胃腺癌術后組織中癌胚抗原相關黏附分子、基質金屬蛋白酶-14表達特征及對血管生成的促進作用

馬金華 王麗娟 馬金蘭 馬金祥

(青海大學附屬醫院腫瘤內科1病區，青海 西寧 810000)

胃腺癌術后組織中癌胚抗原相關黏附分子、基質金屬蛋白酶-14表達特征及對血管生成的促進作用

馬金華 王麗娟 馬金蘭1馬金祥2

(青海大學附屬醫院腫瘤內科1病區，青海 西寧 810000)

目的 檢測胃腺癌術后組織中癌胚抗原相關黏附分子(CEACAM)6和基質金屬蛋白酶(MMP)-14的表達，探討其與血管內皮標志物白細胞分化抗原(CD)34陽性的微血管密度(MVD)的相關性。方法 以胃腺癌術后組織85例作為觀察組，選擇77例距腫物邊緣>3 cm的切端為正常的胃黏膜組織作為對照組，應用免疫組化方法檢測CEACAM6、MMP-14和CD34的表達。結果 觀察組中CEACAM6、MMP-14的陽性率、MVD值均明顯高于對照組。觀察組中CEACAM6、MMP-14的陽性率、MVD值與最大徑線、壞死、脈管浸潤相關，MMP-14與淋巴結轉移相關。線性相關分析顯示CEACAM6和MVD 、MMP-14和MVD呈正相關。結論 胃腺癌中CEACAM6、MMP-14陽性率及MVD值均增高，不僅可以促進腫瘤的發生和進展，還可以在一定程度上判斷腫瘤的生物學行為。CEACAM6、MMP-14可能與胃腺癌的血管生成有一定作用。

胃腺癌；CEACAM6；MMP-14；微血管密度；血管生成

基因和蛋白表達失調是胃腺癌重要的促進因素。近來學者關注胃腺癌間質血管生成對腫瘤的促進作用，并相繼發現對血管生成的相關影響因素〔1〕。癌胚抗原相關細胞黏附分子(CEACAM)6為免疫球蛋白超家族的重要成員，是非特異性的交叉抗原，在致癌因子的誘導下，CEACAM6的表達可以升高，引起腫瘤細胞增生和細胞增殖活性的提高〔2,3〕。基質金屬蛋白酶(MMP)-14是MMPs家族的經典成員，對細胞外基質的降解作用已得到學者的認可，目前人們也發現其對血管生成有一定作用〔4〕。本實驗關注胃腺癌中CEACAM6、MMP-14，表達與CD34陽性的微血管密度(MVD)的相關性。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2010年1月至2013年12月我院確診為胃腺癌患者的臨床資料及術后蠟塊作為觀察組，共85例，其中男44例，女41例；年齡47～86歲，平均64.4歲。術前均未進行放、化療，均符合WHO中關于胃腺癌的病理學診斷標準，并經病理學醫師再次閱片證實。選擇77例距腫物邊緣>3 cm的切端正常胃黏膜組織(經病理學醫師確診)作為對照組，其中男40例，女37例；年齡50～80歲，平均62.5歲。兩組一般資料無明顯差異。

1.2 CEACAM6、MMP-14和CD34的檢測方法 CEACAM6、MMP-14和CD34試劑均為0.1 ml的濃縮液。正式實驗前依不同比例進行稀釋并進行預實驗，選擇最理想的配比濃度進行正式實驗。正式實驗應用免疫組化SP法、DAB顯色。操作均由病理科同一主管技師完成，嚴格按說明書進行，嚴格質控。

1.3 結果判定 CEACAM6、MMP-14的陽性部位是細胞質，以細胞質中出現棕黃色顆粒認定為陽性細胞。選擇腫瘤細胞密集的5個400倍視野，計數陽性率。以≥5%為陽性，<5%為陰性。CD34標記腫瘤間質的血管內皮細胞，選擇連續的細胞叢或分支狀連續的內皮細胞定為性血管，選取5個400倍視野，取平均值為MVD。

1.4 統計學方法 采用SAS6.12軟件進行χ2檢驗、線性相關性分析。

2 結 果

2.1 兩組中CEACAM6、MMP-14表達陽性率、MVD的比較 觀察組中CEACAM6和MMP-14表達陽性率、MVD均明顯高于對照組。見表1。

表1 兩組中CEACAM6、MMP-14陽性表達率、MVD的比較〔n(%)〕

2.2 觀察組中CEACAM6、MMP-14陽性率、MVD在不同臨床特征分組中的比較 觀察組中CEACAM6、MMP-14的陽性率、MVD值與最大徑線、壞死、脈管浸潤相關，MMP-14還與淋巴結轉移相關。見表2。

表2 觀察組中CEACAM6、MMP-14表達陽性率、MVD在不同臨床特征分組中的比較〔n(%)〕

2.3 觀察組中CEACAM6、MMP-14陽性率、MVD相關性分析 CEACAM6和MVD(r=0.52,P=0.019 7)、MMP-14和MVD(r=0.49,P=0.040 8)呈正相關。

3 討 論

胃腺癌是惡性上皮性腫瘤，在生物學和遺傳學上具有多樣性，病因學上也存在多種因素，其特征是具有廣泛的形態學異質性，表面為不同形式的結構和生長方式、細胞分化和組織發生〔5,6〕。胃腺癌是富于血管的惡性腫瘤，在胃腺癌病變發展過程中間質血管生成較多，當腫瘤快速生長過程中，新生血管明顯，為腫瘤組織提供氧和營養物質〔7〕。CD34是血管內皮的重要標記蛋白，其標記血管的特異性強，可以常規應用于腫瘤血管生成的研究中。CEACAM6相對分子量為90～95 kD，在腫瘤的表達失調后也可以引起細胞間黏附作用的下調，使腫瘤細胞易于脫離原發灶，進入脈管，或經過溶解的細胞外基質發生轉移〔8,9〕。也有觀點認為CEACAM6是原癌基因，主要通過結合相關蛋白，特征性地識別靶基因DNA序列中的E盒序列，并與其相結合，調節基因的激活，使轉錄功能增強〔10,11〕。CEACAM6促進腫瘤血管生成的作用可能更趨于多元性〔12〕。CEACAM6被激活后，可促進腫瘤內及腫瘤周邊血管的新生，加速腫瘤的生長，促進腫瘤轉移。褚潔等〔13〕在乳腺癌中檢測CEACAM6和MMP-2的表達，同時關注二者對血管生成的價值，發現二者均可以有效促進CD34陽性的血管生成，并認為CEACAM6和MMP-2可能還參與腫瘤相關蛋白的水解級聯反應，促進腫瘤生長、侵襲和轉移。MMP-14在發揮作用時常激活其他成員，主要是活化細胞表面的MMP-2和MMP-9，MMP-14 還可以降解細胞外基質的纖維支架〔14,15〕，有較強的溶纖維蛋白活性，參與內皮細胞的遷移、血管內皮的增殖及纖維蛋白的侵襲過程〔16,17〕。

本實驗提示CEACAM6、MMP-14是促進腫瘤發生的重要因素，也提示腫瘤中存在著較多的血管生成。CEACAM6、MMP-14參與腫瘤的生長、腫瘤性凋亡和壞死、脈管浸潤的過程中，也提示CEACAM6、MMP-14參與腫瘤的進展。壞死是惡性腫瘤的特征，也是致瘤因素對局部組織破壞的直接體現，CEACAM6、MMP-14的增高使腫瘤細胞對局部破壞能力增強，器官結構出現明顯變化。MMP-14是腫瘤淋巴結轉移的重要誘導因素。CEACAM6、MMP-14高表達參與腫瘤間質的血管新生。CEACAM6和MMP-14均可以促進CD34陽性的MVD高表達，此時血管生成活躍，管腔形成增多，局部組織血液供應量更多，腫瘤的失控性增生明顯，異常增殖加速，同時也為腫瘤細胞無限制生長提供了重要營養基礎。CEACAM6和MMP-14也可以促進血管生成相關因子分泌，如促進血管內皮生長因子表達，使促進腫瘤發生的相關基因活化，此時血管內皮增殖明顯〔18,19〕。也有觀點認為腫瘤的血管生成活躍時，可以在腫瘤血管周圍由固有血管形成出芽性改變，形成新生血管〔20〕，促進腫瘤進展。

綜上，胃腺癌中CEACAM6、MMP-14陽性率及MVD值均增高，不僅可以促進腫瘤的發生和進展，還可以在一定程度上判斷腫瘤的生物學行為。CEACAM6、MMP-14可能與胃腺癌血管生成有一定作用。

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〔2013-11-17修回〕

(編輯 苑云杰)

馬金華(1973-)，女，碩士，副主任醫師，主要從事腫瘤內科疾病研究。

R73

A

1005-9202(2015)12-3318-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2015.12.060

1 青海大學附屬醫院腎病內科 2 青海大學醫學院外科總論教研室