內的van′t Hoff方程，從熱力學角度比較了黃酮苷在膽固醇鍵合固定相和十八烷基鍵合固定相上的保留機理。結果表明，黃酮苷在兩種色譜柱上的van′t Hoff方程均具有良好的線性關系（R2>0.99），且擬合參數相近（ΔH0<0， ΔS0<0），表明這些物質在膽固醇鍵合固定相上的保留機理與在十八烷基鍵合固定相上相似，以單一的疏水性保留機理為主導，均屬于焓驅動過程。本實驗證實，在使用膽固醇鍵合固定相時，柱溫可作為一項重要調節參數， 參與色譜優化過程，從而使液相色譜從兩變量調節方式（流動相種類和流動相比例）變為三變量調節方式（流動相種類、比例和柱溫），從而為色譜條件優化提供了更多選擇。

關鍵詞 高效液相色譜； 膽固醇鍵合固定相； 十八烷基鍵合固定相； 黃酮苷； van′t Hoff方程endprint