腎透明細胞癌中弗林蛋白酶、C-myc和Bcl-2的表達及意義

吳潔清 王 俠 魯廣建

(新鄉醫學院第一附屬醫院腫瘤內科，河南 衛輝 453100)

腎透明細胞癌中弗林蛋白酶、C-myc和Bcl-2的表達及意義

吳潔清 王 俠1魯廣建2

(新鄉醫學院第一附屬醫院腫瘤內科，河南 衛輝 453100)

目的 探討腎透明細胞癌組織中弗林蛋白酶(Furin)、人C-myc癌基因產物(C-myc)和B細胞淋巴瘤/白血病基因(Bcl)-2的表達及臨床意義。方法 123例腎透明細胞癌臨床資料及術后存檔的蠟塊組織作為觀察組，80例正常腎組織作為對照組。應用免疫組化SP法檢測兩組中Furin、C-myc和Bcl-2的表達。結果 兩組中Furin、C-myc和Bcl-2的表達差別顯著。觀察組Furin、C-myc和Bcl-2的表達與腫瘤的細胞核分級、Ki67增殖指數及是否伴有壞死密切相關。相關性分析顯示觀察組中Furin、C-myc和Bcl-2的表達均無明顯相關性(P>0.05)。結論 Furin、C-myc和Bcl-2高表達是腎透明細胞癌發生發展的促進因素，三者間未見明顯關聯性。

腎透明細胞癌；弗林蛋白酶(Furin)；C-myc；Bcl-2；免疫組化

腫瘤發展過程中多種蛋白表達失調〔1〕。弗林蛋白酶(Furin)是機體內前體蛋白加工酶，具有多種生物學功能〔2〕。學者近年發現Furin與腫瘤進展相關〔3〕。人C-myc癌基因產物(C-myc)是原癌基因，可以調節腫瘤細胞中DNA合成及細胞的分化，對腫瘤生長有明顯的促進作用〔4,5〕。Bcl-2是凋亡抑制基因，通過調節抗氧化途徑抑制細胞的凋亡，促進腫瘤的生長及進展〔6,7〕。本實驗關注腎透明細胞癌術后組織中Furin、C-myc和Bcl-2的表達及其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2011年1月至2013年12月我院經病理學確診的腎透明細胞癌患者123例的臨床資料和術后組織作為觀察組，均符合WHO的診斷標準。其中男63例，女60例；年齡50～79歲，平均65.3歲。術前均未進行放、化療。選擇距腫瘤邊緣>5 cm、經病理證實為正常腎組織的蠟塊組織80例作為對照組，其中男40例，女40例，年齡51～78歲，平均64.3歲。兩組在常規比較中無明顯差異。

1.2 Furin、C-myc和Bcl-2的檢測 Furin、C-myc和Bcl-2試劑均為濃縮液，正式檢測前按不同比例進行稀釋，并進行預實驗。選擇最理想的配比濃度應用于正式檢測。三種蛋白的檢測均由同一病理科主管技師操作，應用免疫組化SP法，嚴格按說明進行，嚴格質量控制。

1.3 Furin、C-myc和Bcl-2結果的判定方法 Furin、C-myc和Bcl-2均以細胞質和(或)細胞膜中出現棕黃色為陽性。計數10個高倍視野(400倍)，計算陽性細胞百分率。以陽性率≥5%為陽性，以<5%計為陰性。

1.4 統計學方法 應用SAS6.12軟件進行χ2檢驗和線性相關分析。

2 結 果

2.1 兩組Furin、C-myc和Bcl-2表達的比較 觀察組中Furin、C-myc和Bcl-2的表達明顯高于對照組，差異有統計學意義(P<0.000 1)。見表1。

表1 兩組Furin、C-myc和Bcl-2陽性表達的比較〔n(%)〕

2.2 觀察組Furin、C-myc和Bcl-2在不同分組中的比較 觀察組中Furin、C-myc和Bcl-2的表達與腫瘤的細胞核分級、Ki67增殖指數及是否伴有壞死密切相關。見表2。

表2 觀察組Furin、C-myc和Bcl-2陽性表達在不同分組中的比較〔n(%)〕

2.3 觀察組中Furin、C-myc和Bcl-2表達的相關性分析 觀察組中Furin、C-myc和Bcl-2的表達均未見相關性(P>0.05)。

3 討 論

腎透明細胞癌常位于腎皮質下，少數呈多中心性病變。腫瘤細胞的形態多樣，最常見的是泡巢狀和腺泡狀結構，腫瘤間質有小的薄壁血管構成的網狀間隔〔8〕。腫瘤細胞質內有脂質和糖原，常規制片過程中脂質溶解使細胞形成透明狀，細胞膜清楚。近來研究顯示多種抗體可以標記腎透明細胞癌，如角蛋白、波形蛋白等〔9〕。近來學者發現多種蛋白在腫瘤異常表達，不僅促進腫瘤的進展，還可能具有復雜的生物學功能〔10〕。Furin是新發現的蛋白，具有多種生物學功能，如對多肽的合成和分泌、細胞膜相關受體的成熟過程、相關級聯蛋白的激活等有重要影響〔11,12〕。近年認為Furin是腫瘤進展的重要因素，可以在多種腫瘤中表達，如宮頸癌〔13〕、胃腺癌〔14〕和舌鱗狀細胞癌〔15〕等。C-myc是原癌基因，不僅能與細胞核內的DNA形成有效的嵌合，還對轉錄因子有調控作用〔16〕。C-myc對增殖可能具有特殊作用，研究顯示C-myc是決定細胞從G0/G1期進入S期的開關，其高表達時可以使腫瘤細胞處于高增殖狀態〔17,18〕。Bcl-2是在t(14:18)染色體易位斷點處發現的癌基因，具有明顯的阻斷細胞程序化死亡的作用〔19〕。但是近年研究顯示并不是所有的凋亡都能被Bcl-2成功阻斷，因此機體還存在著其他調節凋亡的因素〔20,21〕。

本實驗結果提示Furin、C-myc和Bcl-2高表達是促進腫瘤發生和進展的重要因素。無論Furin、C-myc和Bcl-2的具體作用如何，上述實驗結果均顯示出三種蛋白類似的癌基因作用。Furin、C-myc和Bcl-2的作用過程可能不在同一通路上。Furin的表達程度可以在一定程度上反映腫瘤的生物學行為。C-myc可以通過調節下游相關靶基因轉錄過程，使C-myc參與細胞的周期調控、增殖分化與程序性死亡。也有觀點認為C-myc可以作用于缺乏TATA盒的核心啟動元件，通過參與細胞分化、發育、生長信號的轉導、細胞增殖和凋亡過程發揮作用〔4〕；結果顯示觀察組中Furin、C-myc和Bcl-2的表達與腫瘤的細胞核分級、Ki67增殖指數及是否伴有壞死密切相關，提示Furin、C-myc和Bcl-2對促進腫瘤進展及增殖有重要作用。三種蛋白均具有促進Ki67增殖的過程，這使腫瘤細胞獲得Furin、C-myc和Bcl-2表達失調信息后使細胞停滯在增殖旺盛期。Furin、C-myc和Bcl-2高表達引起細胞出現腫瘤性壞死，對局部組織的影響大，正常細胞損傷明顯。近年也有學者認為C-myc和Bcl-2對腫瘤血管生成有影響〔7〕，因此C-myc和Bcl-2對腫瘤生長的調控作用也可能與腫瘤細胞的失控性增殖和血管生成有關，但是其作用過程需待證實。

綜上，Furin、C-myc和Bcl-2高表達是腎透明細胞癌發生發展的促進因素，Furin、C-myc和Bcl-2高表達提示腫瘤處于進展期，三者間未見明顯關聯性。

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〔2013-12-19修回〕

(編輯 苑云杰)

吳潔清(1965-)，男，碩士，副主任醫師，主要從事腫瘤放化療研究。

R73

A

1005-9202(2015)12-3316-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2015.12.059

1 新鄉醫學院檢驗學院 2 新鄉醫學院第一附屬醫院檢驗科