地菍乙酸乙酯提取部位對糖尿病小鼠血糖、血脂及抗氧化作用的影響

李 麗 羅澤萍 周煥第 楊秀芬

(廣西中醫藥大學藥學院藥理教研室，廣西 南寧 530001)

地菍乙酸乙酯提取部位對糖尿病小鼠血糖、血脂及抗氧化作用的影響

李 麗 羅澤萍 周煥第 楊秀芬

(廣西中醫藥大學藥學院藥理教研室，廣西 南寧 530001)

目的 研究地菍乙酸乙酯提取部位對糖尿病(DM)小鼠血糖、血脂及抗氧化水平的影響。方法 腹腔一次性注射鏈脲佐菌素150 mg/kg制備DM小鼠模型，治療組分別按地菍乙酸乙酯提取部位高、中、低(60、40、20 g/kg)劑量每天灌胃1次，正常對照組和模型組則以等體積蒸餾水灌胃，連續10 d，觀察小鼠空腹血糖(FPG)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量，計算肝臟、腎臟臟器指數。結果 與DM模型組小鼠比較，地菍乙酸乙酯提取部位給藥組小鼠血糖、TC、TG顯著降低(P<0.01或P<0.05)，血清SOD活性明顯升高(P<0.01或P<0.05)，MDA含量明顯降低(P<0.01)，腎臟指數也明顯降低(P<0.01)。結論 地菍乙酸乙酯提取部位能明顯降低DM小鼠FPG，改善血脂代謝紊亂，并具有抗氧化作用。

地菍；糖尿病；血糖；血脂；抗氧化

地菍為野牡丹科植物地菍的全草,在廣西桂北瑤族地區，被稱為“莫翁樣”，是瑤醫藥的常用藥材之一〔1,2〕。關于地菍抗糖尿病(DM)的藥效學研究發現地菍水提物具有降血糖、降血脂作用〔3～5〕。本實驗對地菍降血糖活性部位進行研究，采用腹腔一次性注射鏈脲佐菌素(STZ)建立小鼠DM模型，觀察地菍乙酸乙酯提取部位對血糖、血脂及抗氧化水平的影響，并探討可能機制。

1 材料與方法

1.1 藥品與試劑 地菍藥材購自南寧市小瑤王藥店，由本校中藥鑒定教研室鑒定為野牡丹科植物地菍(MelastomadodecandrumLour.)的干燥全草。藥材加95%乙醇浸泡過夜，加熱回流提取3次，每次1 h，過濾，合并濾液，濃縮得乙醇總浸膏。總浸膏與硅膠(1∶2)拌樣，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇加熱回流萃取，分別濃縮成浸膏，本實驗取乙酸乙酯部位備用。STZ,美國Sigma公司產品(貨號：S0130，批號：031M1287V)(STZ溶液配制：取STZ溶于0.1 mol/L的檸檬酸-檸檬酸三鈉緩沖液，pH4.5，現配現用)。格列苯脲，山西云鵬制藥有限公司，批號：A110404。葡萄糖氧化酶法測定試劑盒(批號：1203021),總膽固醇(TC)測定試劑盒(批號1111051)，甘油三酯(TG)測定試劑盒(批號：0312061)，購自四川省邁克科技有限責任公司。丙二醛(MDA)測定試劑盒(批號：20120425)，超氧化物歧化酶(SOD)測試盒(批號：20120516)，購自南京建成生物工程研究所。

1.2 儀器 TU-1901雙光束紫外可見光分光光度計：北京普析通用儀器有限責任公司；臺式離心機：16K，珠海黑馬醫學儀器有限公司；旋轉蒸發儀：上海亞榮生化儀器廠。

1.3 實驗動物 昆明種小白鼠，清潔級，雌雄各半,體重(20±2)g,由廣西中醫藥大學實驗動物中心提供，實驗動物使用許可證號：SYXK桂2010-0001。

1.4 方法

1.4.1 小鼠DM模型建立、分組及給藥 取小鼠100只，除正常對照組12只外，其余小鼠腹腔注射新鮮配制的STZ溶液(150 mg/kg)，72 h 后 ,對禁食不禁水8 h的小鼠眼眶后靜脈叢取血，測血糖值，以空腹血糖(FPG)≥ 8.0 mmol/L即為DM模型成功并納入正式實驗。DM小鼠隨機分為5 組，每組12只，即模型組、格列苯脲組(格列苯脲0.4 g/kg)、地菍乙酸乙酯提取部位高、中、低(60、40、20 g生藥/kg)劑量組。各組小鼠均灌胃給予相應藥物，正常對照組和模型組給予等容量蒸餾水(20 ml/kg)，每日灌胃1次，連續給藥10 d。

1.4.2 指標檢測 于末次給藥后 1 h(禁食不禁水8 h)，小鼠拔眼球取血，分離血清，按試劑盒說明測定FPG、TC、TG、SOD、MDA等指標。小鼠處死后，剪取肝臟、腎臟稱重,計算臟器指數(臟器指數=臟器濕重÷體重×100%)。

2 結 果

2.1 地菍乙酸乙酯提取部位對DM小鼠FPG的影響 與正常對照組比較，給藥前(0 d)各組小鼠FPG明顯升高(P<0.01)，說明STZ致DM小鼠模型成功建立。給藥10 d后，與模型組比較，格列苯脲組、地菍乙酸乙酯提取部位組小鼠FPG顯著減低(P<0.01或P<0.05)。見表1。

2.2 地菍乙酸乙酯提取部位對DM小鼠血脂代謝的影響 與正常對照組比較，模型組小鼠TC、TG顯著升高(P<0.01)，說明模型組小鼠血脂代謝升高。與模型組比較，格列苯脲組、地菍乙酸乙酯提取部位高、中劑量組小鼠TC、TG顯著降低(P<0.01或P<0.05)。見表2。

表1 地菍乙酸乙酯提取部位對STZ致DM小鼠FPG的影響

與正常對照組比較：1)P<0.05，2)P<0.01；與模型組比較：3)P<0.05，4)P<0.01；下表同

表2 地菍乙酸乙酯提取部位對STZ致DM小鼠血脂的影響

2.3 地菍乙酸乙酯提取部位對DM小鼠SOD活性及MDA含量的影響 與正常對照組比較，模型組小鼠SOD活性明顯降低(P<0.01)，MDA含量明顯增加(P<0.01)，表明模型組小鼠抗氧化能力明顯低于正常對照組。與模型組比較，格列苯脲組、地菍乙酸乙酯提取部位組小鼠SOD活性顯著升高(P<0.01或P<0.05)，MDA含量明顯降低(P<0.01)。見表3。

2.4 地菍乙酸乙酯提取部位對DM小鼠臟器指數的影響 與正常對照組比較，各組小鼠肝臟指數無明顯變化(P>0.05)，而模型組小鼠腎臟指數顯著升高(P<0.01)。與模型組比較，各組小鼠肝臟指數無明顯變化(P>0.05)，格列苯脲組、地菍乙酸乙酯提取部位各劑量組小鼠腎臟指數則顯著降低(P<0.01)。見表4。

表3 地菍乙酸乙酯提取部位對STZ致DM小鼠血清MDA含量及SOD活性的影響

表4 地菍乙酸乙酯提取部位對STZ致DM小鼠臟器指數的影響±s)

3 討 論

STZ是胰島β細胞毒劑，STZ通過自由基反應損傷胰島細胞膜及有關細胞器的膜結構，使膜脂質過氧化，進而損傷β細胞引發DM〔6〕。本實驗結果提示小鼠實驗性2型糖尿病模型建立成功。地菍乙酸乙酯提取部位可降低DM小鼠空腹血糖，降低TC、TG，顯著改善脂質代謝紊亂。SOD是機體細胞內清除氧自由基的多種酶之一，能催化氧自由基轉化為氧和過氧化氫，從而保護組織細胞免受氧自由基的損傷〔7〕。在長期高糖誘導下，SOD等分子發生了非酶性糖基化從而使酶活性降低，對過氧化氫(H2O2)清除減少，H2O2可通過一系列鏈鎖式反應生成更多其他的自由基，過多的自由基使線粒體膜多不飽和脂肪酸發生脂質過氧化反應，形成脂質過氧化物，后者分解產生MDA〔8〕。本實驗結果提示地菍乙酸乙酯提取部位能改善DM小鼠自由基代謝異常，對預防糖尿病并發癥發生具有益處。DM小鼠腎臟臟器指數明顯升高，可能是高血糖導致腎功能損傷引起的，而地菍乙酸乙酯提取部位顯著降低腎臟指數，提示其有一定的腎臟保護作用。

1 覃迅云，羅金裕，高志剛.中國瑤藥學〔M〕.南寧：廣西民族出版社，2002:712.

2 李 麗，周 芳，黃瓊珍.地菍的化學成分和藥理作用研究進展〔J〕.廣西中醫學院學報，2011；14(1)：73-5.

3 李 麗，周 芳，羅文禮.地菍水提物對四氧嘧啶致糖尿病小鼠的降糖作用〔J〕.海峽藥學，2008；20(12)：22-3.

4 李 麗，周 芳.地菍提取物對高血糖模型小鼠血糖的影響〔J〕.中國實驗方劑學雜志，2011；17(20)：187-9.

5 李 麗，羅澤萍，周煥第，等. 地菍提取物降血脂作用的實驗研究〔J〕.時珍國醫國藥，2012；23(11)：2783-4.

6 張成秋，楊純珍，葛志明，等.糖尿病心血管病變與一氧化氮及一氧化氮合酶的關系〔J〕.中國老年學雜志，2006；26(3)：262-8.

7 楊桂珍，穆景陽，梁 軍，等.沙棘提取物對糖尿病ICR小鼠血糖及氧化功能的影響〔J〕.中國老年學雜志，2011；31(10)：1788-90.

8 田 剛，付雯雯，周小涵，等.心悅膠囊對2型糖尿病大鼠血糖及血脂代謝的影響〔J〕.中國老年學雜志，2012；32(15)：3236-8.

〔2013-09-16修回〕

(編輯 趙慧玲/曹夢園)

廣西自然科學基金資助項目(2013GXNSFAA019134)；廣西高等學校科研項目(201203YB107)；廣西研究生教育創新計劃資助項目(2011106001007M11)

李 麗(1973-)，女，博士，教授，碩士生導師，主要從事中藥和民族藥藥效及生化藥理研究。

R285.5

A

1005-9202(2015)12-3250-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2015.12.028